LY/T 2350-2014松褐天牛携带松材线虫的PCR检测技术规范

ICS65020

B65.

中华人民共和国林业行业标准

LY/T2350—2014

松褐天牛携带松材线虫的PCR检测

技术规范

TechnicalregulationfordetectingBursaphelenchusxylophilusfrom

PinesawerMonochamusalternatusHoebPCRamlification

y(p)yp

2014-08-21发布2014-12-01实施

国家林业局发布

LY/T2350—2014

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国林业有害生物防治标准化技术委员会归口

(SAC/TC522)。

本标准负责起草单位华南农业大学

:。

本标准参加起草单位国家林业局森林病虫害防治总站江西省赣州市林业有害生物防治检疫局

:、。

本标准主要起草人王新荣孙思朱孝伟王永孔祥超宋玉双黄敬怡任路路马伟杰陈晨赖福胜

:、、、、、、、、、、。

Ⅰ

LY/T2350—2014

松褐天牛携带松材线虫的PCR检测

技术规范

1范围

本标准规定了松褐天牛Monochamusalternatus成虫携带松材线虫Bursaphelenchus

(Hope)[

xylophilus检测技术的一般原则和技术要求

(SteineretBuhrer)Nickle]PCR。

本标准适用于利用技术定性检测携带松材线虫的松褐天牛

PCR。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

分析实验室用水规格和试验方法

GB/T6682—2008

动物源性饲料中马驴源性成分定性检测方法方法

GB/T21107—2007、PCR

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件

。

31

.

松褐天牛MonochamusalternatusHope

又名松墨天牛属昆虫纲鞘翅目天牛科墨天牛属

,(Insecta),(Coleoptera),(Cerambycidae),

Monochamus是松树的一种重要蛀干害虫又是松材线虫的主要传播媒介松褐天牛成虫中后胸携

(),,。

带较多松材线虫松褐天牛成虫形态图和脱翅松褐天牛成虫中后胸示意图参见附录

。A。

32

.

松材线虫Bursaphelenchusxylophilus

松材线虫隶属于线虫纲滑刃目滑刃亚目滑刃总科

(Nematoda),(Aphelenchida),(Aphelenchina),

滑刃科伞滑刃亚科伞滑刃属

(Aphelenchoidoidea),(Parasitaphelenchidae),(Bursaphelenchinae),

Bursahelenchus是引起松树枯萎死亡的直接原因也是本标准所要检测的目标

(p),,。

33

.

聚合酶链式反应polymerasechainreactionPCR

;

聚合酶链式反应是体外酶促合成特异片段的一种方法由高温变性低温退火及适温延伸

,DNA,、

等几步反应组成一个周期循环进行使目的得以迅速扩增具有特异性强灵敏度高操作简便

,,DNA,、、

和省时等特点参见中的规定

。GB/T21107—20073.1。

34

.

引物primer

一段短核苷酸序列其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点在聚合反应时刺激合成一条与模板

。,,

互补的的序列

DNA。

35

.

内部转录间隔区internaltranscribedspacer