标准解读

《GB/T 41799-2022 限制性核酸内切酶杂质检测方法》是一项国家标准,旨在规范限制性核酸内切酶中可能存在的杂质的检测流程。该标准适用于生物技术领域中用于分子克隆、基因组研究等目的的限制性核酸内切酶的质量控制。

根据该标准,首先明确了术语和定义部分,确保所有使用者对涉及的概念有一致的理解。例如,它界定了什么是限制性核酸内切酶以及不同类型的杂质(如蛋白质杂质、DNA污染等)。

接着,在样品准备阶段,详细描述了如何正确地处理待测样品以保证后续分析结果的有效性和准确性。这包括但不限于样品溶解条件的选择、稀释比例等因素。

对于检测方法,《GB/T 41799-2022》提出了多种可行的技术路线供选择,比如高效液相色谱法(HPLC)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)等,并为每种技术提供了具体的操作指南,包括仪器参数设置、实验步骤等关键信息。此外,还特别强调了对照品的重要性,即通过与已知浓度的标准物质比较来定量未知样品中的杂质含量。

最后,标准文件还包括了数据记录与报告的要求,确保整个检测过程透明可追溯。要求记录所有相关的信息,如使用的设备型号、试剂批号、操作人员姓名及日期等,并按照特定格式编写最终报告。


如需获取更多详尽信息,请直接参考下方经官方授权发布的权威标准文档。

....

查看全部

  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2022-10-12 颁布
  • 2023-05-01 实施
©正版授权
GB/T 41799-2022限制性核酸内切酶杂质检测方法_第1页
GB/T 41799-2022限制性核酸内切酶杂质检测方法_第2页
GB/T 41799-2022限制性核酸内切酶杂质检测方法_第3页
GB/T 41799-2022限制性核酸内切酶杂质检测方法_第4页
GB/T 41799-2022限制性核酸内切酶杂质检测方法_第5页
免费预览已结束,剩余7页可下载查看

下载本文档

GB/T 41799-2022限制性核酸内切酶杂质检测方法-免费下载试读页

文档简介

ICS07080

CCSC.27

中华人民共和国国家标准

GB/T41799—2022

限制性核酸内切酶杂质检测方法

Assaymethodofrestrictionendonucleaseimpurity

2022-10-12发布2023-05-01实施

国家市场监督管理总局发布

国家标准化管理委员会

GB/T41799—2022

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范围

1………………………1

规范性引用文件

2…………………………1

术语和定义

3………………1

原理

4………………………1

试剂或材料

5………………1

仪器设备

6…………………2

试验步骤

7…………………2

附录规范性琼脂糖凝胶电泳

A()………………………4

GB/T41799—2022

前言

本文件按照标准化工作导则第部分标准化文件的结构和起草规则的规定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

请注意本文件的某些内容可能涉及专利本文件的发布机构不承担识别专利的责任

。。

本文件由全国工具酶标准化工作组提出并归口

(SAC/SWG11)。

本文件起草单位福建南生科技有限公司通用生物安徽股份有限公司夏禾深圳生物技术有

:、()、()

限公司厦门银祥集团有限公司苏州坤琪生物科技有限公司厦门中集信检测技术有限公司上海鹰姿

、、、、

生命科技有限公司雷谷厦门生物医药有限公司北京化工大学山东大学安琪酵母股份有限公司

、()、、、、

复旦大学武汉科技大学北京中天标科标准化技术研究院有限公司厦门艾德生物医药科技股份有限

、、、

公司

本文件主要起草人黄发灿雍金贵郑登忠张志刚陈劲春陈秀兰江锋赵毅钟江朱力姚娟

:、、、、、、、、、、、

杨忠华李超许文来王永成

、、、。

GB/T41799—2022

引言

限制性核酸内切酶是一类识别双链中特定核苷酸序列的水解酶以内切方式水解

DNADNA,

产生和末端限制性核酸内切酶的作用底物是脱氧核糖核酸其他核酸

DNA,5'-PO33'-OH。(DNA),

内切酶或核酸外切酶的污染会导致底物的降解或消失降低其他核酸内切酶或核酸外切酶的污染是限

,

制性核酸内切酶最重要的质量保证制定限制性核酸内切酶杂质检测方法国家标准用以推动该类工

。,

具酶的产业化对于限制性核酸内切酶的生产和使用具有重要的意义

,。

GB/T41799—2022

限制性核酸内切酶杂质检测方法

1范围

本文件描述了限制性核酸内切酶中污染其他核酸内切酶或核酸外切酶等杂质的检测方法

本文件适用于限制性核酸内切酶杂质的检测

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

31

.

限制性核酸内切酶restrictionendonuclease

以内切方式水解产生和末端识别双链中特定核苷酸序列的水

DNA,5'-PO33'-OH,DNADNA

解酶

32

.

杂质impurity

影响核酸底物存在的其他核酸内切酶和核酸外切酶

4原理

由于无Bam酶切位点有个Bam酶切位点完全酶解后产生条谱

ФX174DNAHI,λDNA5HI,6

带它们的大小及核苷酸顺序均为已知样品中无其他核酸内切酶污染酶解产物在电泳板上形成的谱

,。,

带与酶解时间过长用酶过多无关

、。

由于Bam切开双链产生一对黏性末端其各有个碱基失去互补碱基形成突出单链其

HIDNA,5,

易受核酸外切酶作用丢失若干个碱基乃至形成平末端如果将此连接后再用Bam酶切结果

;DNAHI,

是无法切开如果该位点是在外显子区或编码区即意味其对应的氨基酸序列发生变化乃至某些生物

。,,

性状发生改变例如质粒所含Bam识别位点是在其抗四环素基因上如果使用被核酸外

。pBR322HI,

切酶污染的样品Bam过量长时程切割然后再连接闭环后重新转化受体菌该菌在含四环

HIpBR322,,

素培养基上无法生长而没有这样酶切的

温馨提示

  • 1. 本站所提供的标准文本仅供个人学习、研究之用,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或网络传播等,侵权必究。
  • 2. 本站所提供的标准均为PDF格式电子版文本(可阅读打印),因数字商品的特殊性,一经售出,不提供退换货服务。
  • 3. 标准文档要求电子版与印刷版保持一致,所以下载的文档中可能包含空白页,非文档质量问题。

评论

0/150

提交评论