第三组-筒箭毒

筒箭毒对神经——肌接头的兴奋传递的影响

第三组员：吕青，石径，苏萌，任燕北，牛亚蒙，王创威指导老师：赵文超Page

2当神经纤维传来的动作电位到达神经末梢时，接头前膜首先发生去极化，膜的去极化引起该处膜上存在的电压门控钙通道开放，钙离子内流，钙离子浓度增高，促使突触小泡向接头前膜内侧移动，经出胞过程释放ACh至接头间隙，与终板膜上的受体结合，引起膜通透性改变,离子通道开放，使终板膜发生去极化，产生终板电位，触发收缩偶联，引起肌肉收缩。其后ACh极迅速被突触间隙的胆碱脂酶水解灭活。

实验的原理：Page

3新斯的明又名普洛色林、普洛斯的明，是拟胆碱药中的抗胆碱酯酶药之一，是毒扁豆碱的人工合成代用品，有甲基硫酸新斯的明和溴化新斯的明两种，均为白色结晶性粉末，无臭，味苦，极易溶于水，易溶于乙醇，几乎不溶于乙醚。新斯的明进入机体后，通过可逆性抑制胆碱酯酶活性，使乙酰胆碱不能水解，从而提高体内受体部位的乙酰胆碱浓度，加强和延长乙酰胆碱的作用，呈现出全部胆碱能神经兴奋的效应。Page

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筒箭毒属于非去极化肌松药，又称竞争型肌松药(competitivemuscularrelaxants)，右旋体具药理活性。此类药物与运动神经终板膜上的N2胆碱受体结合，能竞争性地阻断ACh的除极化作用，不引起膜通透性改变，致使离子通道关闭，终板膜不能去极化产生动作电位，使骨骼肌松弛。新斯的明抑制胆碱酯酶，使神经未梢释放的ACh不被破坏。ACh浓度升高而竞争性地对抗筒箭毒碱的肌松作用。5通过观察神经电、肌电与肌肉收缩，了解筒箭毒碱的对于骨骼肌神经—肌肉接头处兴奋传递的影响，并分析其作用机制。实验的目的：6实验对象：蟾蜍

蛙类的一些基本生理活动规律与温血动物相似，而维持其离体组织正常活动所需的理化条件比较简单，易于建立和控制。因此在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋。为什么老是我？Page

7实验的仪器与试剂：蛙类手术器械一套、0.01％筒箭毒碱(任氏液配制)、0.05％新斯的明(任氏液配制)、任氏液、细线保护刺激电极2支、开放刺激电极2支、双向电路开关、电子刺激器、隔离器、张力换能器、计算机实时记录分析系统Page

8实验的仪器与试剂：蛙类手术器械一套、0.01％筒箭毒碱(任氏液配制)、0.05％新斯的明(任氏液配制)、任氏液、细线

保护刺激电极2支、开放刺激电极2支、双向电路开关、电子刺激器、隔离器、张力换能器、计算机实时记录分析系统Page

9实验步骤：一、制备脊蛙二、制作坐骨神经腓肠肌标本，将制作的标本与任氏液中浸泡5-10分钟。三、检查标本的兴奋性，用经任氏液清润的锌铜弓轻轻接触一下坐骨神经，如腓肠肌发生迅速而明显的收缩，则表明标本兴奋性良好，实验可用。四、将制作的坐骨神经腓肠肌标本安装刺激电极和记录电极，并与张力换能器计算机实时记录分析系统相连。用改变双向开关的方向来控制刺激神经或肌肉。将肌腱上的细线缚于张力换能器，使之与记录系统相连，以记录肌肉的收缩。各仪器接地线。Page

10五、1)寻找最适刺激强度将标本的股骨残端固定于肌动器的螺丝孔内。进入“刺激强度与反应的关系”实验模块，选择程控模式，设置参数为起始刺激0.02伏，每间隔1秒，刺激强度增加0.01伏。随着刺激强度增加，肌肉收缩产生的张力不断增大直至最大值，此时如果接着增加刺激强度，肌肉收缩产生的张力不会继续增大。肌肉出现最大收缩张力时所对应之最小刺激强度即为最适刺激强度。2)以最适强度刺激坐骨神经，连续测量并记录乙酰胆碱的浓度变化；观察并记录神经电位、肌电位及肌肉收缩情况，Page

113)向坐骨神经腓肠肌持续标本滴加0.01％筒箭毒碱，当肌电消失时，注意坐骨神经电位的变化。放置一段时间，待标本恢复正常之后，以最适强度刺激坐骨神经，再次连续测量并记录乙酰胆碱的浓度变化。然后改变双向开关方向，用电直接刺激肌肉，观察肌电活动与肌肉的收缩。4)停止刺激肌肉，持续刺激坐骨神经。同时缓慢滴加0.05％新斯的明0.15ml／100g，观察神经电位、肌电位和肌肉活动变化情况。六、再制作两组蛙的坐骨神经肌标本，重复实验，记录实验结果。Page

12预期结果：刺激坐骨神经，神经动作电位出现，肌电位出现，肌肉收缩。当滴加筒箭毒后，刺激坐骨神经，神经动作电位正常，但不出现肌电位，肌肉不收缩。直接刺激肌肉，肌电位出现，肌肉正常收缩。在开始测量时，2）中的测量浓度与3）中的相等，在随后的测量中，3）中的测量浓度比2）中的高。当滴加新斯的明后，神经动作电位仍正常，肌电位变为正常，肌肉收缩。Page

13实验分析：

结果说明箭筒毒对神经—肌接头兴奋有抑制作用。直接刺激肌肉，肌电位出现，肌肉正常收缩，说明肌细胞正常，筒箭毒不是通过损伤肌细胞来抑制肌肉收缩。由于随后的测量中，3）中的ACh浓度比2）中的高，说明筒箭毒不是通过直接分解乙酰胆碱或者增强乙酰胆碱酯酶活性来降低乙酰胆碱浓度从而抑制肌肉收缩的。滴加新斯的明后，兴奋传递恢复正常，肌肉再次正常收缩，说明筒箭毒没有破坏乙酰胆碱能受体。并且由于新斯的明可抑制胆碱酯酶，使神经末梢释放ACh不被破坏，ACh浓度升高。ACh浓度升高后，肌肉又恢复收缩，说明是筒箭毒与ACh竞争性抑制，结合终板膜的受体而形成的。若滴加筒箭毒后未出现预期结果，可能是因为筒箭毒的浓度太低，达不到与ACh竞争的浓度，肌肉仍正常兴奋，肌肉收缩。若滴加新斯的明后未出现预期结果，可能是因为新斯的明的浓度太低，达不到抑制乙酰胆碱酯酶活性的效果，肌肉不收缩。Page

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制备神经肌肉标本过程中，要不断滴加任氏液，以防止标本干燥，丧失正常生理活性。

滴加筒箭毒碱和新斯的明溶液过程中避免两刺激电极接触，发生短路。

操作过程中应避免强力牵拉和手捏神经或夹伤神经肌肉。

分离神经时注意手和金属器械不要碰到神经。

筒箭毒碱和新斯的明溶液要以任氏液为溶剂。

保持张力转换器与标本连线的张力保持不变。15参考文献：1.人民卫生出版社，生理学（第2版），北京，2012年12月，57页2.郑州大学生理教研室，《生理实验指导》，2010年十二月3.

医学全在线>药学理论>临床用药须知>麻醉药及其辅助药物>正文:筒箭毒碱的副作用/药理作用/适应症/用法用量Page

16杀人又救命的箭毒用毒药杀人是古今中外谋杀案中经常采用的方法，在中国有大家熟知的潘金莲用砒霜毒杀武大郎，杨乃武与小白菜案中用巴豆泄死证人的药店老板等等。拿破仑的死亡据说也有毒杀嫌疑。到了近代，发现了更为阴险的毒药，可以做到既看不到明显的中毒症状，也化验不出来，因为箭毒进入人体后会很快分解为对人体无害的物质，这给法医正确判定死者的死因增加了极大的困难。1994年年初，日本警方相继接到5名男女失踪的报案，正当警方为这件渺无头绪的案件发愁时，1月26日突然接到报告说，在盐尻市的农田里发现了一具无名女尸，接着警方又在附近搜索，3周内又挖掘出一具男尸。次日又在雪下个不停的冻土中挖出3具尸体。这5具尸体的共同特征是，没有任何的明显外伤，而且在进一步的验尸中也为发现任何异常，致使破案工作陷入绝境。但是在寻访死者家属中却意外地收获了一个引人注目的线索，即这5人均是爱犬的人，恰好当地有个训犬所，警方沿着这一线索进行追踪，终于将1名自报在训犬所作训犬员的嫌疑男子抓获，在警方强大的攻势下，男子承认自己以训犬为诱饵引诱他们落入圈套，然后注射氯化琥珀胆碱骨骼肌松弛剂（箭毒）。

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