七白膏对中波紫外线诱导豚鼠色素沉着模型的影响研究

七白膏对中波紫外线诱导豚鼠色素沉着模型的影响研究任金平;王平;王媚;倪亚杰【摘要】ObjectiveToobserveinfluenceofsevenwhitecreamonguineapigspigmentationmodelsinducedbyultravioletB(UVB).MethodsNB-UVBinducedpigmentationanimalmodels.Afterestablishingmodels,theareasofpigmentationweredividedintofourgroups:traditionalChineseherbsevenwhitecreamgroup,2%hydroquinonegroup,largeheadatractylodesrhizomegroupandsinglematrixgroup,andthencoatedthemoncorrespondinglesions.Aftertreamtmentforfourweeks,theefficacyofthetesteddrugwasevaluatedcomprehensivelybysuchmeasuresasmelaninindex,melanocyte,melaninaswellasthehistopathologyofskin.ResultsItshowedthatthetesteddrugcouldgreatlydecreasethelevelofmelaninindex,restraintheactivityofmelanocyte,reducethegenerationofmelanin,andrelievepigmentationcausedbyUVB.ConclusionSevenwhitecreamhasobvioustreatmentfunctiontoNB-UVB-inducedpigmentation,anditpossiblemechanismsareinhibitingtheproliferationofmelanocytesanddecreasingmelaningeneration.(ultravioletB,UVB)诱导的色素沉着豚鼠模型的影响.方法紫外线光疗仪诱导建立色素沉着豚鼠模型.建模成功后,将豚鼠背部色素沉着区域分为七白膏组、2％氢醌乳膏组、白术单体组和单基质乳44肤进行黑色素指数、黑素颗粒、黑素细胞以及皮肤组织病理学检查观察药物的疗效和安全性.结果外用七白膏可显著降低皮肤黑色素指数水平,抑制黑素细胞活性,减UVBUVB诱导的豚鼠皮【期刊名称】《中国中西医结合皮肤性病学杂志》【年(卷),期】2013(012)001【总页数】4页(P9-12)【关键词】七白膏;中波紫外线;色素沉着;豚鼠【作者】任金平;王平;王媚;倪♘杰【作者单位】浙江中医药大学,杭州310053【正文语种】中文【中图分类】R758.5+4皮肤色素沉着临床十分普遍，严重者损容，给患者带来很大的心理负担，影响患者生活质量。日光中的中波紫外线被认为是引起皮肤色素沉着的主要原因。由于色素沉着的发病机制至今仍未完全阐明，尽管临床上治疗方法层出不群，但一直缺乏起效较快、有效率高、不良反应小、复发率低的治疗方法。近年来中药对皮肤色素沉着的改善作用引起广泛关注，临床上外用中药美白制剂治疗黄褐斑等皮肤色素沉着有效，七白膏就是其中具有代表性的的一个。本研究选择七白膏，应用于中波紫外来客观评价药物的治疗作用及可能的作用机制。材料与方法材料动物采用普通级健康雄性棕黄色豚鼠1010240～260g，4药物中药七白膏由白术、白芷、白芨、白蔹、白附子、白茯苓、细辛外加鸡子白组成[1]，各味中药均购自江苏江阴天江药业有限公司，委托专业药师进行质量鉴定，经杭州市第三人民医院制剂室制成乳膏制剂；2%氢醌乳膏购自广东人H2004008820110503；白术单体乳膏和单基质乳膏由杭州市第三人民医院制剂室制作。仪器SS-04B（上海希格玛高技术有限公司）；MPA9CK）；皮肤共聚焦激光扫描显微镜(confocallaserscanningmicroscopy，CLSMVIVASCOPE1500nm16.0mW；黑素染色试剂盒（MST-8015）购自福州迈新生物技术开发有限公司。方法色素沉着模型制作使用SS-04B疗仪正对豚鼠皮肤距皮肤15cm左右，根据文献[2]每次照射能量为500mJ/cm2，隔日1次，共3次。每次照射后豚鼠皮肤可出现轻度发红，但无肿胀，无水疱、血疱。4予七白膏药膏、2%氢醌乳膏、白术单体和单基质乳膏外涂，2/d431黑色素指数测定应用MPA94周后分别测定豚鼠背部各区域皮肤黑色素指数变化。活体下黑色素及黑素细胞观察应用CLSM4组织病理观察豚鼠皮肤常规石蜡切片，FeSO45统计学方法数据用均数±标准差（±s）表示，各组间采用tP<0.05SPSS17.0结果皮肤颜色变化SS-04B（1500mJ/cm2）豚鼠背1d，3d5～7d1验组用药过程中未见明显红斑、脱屑等不良刺激，用药 4周后色素沉着显著减退2%氢醌组，用药4～6d皮肤出现发红、脱屑，4周后色素沉着明显减退；白术单体组用药过程中未见发红、脱屑，用药4周后色素减退不明显；单基质组4周后未见明显色素减退。黑色素指数比较31数较照射前显著升高（P<0.01），1。1照光前后豚鼠皮肤黑色素指数比较（±s）注：与照光前比较，*P<0.01组别n黑色素指数照光前40170.00±60.36照光后40352.50±91.35*4前无明显变化（P>0.05）；44（P<0.01），七白膏组连用4周后，黑色素指数较用药前显著下降（P<0.01）。白术单体组与单基质乳膏组相比黑色素指数差异无统计学意义（P>0.05）；2%氢醌组与单基质乳膏组相比黑色素指数明显下降（P<0.01），较白术单体组明显下降（P<0.01）；七白膏组与单基质乳膏组相比黑色素指数显著下降（P<0.01），与白术单体组相比明显下降（P<0.01）但与2%氢醌组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。表2药物干预前后各组皮肤黑色素指数比较（±s）注：*P<0.01；△P>0.05。组别n药物干预前药物干预后单基质乳膏组10白术单体乳膏组10353.30±101.62322.60±85.63△344.0086.97323.20±85.06△2%氢醌乳膏组1010354.7087.41208.90±66.54*358.00±101.34203.20±63.43*CLSM42%氢醌组与七白膏组树枝状黑素细胞数量及色1。1CLSM③2%氢醌：黑色素颗粒明显减少，残留少量树枝状黑素细胞；④七白膏：黑色素颗粒显著减少，局部可见数量不定树枝状黑素细胞；⑤白术单体乳膏：见较多折光明亮的黑素颗粒和黑素细胞；⑥单基质乳膏：可见大量折光明亮的黑色素颗粒和黑素细胞。444少；七白膏组外用4周后黑素颗粒较单基质乳膏组明显减少。见图2。组织切片中黑素颗粒计数结果见表4。图2照光后及用药4周后各组皮损组织病理像（FeSO4染色×100）①照光前豚鼠表皮基底层几乎看不到黑素颗粒；②照光后：基底层可见大量黑素颗呈粒带状分布,棘层黑素颗粒帽状分布；③单基质乳膏组：基底层可见较多黑素颗粒；④白术单体组：基底层仍可见较多的黑素颗粒；⑤2%氢醌组：基底层黑素颗粒明显减少；⑥七白膏组：基底层黑素颗粒显著减少。表4组织切片中黑素颗粒计数分析注：与照光前比较△P<0.01；与照光后比较*P>0.05，**P<0.01。组别n黑素颗粒计数（个）照光前51.42±0.5253.82±1.49△单纯基质组53.76±1.42*白术单体组53.71±1.35*2%氢醌组52.18±0.85**七白膏组52.07±0.79**讨论皮肤色素沉着是皮肤科常见的一类疾病，易诊难治，严重影响患者生活质量和心理健康。日光中的中波紫外线辐射越来越受到关注。近年来UVB照射豚鼠构建色素沉着实验动物模型已被成功应用[3]。根据文献资料[2]，豚鼠UVB的最小红斑量为200～300mJ/cm2，采用局部双倍最小红斑量的紫外线剂量（500mJ/cm2）分次间歇照射棕黄色豚鼠的方法,既减少红斑水疱的发生,又可形成稳定均匀的色素沉着,便于实验中观察和数据记录。本研究选择单次500mJ/cm2，总剂量1500mJ/cm2的方法所形成的色素沉着均匀、稳定。皮肤色素沉着的治疗一直是困扰医生和患者的一个难题，尽管治疗方法很多，但缺外用可引起局部皮肤红斑、脱屑瘙痒和刺痛等不良刺激，刺激性与浓度及接触时间有关[4]。研究表明黑素细胞过度增殖和黑素合成进行性增多是导致色素沉着发生或加重的重要因素[5]，抑制黑素细胞增殖和黑素合成可减少皮肤色素沉着的发生和发展。理想的皮肤脱色剂是能直接或间接抑制黑素细胞增殖和黑素合成，脱色迅速且无明显不良刺激、不易复发的制剂。近年来随着祖国医药的现代化开发应用，一大批经方显现出其独特的优势，七白膏就是其中具有代表性的一个方剂，中药七[1细辛外加鸡子白组成，张建华等[6]1010氢醌的红斑、脱屑等不良刺激。得深入研究并推广应用于临床。【相关文献】［1］王怀隐.太平圣惠方[M].北京：人民卫生出版社,1982:1200-1235.［2］TobiishiM,HaratakeA,KaminagaH,etal.PigmentationinintrinsicallyagedskinofA1guineapigs[J].PigmentCellRes,2004,17:651-658.［3］MaedaK,NaganumaM.Topicaltrans-4-aminomethylcyclohexanecarboxylicacidpreventultravioletradiation-inducedpigmentation[J].JPhotochemPhotobiolB,1998,47:136-141.［4］MauricioT,KarmonY,KhaiatA.Arandomizedandplacebocontrolledstudytocomparetheskin-lighteningefficacyandsafetyofligninperoxidasecreamvs.2%hydroquinonecream[J].JCosmet