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文档简介

生命科学与技术学 本科课液相色谱Liquid杨 讲 21、液相色谱法的

流动相在常压下输送，所用的固定相柱效低，分析周期常压柱层析、纸层析、薄层层析高效液相色谱(HighPerformanceLiquidChromatography,借鉴气相色谱理论，流动相改为高压输色谱柱用小粒径的填料填充而成，柱效大大提3HPLC

高压(~107Pa)、高速(~mL/min)、高效(柱效几万到几十万4HPLC

正相/反相层析技离子交换层析技凝胶过滤层析技亲和层析技疏水作用层析技⋯⋯52、液固

(adsorption 液固色

73、分配

8正相色谱与反相色

正相(normalphase)：固定相为极性，流动相为反相(reversephase9反相层析的

4、离子交换色

阳离子交换：R—SO3H =R—SO3M+H阴离子交换：R—NR4OH =R—NR4X+ 思考题离子交换层析的

5、凝胶色

凝胶色谱的

6、亲和色

应用：ProtinA/G、抗原-抗体、生物素-亲和素、 、亲和色谱的

7、疏水

疏水层析与反相层

1、液相色谱的固

硅氧硅碳键型：≡Si—O—Si—C,稳定，耐水、耐光、 化学键合固定相的

2、液相色谱的流

水(最大)>甲酰胺>乙腈>甲醇>乙醇>丙醇 乙酸乙酯梯度洗

525梯度洗脱

低压梯度与高压

1、HPLC的组

2、高压输

部件，压力10～35高压输液泵工作

2、真空脱

溶剂在泵的抽取过真空箱内的特殊塑料膜(气透膜)。当溶剂经真空脱气机工作

3、进样

自动进

自动进样器工作

4、柱温箱与色

液相色

5、检测

⋯⋯二极管阵列检测器

选择性强：适用于多环芳烃、酶、氨基酸、蛋白质等荧光物质的测灵敏度高：比UV-Vis光度法高2－3个数量线性范围较示差折光检测器

44蒸发光散射检测器EvaporativeLightScattering

6、收集

1、HPLC的应

选择分离方式的一

血液中药物浓度

速

食品安全中有机 残留量分12

艾氏3

p,p`- 速：1.5：：

4

p,p`-环境样品中多环芳

2、几类特殊的液相色

型效液相色谱型

型色

DynamicAxialCompression超量载

浓缩法超量载样：容量因子k降低，峰形变成三角

接在柱上使用，需要结合分边缘切割与中心

效液相色

小颗粒要求系统能承受高于目前极限压力UltraPerformanceLiquidUltraHighPerformanceRapidSeparation

UltiMate

ACQUITYUPLC

UPLCv.s.

H=A+B/u+UPLC

H=A+B/u+根据范 色谱理论，柱效反比于系统固定相粒度大UPLC运用了更短的柱子，进一步增加了峰高根据范 色谱理论，最优流速反比于粒度大UPLC的应

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