《实验动物技术研究5300字（论文）》

实验动物技术专业报告：实验动物真菌病分析摘要：当前微生物学和流行病学的不断发展使得真菌病在实验动物中的发生逐渐受到广泛的关注，我国动物真菌病的发病率急剧上升，给动物实验室造成巨大财产损失，因而有必要加强临床对于实验动物真菌病的了解，以为该类疾病未来诊疗方向提供新思路。本研究通过查阅既往文献，对实验动物主要几类真菌病进行了调查了解，并对各类疾病的发生现状及诊疗现况进行了分析，现将其报道如下。关键词：实验动物；真菌病；兽医一、引言真菌在自然界分布广泛，种类繁多。到目前为止，已经发现了超过10万种真菌。大部分是无害的，只有少数(100多种)对人和动物有致病性。随着微生物学和流行病学的不断发展，病原真菌的问题越来越受到重视。致病真菌包括浅部真菌和深部真菌。然而在现代实验动物的饲养环境下，深性侵害已经很少发生。临床报道表明，畜禽饲料中真菌的污染和在动物体内的寄生现象相当严重，而抗生素、皮质类固醇、免疫抑制剂等药物的大量使用和放射医学的快速发展，可促进致病真菌在动物体内的生长繁殖机会[1]。因此，近年来我国动物真菌病的发病率急剧上升，引起了人们的高度重视和广泛深入的研究。有毒真菌及其有毒代谢产物不仅引起动物生长迟缓、免疫力下降、器官功能障碍和中毒死亡，而且对动物具有强烈的致畸、致癌和致突变作用。因此，毒菌在危害动物健康的同时，往往直接或间接造成巨大的经济损失。本研究通过对当前实验动物各类真菌病的发生进行介绍，从而为当前临床诊疗和预防提供新思路，更好的改善当前实验动物真菌感染疾病发生现状。二、实验动物真菌病的现状及常见病原分类（一）实验动物真菌病现状我国实验动物真菌病的研究始于20世纪50-60年代。近40年来，我国发现并深入研究了多种危害严重的动物真菌病，为保护畜禽健康积累了丰富的科学资料。真菌广泛地分布于自然界中,大多数真菌不是致病菌﹐仅有少数对动物或人有害。据报道，能引起动物疾病并产生相应毒性代谢产物的有200多种，引起常见真菌疾病的有10多种[2]。致病真菌多为人畜共患病，不仅可以在实验动物之间相互传染，还可以传染给与患病动物接触的饲养者和动物实验者。动物真菌病是由有毒真菌引起的传染性疾病﹐世界各地及各种动物均有发生，发病率和死亡率都较高。已证实有318种真菌能引起动物疾病，并产生340多种有毒代谢产物。目前我国动物真菌病的研究远远落后于细菌、病毒性疾病，许多动物真菌病的研究尚未取得突破性进展，严重危害畜禽健康[3]。根据我国动物真菌病的研究进展与现状，提出今后本学科的研究方向。（二）实验动物常见病原分类小孢霉属﹑毛癣菌属﹑表皮癣菌属，这些真菌都归于不完全菌类，自然菌纲﹑粉状型分孢生子群。其中一些为有性阶段，在分类上其属于子囊菌纲﹑裸囊菌亚纲等。在传染病学上大致有嗜人体皮肤真菌﹑嗜动物皮肤真菌、嗜土壤皮肤真菌。实验动物主要以嗜动物皮肤真菌感染为主，能引起实验动物的皮肤真菌感染主要有以下几种。须发藓菌在豚鼠、小白鼠、大白鼠、兔、猫、犬等动物身上均有，黄藓菌在大白鼠出现频率高在豚鼠、兔、犬等动物中可见，犬小狍子菌在猫和犬等动物身上较为常见。三、实验容物常见真菌病类型（一）禽曲霉菌病1959年，四川农学院首次报道了我国鸡的曲霉菌病。1961年，广西兽医研究所发表报告说，鸡在实验中患了烟曲霉病。此后，中国农业科学院兰州兽医研究所(1962~1970)对我国禽曲霉菌病进行了详细的调查和研究，发现这种病在我国广泛流行，造成了巨大的经济损失，烟曲霉菌、黄曲霉菌、卵巢霉菌和黑曲霉菌为主要致病菌。这种疾病容易感染各种鸟类，尤其是幼鸟。在我国已发现多种家禽曲霉菌病，如珍珠鸡、乌骨鸡、七彩山鸡、榛鸡、鸭、鹅、天鹅、鹦鹉、野鹤、蜡嘴鸟、鸵鸟、鹤鹑、山鸡、鹪鹩、水貂等，发病率和死亡率均较高。据调查(1963~1970年)，我国部分疫区鸡的死亡率可达24/o~3.3%，而同期死于其他疾病的鸡只有5/~1.9%。1987年3月，河南省通山县兽医医院门诊禽病病例中，曲霉菌占41.95%[4]。1月龄以内幼鸟的曲霉病多为急性，呼吸状态的改变是本病的特征。其特征是伸颈，张口吸气，常发出罗音和口哨声，最后窒息而死。已经耐受的急性雏鸡、中年鸟、成年鸟多为慢性。病变主要形成于呼吸系统，表现为包膜和肺表面灰白色、淡黄色、针尖大如豌豆的结节，结节中央常见曲霉菌孢子和菌丝。本病的诊断目前主要依据病原菌的分离鉴定、临床症状、病理变化，流行病学和病史以及人工发病试验等。国外已有采用血清免疫学诊断禽曲霉菌病的报道，而我国目前尚无这方面的研究。除了服用克霉唑、氟康唑、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶等部分化学药物和制霉菌素、两性霉素B等抗生素药物，以及硫酸铜、碘化钾、亮绿、结晶紫等饮用水溶液外，主要采取对症治疗，中草药配合使用。一般轻者可治愈，重者尤其是器官结节严重者，经紧急治疗无效。目前国内缺乏安全有效的免疫疫苗，主要预防措施是防止饲料霉变，禁止饲喂被霉菌污染的家禽饲料。（二）动物念珠菌病念珠菌病的致病菌为念珠菌属，共9种。在我国，对动物致病的以白色念珠菌最为多见，其次为热带念珠菌。这种疾病易感染多种动物，尤其是家禽。鸡、鸭、鹅、鸽、珍珠鸡、鹧鸪和牛犊的内脏念珠菌病以及大熊猫和豹的皮肤念珠菌病在中国均有发现，尤以鸽子的粘膜和内脏念珠菌病最为常见。1980年以后，广西部分地区发生了一种牛腐蹄病，并呈逐年上升趋势。既往研究对该病的流行病学、病原分离以及小鼠、家兔、火鸡、鹅、山羊、牛、水牛等实验动物进行了研究，最终确认白色念珠菌是牛腐蹄病的病原。禽念珠菌病主要表现在口腔及嗪囊粒膜上形成白膜,呈鹅口疮样,撕脱后可见溃疡出血面。犊牛内脏念珠菌病可伴发念珠菌性乳房炎,阴道炎、肺炎及全身性念珠菌病。皮肤念珠菌病表现局部背毛脱落,形成大小不等的丘疹等,牛表现患肢肿烂、运动障碍。本病的诊断主要依据病原分离鉴定、流行病学、临床症状、病理变化和人工疾病试验。本研究用直接荧光抗体法检查了牛腐蹄病疫区的159头牛，其中荧光阳性46头，占28.9%，并认为体液白细胞荧光抗体阳性只出现在早期病例。另据报道，用试管凝集法测定了奶牛、狗、猫、兔、大鼠等动物的抗念珠菌病血清抗体。结果发现，白色念珠菌是一种完全抗原，可以刺激机体产生抗体。认为白色念珠菌抗体的检测对本病的诊断有参考价值。与禽曲霉病一样，克霉唑、酮康唑、5-氟胞苷、制霉菌素和两性霉素B是治疗该病的主要药物。本研究选用牛胸腺素和猪胸腺素转移因子三种免疫增强剂，比较其对白色念珠菌感染实验小鼠的保护作用。发现两种胸腺素制剂均能延长小鼠存活时间，减少体内细菌数量，增加体重，尤以猪胸腺素为佳。转移因子没有上述有效作用。（三）动物毛霉菌病微小根毛霉(Mucorpusillus)、伞枝犁头霉（Absidialichemi)和足样根霉(Rhizopusrhizopodifoyms)为毛霉菌病的病原。患病奶牛的病理变化有三种类型，即急性早期以循环障碍为主；亚中期可见凝固性坏死和梗死。慢性疾病晚期，病变类似肉芽肿。认为该病的直接原因是饲料和奶牛毛霉属病原真菌的严重感染，过量饲喂浓缩饲料和长期抗生素治疗引起的胃酸中毒是奶牛皱胃毛霉的诱发因素。况且国内也没有这方面的研究报道。实验动物毛霉病的诊断也是根据病原菌的分离鉴定、临床症状、病理变化和动物实验。目前国内尚无该病防治的研究报道。（四）流行性淋巴管炎有关本病的首次报道见于14世纪,第二次世界大战期间传播到世界各地,当时中国也受到本病传染,其病原为伪皮疽组织胞浆菌。这种疾病主要发生在马科动物中。所有年龄的马和骡子都易受感染。发病率一般为2%o~5%，死亡率为20%~30%。病畜排泄物是主要传染源，家畜与病原菌的直接或间接接触是主要感染途径。蚊子、苍蝇和蛇等昆虫是这种疾病病原体的机械传播者。本病病灶最常见于四肢、头部，特别是唇部，其次为颈、背腰、胸侧和腹侧，在这些部位形成结节，继而形成脓肿，破溃后流出脓汁，遗留溃疡，或病原菌从原发性病灶向外扩散，侵入淋巴管，使之发炎﹐肿胀，形成淋巴管索肿。本病的治疗采用局部处理和全身疗法相结合，常用的全身治疗药物有新肿凡纳明，碘化钾、美兰、穿心莲等。（五）真菌皮肤病皮肤病原真菌分属三个属：小孢子菌属和表皮癣菌属，为半知菌亚门、丝孢菌纲、丝孢菌目、从梗孢科中的两个属；毛癣菌属，为半知菌亚门、梗丝孢菌纲、丝孢目﹑束梗孢科中的一个属。其中引起实验动物发病的约有12个种。羊毛状小孢子菌，又称犬小孢子菌，主要寄生于犬，还可引起猫、猴、兔、豚鼠、大小鼠、猪﹑羊等感染。本菌在沙氏琼脂培养基室温培养生长迅速。开始为黄色绒毛样生长，2周后菌丝较多，呈羊毛状，可充满大部分斜面。大多在头部，开始时为灰白色鳞屑斑，逐渐扩大。初发损害称母斑，在母斑外围可能有后发的、小片圆形的损害称子斑。有时，母子斑融合成大片灰白色的鳞屑斑，引起毛发松动，在距发根2~4mm处折断，外围白套称菌鞘，具很强的传染性。石膏样小孢子菌为亲动物性皮肤癣菌，常引起啮齿类、兔、犬和灵长类感染。感染后可在皮肤上引起强烈的炎症反应，偶尔产生脓疱痂样损害，有特殊的鼠尿味。也可导致毛发感染呈现脓疱样表现。这种真菌引起的体癣类似于绵状小孢子菌感染引起的体癣，鳞屑少，通常只有1-3片，炎症现象相当明显，除了环状外，也可呈湿疹样。石膏样毛癣菌又称须癣毛癣菌，为发外型亲动物性皮肤癣菌。菌落形态多样。可感染多种实验动物和人,是最常见的一种皮肤病原真菌。本菌主要引起体股癣，四肢癣，头癣，脓癣﹑须癣及皮肤肉芽肿性损害和癣菌疹。损害为环形或多环形，色红，常有较急性的炎症反应，中央皮肤正常，愈合倾向明显，无色素沉着，皮损直径较小，但数目较多，边缘常有明显的小的水疱。脓癣：皮损化脓。本菌是脓癣的首位病原菌，约占50%左右。癣菌疹：有以下几种表现：苔藓样；荨麻疹样；丹毒疹样；水疱样。深部感染多引起脓肿和肉芽肿。四、实验动物常见真菌病的临床诊疗及预防（一）临床诊断对本病的诊断可根据临床病变症状和病原的分离鉴定加以确诊，但本病常与体外寄生虫﹑葡萄球菌病的临床症状类似，且有混合或继发感染，有可能在分离出寄生虫或细菌后忽视皮肤病原真菌的情况在实际中应特别注意，避免产生误诊。实验动物感染初期往往无症状，在到一定的阶段后，会出现圆形、不规则形的被毛脱落及皮肤损伤，一般多见于头颈部﹑背部以及全身各部位。有些还会出现红斑丘疹﹑鳞屑等，但多数动物没有痒感。由于皮肤毛囊的破坏，病变会慢慢地涉及到皮肤深层，这时会出现明显的脓疮和痴。在一些动物中本病常与疥螨﹑糯形螨混合感染剽，实验动物也常因疥螨﹑糯形螨等体外寄生虫的感染而诱发皮肤真菌感染。此外，微生物检验也是实现对患者诊断的重要途径。刮取病畜头、耳等易感部位的皮毛和新鲜碎屑放在载玻片上，滴加10%氢氧化钾，处理后镜检可见许多大小约3um~5um的结节状孢子附着在砖墙内的皮毛上。磷碎片中可见葡聚糖凝胶。（二）临床治疗可以服用一些化学药物和抗生素，如CuSO4KI、克霉唑、氟康唑、制霉菌素、两性霉素B5-FC、扑尔敏等。但通常在发病初期和病情较轻时有效。而当疾病发展到中期，甚至是病原体侵入内脏导致发病时，此时的治疗就没有效果了。对于在标准饲养环境下饲养的实验动物，必须对患病动物进行隔离和消灭。根据卫生部发布的相关规定，用于科学实验的实验动物感染皮肤真菌后不能作为实验使用。但一些具有较大经济价值的实验动物，如狗、兔、猴等，在感染初期是可以得到适当治疗的。一般使用灰黄霉素、曲安奈德尿素软调、利康唑。据报道，该混合物水杨酸钠12g，苯甲酸6g，60%乙醇，连续使用8次，效果良好。二价灭活皮肤癣菌二次免疫可保护皮肤真菌达80%，免疫期至少半年。但处理后的动物只能用于教学和一般的预试验，不能用于科学实验。（三）预防建议动物真菌病不仅感染动物，感染患病动物的饲养者和实验者，还会影响科学实验的准确性。同时，一些真菌也会产生真菌毒素，对实验动物的繁殖性能也会产生很大的影响，所以要引起足够的重视。为了预防实验动物患此病，应做好以下工作:(1)做好环境卫生，对新引进动物严格进行真菌检测，确认健康合格，同时建立核心种群，定期对动物进行微生物学监测；(2)有条件的，保持实验动物处于无特定病原体状态，并对设施、器具、设备、饮用水、饲料等进行消毒灭菌。防止野鼠、昆虫侵入饲养室，为饲养人员、实验人员、参观人员提供卫生管理制度；(3)一旦发现患病动物，立即对同一单元饲养的动物进行处理和焚烧，并对周围环境进行消毒。除上述外，根除动物携带者的目的是培育不育动物、SPF动物和原虫。注射、药物治疗等。不适用于实验动物。五、小结因为很多致病真菌都是条件致病菌，除了少数急性临床病例外，其余都是慢性消耗性疾病，所以不像细菌和病毒性疾病那样广泛，危害性大，所以一直没有引起人们的重视。然而，如上所述，随着抗生素和皮质类固醇的广泛使用，近年来动物真菌病的发病率急剧上升，新的致病真菌和真菌不断被发现。一些原本对畜禽无致病性或弱致病性细菌转为疾病的病例频频发生。对动物健康的危害越来越严重，有必要进一步加强该学科的