芳胺类药物的分析

关于芳胺类药物的分析第一页，共六十二页，2022年，8月28日基本要求

一、掌握芳胺类、苯乙胺类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法。第二页，共六十二页，2022年，8月28日第一节芳胺类药物的分析芳胺类药物分为两类芳伯氨基未被取代芳伯氨基被酰化一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物第三页，共六十二页，2022年，8月28日苯佐卡因盐酸普鲁卡因第四页，共六十二页，2022年，8月28日盐酸丁卡因盐酸普鲁卡因胺第五页，共六十二页，2022年，8月28日1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。（二）主要理化性质水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸丁卡因外水产物为对丁基氨基苯甲酸外，上述均为对氨基苯甲酸。弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具有弱碱性。4.其它特性：因结构中有芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。第六页，共六十二页，2022年，8月28日二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物第七页，共六十二页，2022年，8月28日对乙酰氨基酚（扑热息痛）第八页，共六十二页，2022年，8月28日盐酸布比卡因盐酸利多卡因第九页，共六十二页，2022年，8月28日

1.水解后显芳伯氨基特性：分子结构中含有芳酰氨基，酸水解后显芳伯氨基的特性反应。注意空间位阻的影响。

2.水解产物易酯化：对乙酰氨基酚，酸水解生成醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋酸乙酯香味。

（二）主要化学性质第十页，共六十二页，2022年，8月28日3.酚羟基特性：对乙酰基酚有游离酚羟基，可与FeCl3

发生显色反应。4.弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可相互区别。5.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨基上氮可与Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。第十一页，共六十二页，2022年，8月28日三、鉴别试验（一）重氮化-偶合反应

分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生此反应。Ar-NH2HClNaNO2重氮盐OH--萘酚橙黄~猩红色第十二页，共六十二页，2022年，8月28日

直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺间接反应：对乙酰氨基酚利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。

丁卡因虽无芳伯氨基，但可与NaNO2反应生成N－亚硝基化合物的乳白色沉淀。

第十三页，共六十二页，2022年，8月28日第十四页，共六十二页，2022年，8月28日第十五页，共六十二页，2022年，8月28日（二）与三氯化铁反应对乙酰氨基酚+FeCl3蓝紫色化合物第十六页，共六十二页，2022年，8月28日

1.与铜和钴离子反应：

利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物；与氯化钴生成亮绿色沉淀。（三）与金属离子反应第十七页，共六十二页，2022年，8月28日第十八页，共六十二页，2022年，8月28日2.羟肟酸铁盐反应

基于普鲁卡因胺分子中的芳酰胺结构。第十九页，共六十二页，2022年，8月28日3.与汞离子反应盐酸利多卡因+H2NO3+Hg(NO3)2黄色对氨基苯甲酸酯＋H2NO3+Hg(NO3)2红色或橙黄色第二十页，共六十二页，2022年，8月28日1.盐酸普鲁卡因的鉴别

(四)水解产物反应盐酸普鲁卡因+NaOH普鲁卡因油状物对氨基苯甲酸钠+二乙氨基乙醇（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）对氨基苯甲酸钠+HCl对氨基苯甲酸（白色）第二十一页，共六十二页，2022年，8月28日第二十二页，共六十二页，2022年，8月28日2.苯佐卡因的鉴别

苯佐卡因+NaOH乙醇乙醇+I2

+NaOHCHI3（碘仿臭气，黄色沉淀）第二十三页，共六十二页，2022年，8月28日(五)紫外特征吸收光谱法

1.在λmax处测定供试液的百分吸收系数。

例如：对乙酰基酚在0.4%NaOH中于λmax=240nm;E1%1cm=715在HCl(0.1nol/L)-甲醇于λmax=249nm;E1%1cm=8802.在规定的浓度测定λmax

例如：盐酸普鲁卡因胺5μg/ml;λmax=280nm(六)红外吸收光谱法（略）第二十四页，共六十二页，2022年，8月28日（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查

1.乙醇溶液的澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。

四、特殊杂质检查第二十五页，共六十二页，2022年，8月28日检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色；如显混浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，与棕红色2号或橙红色2号标准液比较，不得更深。2.有关物质检查：Ch.P是以对氯苯乙酰胺为对照品，采用TLC法中的杂质对照品法。3.对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化合物，采用比色法。1.乙醇溶液的澄清度与颜色：第二十六页，共六十二页，2022年，8月28日(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查为什么要检查？怎样检查？原中国药典采用TLC法中的杂质对照品法进行检查。（现行中国药典采用HPLC法检查）第二十七页，共六十二页，2022年，8月28日（一）亚硝酸钠滴定法

Ar-NH2;Ar-NHCOR;Ar-NO2均可采用此法

Ch.P中的苯佐卡因；盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法。五、含量测定第二十八页，共六十二页，2022年，8月28日第二十九页，共六十二页，2022年，8月28日1.原理：Ar-NHCOR+H2OAr-NH2+RCOOHH+Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2O第三十页，共六十二页，2022年，8月28日测定主要条件：(1)加KBr增加反应速度重氮化的反应历程为：NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2OKHCl第三十一页，共六十二页，2022年，8月28日第三十二页，共六十二页，2022年，8月28日KBr+HClHBr+KClHNO2+HBrNOBr+H2OKHBr∵

KHBr比KHCl大300倍∴生成NOBr量大得多∴加快反应速度第三十三页，共六十二页，2022年，8月28日

(2)加过量HCl加速反应：

①重氮化速度加快；

②重氮盐在酸性介质中稳定；

③防止生成氨基偶氮化合物。

Ar-N2+Cl-+H2N-Ar

Ar-N=N-NH-Ar+HCl

一般摩尔比为Ar-NH2:HCl=1:2.5~6。第三十四页，共六十二页，2022年，8月28日(3)室温条件下滴定:温度高反应速度快；每升高10℃加快2.5倍太高,可使Ar-N2+Cl-+H2OAr-OH+N2+HCl(4)滴定管尖端插入液面下滴定第三十五页，共六十二页，2022年，8月28日

3.指示终点的方法

(1)永停滴定法

溶液检流计

终点前：

无过量无电流

HNO2

终点时：有过量有电流（使指针偏离零

HNO2永停在某一位置）

(2)外指示剂法

用KI-淀粉指示剂指示终点的原理：

2NaNO2+2KI+4HCl

2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2OGVVR1R2+V第三十六页，共六十二页，2022年，8月28日(二）非水溶液滴定法(略)第三十七页，共六十二页，2022年，8月28日

1.对乙酰基酚原料的含量测定在0.4%NaOH介质中；257nm

D%＝［E1%1cm]样／［E1%1cm]标×100％；E1%1cm＝715

2.对乙酰基酚片溶出度测定（测定条件同上）1片＋稀HCl24ml+H2O1000ml精密量取5ml+0.4%NaOH10ml+H2O100mlλ257nm测定A。W×1／1000×5／100×100＝C（g/100ml)

W(g)=200×C;C=A/715∴溶出度＝W／标示量×100％＞80％为合格（三）分光光度法第三十八页，共六十二页，2022年，8月28日此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两者的含量，该法简单准确。

色谱条件：色谱柱为μBondapakC18300mm×4mm

流动相为甲醇－1％HAc(40:60);UV检测器250nm.

（四）HPLC法第三十九页，共六十二页，2022年，8月28日第二节苯乙胺类药物的分析一、苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质（一）基本结构与典型药物*第四十页，共六十二页，2022年，8月28日常见的苯乙胺类药物第四十一页，共六十二页，2022年，8月28日第四十二页，共六十二页，2022年，8月28日第四十三页，共六十二页，2022年，8月28日第四十四页，共六十二页，2022年，8月28日

（二）主要化学性质

1.弱碱性本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮显弱碱性。

2.酚羟基特性本类药物结构中有酚羟基，可与FeCl3;发生氧化。

3.光学活性多数药物结构中有手性碳原子，具有旋光性。第四十五页，共六十二页，2022年，8月28日二、鉴别试验(一)与三氯化铁反应Ar-OH＋FeCl3络合显色＋碱液紫红色第四十六页，共六十二页，2022年，8月28日。

(二）甲醛－硫酸反应

在此试剂中形成醌式结构而显色。

药物

三氯化铁

甲醛－硫酸

肾上腺素0.1mol/LHCl显绿色,甲氨试液显红－紫红红色重酒石酸去甲肾上腺素绿色,加NaCO3试液显紫色－红色淡红色盐酸去氧肾上腺素紫色玫瑰红橙红棕红盐酸异丙肾上腺素深绿色,加5％NaCO3试液显蓝紫色－红色棕色暗紫色第四十七页，共六十二页，2022年，8月28日(三）氧化反应

本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而显色，例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被I2,H2O2

氧化后，生成肾上腺素红；盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧化，生成异丙肾上腺素红。第四十八页，共六十二页，2022年，8月28日(四）紫外特征吸收与红外吸收光谱例如：

盐酸异丙肾上腺素0.05mg/mlλmax=280nmA=0.50这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别第四十九页，共六十二页，2022年，8月28日

(一)酮体检查

本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢化不完全，易引入酮体杂质。

采用UV法检查：

利用酮体在310nm有吸收，本类药物无吸收。例如：肾上腺素本项检查配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.05

盐酸去氧肾上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.02盐酸异丙肾上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.15

三、特殊杂质检查第五十页，共六十二页，2022年，8月28日220260300nm肾上腺酮及肾上腺素的紫外吸收曲线λmax310nm第五十一页，共六十二页，2022年，8月28日(二)有关物质的检查

采用TLC法（或HPLC）中的高低浓度对比法进行检查。

(三)盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查

采用PC法中的杂质对照法进行检查。第五十二页，共六十二页，2022年，8月28日

(一)非水溶液滴定法

本类药物的原料药多采用此法。本法重点将在第八章讨论。

1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定

相当于［B］的有机酸盐可直接滴定。

2.盐酸克仑特罗的测定

相当于［B］的HX酸盐不能直接滴定，需加Hg(Ac)2处理后滴定。

3.硫酸沙丁醇的测定

相当于［B］的H2SO4盐可直接滴定,也可处理后滴定。四、含量测定第五十三页，共六十二页，2022年，8月28日(二)溴量法本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及其注射液用此法。基本原理：第五十四页，共六十二页，2022年，8月28日(三)比色法

利用药物分子结构中的Ar-OH与Fe3＋络合显色，进行比色测定；也可利用药物分子结构中的Ar-NH2重氮化偶合显色，进行比色。第五十五页，共六十二页，2022年，8月28日例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定第五十六页，共六十二页，2022年，8月28日(四)HPLC法

例一、重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定采用RPIP-HPLC-UV法；用外标一点法进行定量测定。

例二、血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定采用RPIP-HPLC-EChD法；用标准曲线法进行定量测定。第五十七页，共六十二页，2022年，8月28日练习与思考[A型题]1．盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是A.水杨醛B.间氨基酚