高中生物苏教版生物技术实践本册总复习总复习 第4章微专题突破

微专题突破几种物质提取的归纳比较一、几种物质的提取方法、原理和步骤的比较提取物质提取方法提取原理步骤蛋白质凝胶色谱法不同蛋白质相对分子质量大小不同①样品处理；②粗提取；③纯化；④纯度鉴定电泳法不同蛋白质分子带电性质的差异及分子本身的大小、形状的不同玫瑰油水蒸气蒸馏法利用水蒸气将挥发性强的芳香油携带出来①水蒸气蒸馏；②分离油层；③除水、过滤橘皮油压榨法通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油①石灰水浸泡、漂洗；②压榨、过滤、静置；③再次过滤胡萝卜素萃取法使提取物溶解在有机溶剂中，蒸馏后得到提取物①粉碎、干燥；②萃取、过滤；③浓缩二、不同物质的提取分离方法提取方法方法步骤适用范围水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏、分离油层、除水过滤适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油压榨法石灰水浸泡、漂洗、压榨、过滤、静置、再次过滤适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取有机溶剂萃取粉碎、干燥、萃取、过滤、浓缩适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶剂中三、细胞内DNA复制与体外DNA扩增(PCR技术)的比较项目细胞内DNA复制PCR技术不同点解旋解旋酶，边解旋边复制94℃酶解旋酶，DNA聚合酶，DNA连接酶TaqDNA聚合酶引物RNADNA或RNA温度体内温和条件高温子链合成一条链连续(先导链)；另一条链不连续，先合成片段，再由DNA连接酶连接(滞后链)两条子链均连续合成相同点①提供DNA模板②四种脱氧核苷酸作原料③子链延伸的方向都是从5′端到3′端[对点训练]1．下列关于蛋白质分离纯化的说法正确的是()A．纯化蛋白质的方法有透析法、萃取法和电泳法B．利用透析法可将蛋白质与小分子物质完全分离开C．离心沉降法主要利用了分子大小和密度不同D．电泳速度的大小只与粒子所带电荷的多少有关【解析】萃取法是提取植物芳香油的方法；透析法可使小分子物质透过半透膜与蛋白质分离，但分离不完全；电泳速度除与粒子带电荷多少有关外，还与粒子大小、形状以及电场强度等有关。【答案】C2．玫瑰精油素有“液体黄金”之称，下面是提取玫瑰精油的实验流程，相关分析不正确的是()【导学号：67850060】A．提取玫瑰精油的方法是水蒸气蒸馏法B．①和②操作要求分别加入氯化钠和无水硫酸钠C．③操作是萃取，以除去固体硫酸钠D．该实验流程也可用于从薄荷叶中提取薄荷油【解析】加入氯化钠是为了增大盐水的浓度，利于玫瑰油与水的分层，加入无水硫酸钠是为了吸收精油中残留的水分。③操作是利用过滤的方法除去固体硫酸钠。【答案】C3．下图是用除去DNA的滤液进行血红蛋白的提取和分离实验的装置，下列有关叙述不正确的是()甲乙丙A．首先用图甲装置对滤液进行处理，其目的是去除相对分子质量较大的杂质B．图乙装置的试管中收集到的液体中最先得到的是相对分子质量较大的蛋白质C．用图乙装置分离血红蛋白时，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每管收集5mL，连续收集D．图丙装置中电泳法分离提纯血红蛋白的原理是血红蛋白带有一定量的电荷，在电场的作用下向一极移动【解析】用图甲装置对滤液进行处理，其目的是去除相对分子质量较小的杂质。图乙装置表示通过凝胶色谱法分离蛋白质的过程。相对分子质量较大的蛋白质，被排阻在凝胶颗粒的外面，在颗粒之间迅速通过。【答案】A4．下列关于DNA复制叙述中，正确的是()A．DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5′端延伸DNA链B．DNA复制不需要引物C．引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D．DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸【解析】DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的3′端延伸DNA链。子链是依据碱基互补配对原则，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向从子链5′端→3′端。【答案】C5．生物组织中有机物的提取方法有很多种，例如凝胶色谱法、电泳法、蒸馏法、压榨法和萃取法等，不同的有机物所用的提取方法不同。【导学号：67850061】(1)玫瑰精油被称为“液体黄金”，是世界香料工业中不可取代的原料，提取出的玫瑰精油要求不含有任何添加剂或化学原料，其提取方法主要是______________。(2)杏仁油富含矿物质和维生素，是一种质地轻柔、高渗透性的保湿剂，主要通过________法提取。(3)萃取胡萝卜素前，要将胡萝卜彻底粉碎的主要目的是____________________________________________________________。(4)血红蛋白质的提取方法可以采用________，该方法主要是利用血红蛋白的哪一特性将它与其他物质分开的？____________________________________________________________。(5)提取DNA时，可以利用DNA在_________________________________而析出的性质。在进行DNA鉴定时，可以使用________试剂，并在沸水浴中加热，如有DNA，会产生蓝色反应。【解析】(1)玫瑰精油不能含有化学原料，所以不能用萃取法，而其又具有挥发性较强等特点，适于用水蒸气蒸馏法提取。(2)杏仁油的提取原料为种子，一般用于食用，应采用压榨法提取。(3)萃取胡萝卜素前将胡萝卜彻底粉碎的目的是使原料颗粒变小，提高萃取效率。(4)血红蛋白相对分子质量大小与成熟红细胞中其他成分相差较大，所以可以采用凝胶色谱法提取血红蛋白。(5)DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，可以利用这一特点使DNA溶解或析出，从而将其与其他物质分开。DNA鉴定时，使用二苯胺试剂，沸水浴条件下，可与DNA产生蓝色反应。【答案】(1)水蒸气蒸馏法(2)压榨(3)使原料颗粒变小，加大萃取效率(4)凝胶色谱法相对分子质量的大小(5)浓度为mol/L的NaCl溶液中溶解度最小二苯胺6．PCR技术是把某一DNA片段在体外酶的作用下，合成许多相同片段的一种方法，利用它能快速而特异地扩增任何要求的目的基因或DNA分子片段；电泳技术则是在外电场作用下，利用分子携带的净电荷不同，把待测分子的混合物放在一定的介质(如琼脂糖凝胶)中进行分离和分析的实验技术，利用它可分离氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等物质和做亲子鉴定。如图是电泳装置及相应电泳结果。(1)PCR技术能把某一DNA片段进行扩增，依据的原理是______________。(2)图3是把含有21个氨基酸的多肽进行水解得到的氨基酸混合物进行电泳的结果，故可推知该多肽由________种氨基酸构成。(3)电泳和叶绿体色素分离采用的纸层析法比较，后者使用的介质是________；电泳过程中分子的迁移速率除与本身所带净电荷的多少有关外，你认为还受什么因素影响？________________________________________________________________________________________________________________________(至少列出两种)。(4)图4通过提取某小孩和其母亲以及待测定的四位男性的DNA，分别由酶处理后，生成若干DNA片段，并进行扩增得到的混合物，然后进行电泳得到的一组DNA指纹图谱。请分析，在F1～F4中谁最可能是该小孩真正的生物学父亲？为什么？____________________________________________________________。【解析】本题主要考查电泳原理及其应用，同时考查学生在新情景下分析问题和解决问题的能力。(1)PCR是把DNA片段在酶的作用下，在体外合成许多相同的片段，原理是DNA复制。(2)某氨基酸的混合物电泳后出现分离，共有6个区域，则此多肽由6种氨基酸构成。(3)纸层析法是色素溶解在层析液中，并随之在滤纸上扩散。电泳过程中，分子的迁移速率受到多种因素影响，如分子的大小、形态，凝胶的种类、密度，电泳的电压大小等。(4)子代DNA是由亲代DNA复制而来的，所以子代DNA与亲代DNA相同，故C与F2之间为亲子关系。【答案】(1)DNA分子复制(2)6(3)层析液分子的大小、凝胶的种类、电泳的电压大小(4)F2，因为C和F2的DNA图谱完全相同章末综合测评(四)(时间：45分钟，分值：100分)一、选择题(共8小题，每小题5分，共40分)1．关于电泳的说法不正确的是()A．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程B．带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动C．蛋白质在醋酸纤维薄膜上的移动速度取决于它所带净电荷的多少D．电泳后需经染色、漂洗和脱色，才可长期保存【解析】蛋白质在醋酸纤维薄膜上的移动速度，与它所带电荷的多少、分子的大小、空间结构和形状等因素有关。【答案】C2．细胞破碎后，各种蛋白质就会释放出来，再根据蛋白质的不同特性进行提取。下列关于蛋白质抽提的措施中，不正确的是()A．酸性蛋白质可用稀碱性溶液抽提B．水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)抽提C．脂溶性蛋白质可用有机溶剂抽提D．碱性蛋白质可用强酸性溶液抽提【解析】抽提蛋白质的基本原理是根据蛋白质的物理性质，加入不同的试剂后，使蛋白质溶于试剂中而将其抽提出来。强酸、强碱都会使蛋白质变性而沉淀。【答案】D3．使用水蒸气蒸馏法提取玫瑰油，是因为玫瑰油()A．化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏B．化学性质稳定，难溶于水，难溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏C．化学性质不稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，不能随水蒸气一同蒸馏D．化学性质不稳定，难溶于水，难溶于有机溶剂，不能随水蒸气一同蒸馏【解析】玫瑰油的化学特性与提取方法密切相关。它的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏。【答案】A4．下列是植物芳香油的提取所选取的原料、相应精油的名称及适宜的提取方法的对应关系，其中不正确的是()【导学号：67850062】选项原料提取芳香油的名称提取方法A玫瑰花玫瑰芳香油压榨法B橘皮橘皮芳香油压榨法C茉莉花茉莉浸膏萃取法D薰衣草茎、叶薰衣草油蒸馏法【解析】蒸馏法一般适用于提取玫瑰油、薄荷油、薰衣草油等挥发性强的芳香油；压榨法一般适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取；萃取法适用范围较广。【答案】A5．“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的结合位置如图1所示。经4次循环后产物中有5种不同的DNA分子，如下图2所示，其中第⑤种DNA分子有几个()图1图2A．2 B．4C．6 D．8【解析】PCR技术扩增时，由两种引物决定所扩增的片段的特定序列，上一次循环的产物为下一次循环的模板。第一次循环形成①和②，第二次循环形成①②③④4个DNA，以此类推，4次循环后共形成16个DNA，其中①②各1个，③④各3个，⑤共8个。【答案】D6．下列关于用蒸馏法提取芳香油的有关叙述，正确的是()A．蒸馏温度越高，水和玫瑰油挥发就越容易，故在高温条件下蒸馏效果就好一些B．如果要提高玫瑰油的品质，只需要延长蒸馏时间即可C．在水蒸气蒸馏装置中，从进水口通入水的作用是防止过度沸腾D．蒸馏法适用于提取玫瑰油和薄荷油等挥发性强的芳香油【解析】如果蒸馏温度太高、时间太短，玫瑰油的品质会较差；为了充分蒸馏玫瑰油，延长蒸馏时间的同时，还要考虑温度的影响；在使用水蒸气蒸馏法提取植物芳香油时，需要用到蒸馏装置，在装置中，进水口与出水口之间水是不断流动的，以降低装置温度，使水蒸气与芳香油混合物冷却成为液体，便于分离；蒸馏法适用于提取挥发性强的芳香油。【答案】D7．下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的是()A．都要用猪血细胞来做实验B．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的DNAD．蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化【解析】猪的红细胞中无细胞核，不能用于提取DNA；提取DNA需用蒸馏水涨破细胞，提取蛋白质可以直接用豆浆或研磨的大豆；透析法可除去相对分子质量小的杂质，不能除去DNA；DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在mol/L的NaCl溶液中的溶解度最小，DNA可以析出，通过过滤可以除去蛋白质；用电泳的方法可将蛋白质、DNA进行分离纯化。【答案】D8．下列关于现代生物技术应用的叙述，正确的有几项()【导学号：67850063】①在蛋白质的提取和分离实验中，凝胶色谱法可将不同相对分子质量的蛋白质分离出来②在PCR中，引物的结构和长度决定DNA子链从5′端向3′端延伸③在蛋白质的提取和分离实验中，透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质④在多聚酶链式反应中，TaqDNA聚合酶只能特异性地复制整个DNA的部分序列A．1 B．2C．3 D．4【解析】DNA复制时，DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸，和引物的结构和长短没有关系，故②错误。【答案】C二、非选择题(共60分)9．(15分)某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下：实验准备(配制缓冲液、血细胞悬液)→样品处理(洗涤、破碎、离心等)→蛋白质粗分离(透析)→纯化、纯度鉴定(凝胶色谱法、电泳等)请回答下列有关问题：(1)样品处理中红细胞的洗涤要用________________反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是________________。(2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是________，若要尽快达到理想的透析效果，可以________________(写出一种方法)。(3)电泳利用了待分离样品中各种分子的________等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。(4)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如下图所示。由图可知携带者有________种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是________________________________________________________________________________________________________________________。【解析】(1)洗涤红细胞所用的溶液是生理盐水，根据渗透作用原理，将红细胞置于低渗溶液中，红细胞会吸水涨破，释放出血红蛋白。(2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是除去样品中的小分子杂质；可通过增加缓冲液的量或及时更换缓冲液等方法缩短透析时间，尽快达到理想的透析效果。(3)由于各种分子带电性质以及分子大小、形状等的差异，在电泳过程中产生了不同的迁移速度，实现各种分子的分离。(4)根据图示可知，镰刀型细胞贫血症的携带者含有两种血红蛋白，原因是携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因，分别控制合成两种不同的蛋白质。【答案】(1)生理盐水渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破)(2)除去小分子杂质增加缓冲液的量或及时更换缓冲液(3)带电性质以及分子大小、形状(4)2携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质10．(15分)已知蛋白质混合液中硫酸铵浓度的不同可以使不同种类的蛋白质析出(或沉淀)，随着硫酸铵浓度增加，混合液中蛋白质析出的种类和总量增加。下表是某蛋白质混合液中的不同蛋白质从开始析出到完全析出所需要的蛋白质混合液中的硫酸铵浓度范围。蛋白质混合液中的硫酸铵浓度(%)15～2023～3025～3538～40析出的蛋白质甲蛋白乙蛋白丙蛋白丁蛋白请据表回答：(1)若只完全析出甲蛋白，混合液中最合适的硫酸铵浓度应为________。(2)向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液(或硫酸铵)，使混合液中的硫酸铵浓度逐渐达到30%，会析出若干种蛋白质，它们分别是_____________。(3)通过改变混合液中的硫酸铵浓度________(填“能”或“不能”)从混合液中得到所有的、不含有其他蛋白质的乙蛋白，原因是________________________________________________________________________________________________________________________。(4)简要写出从该蛋白质混合液中分离出全部丁蛋白的实验设计思路。(5)如果蛋白质析出物中还含有一定量的硫酸铵，可用半透膜除去析出物中的硫酸铵。用半透膜能除去析出物中硫酸铵的原理是________________________________________________________________________________________________________________________。【解析】(1)从表中可以看出，只完全析出甲蛋白，混合液中最合适的硫酸铵浓度为20%。(2)表中信息反映混合液中的硫酸铵浓度逐渐达到30%的过程中，会析出甲蛋白、乙蛋白、丙蛋白三种蛋白质。(3)由于乙蛋白和丙蛋白析出所需的硫酸铵浓度范围有重叠，因此改变混合液中的硫酸铵浓度，不能只得到乙蛋白。【答案】(1)20%(2)甲蛋白、乙蛋白、丙蛋白(3)不能硫酸铵浓度较低时不能得到乙蛋白，浓度较高时乙蛋白和丙蛋白析出所需的硫酸铵浓度范围有重叠(4)向该蛋白质混合液中加入硫酸铵溶液(或硫酸铵)，使其浓度达到35%(或35%≤硫酸铵浓度＜38%范围内的任意一个浓度)，分离析出物与溶液，保留溶液。取保留溶液，再加入硫酸铵溶液(或硫酸铵)，使硫酸铵在溶液的浓度达到40%(或40%以上)，分离析出物与溶液，析出物即为丁蛋白。(5)半透膜是一种选择性透过膜，只允许小分子的硫酸铵通过，不允许大分子蛋白质通过11．(15分)下面是提取橘皮芳香油的装置示意图，请回答有关问题：【导学号：67850064】(1)图中表示用________法提取橘皮芳香油，采用此法的原理是________________________________________________________________________________________________________________________。(2)除了上述方法之外，还可以用________________法(举两例)。(3)在加热瓶口安装冷凝管的作用是________，出水口在进水口上端的原因是_______________________________________________________。(4)用锥形瓶收集到的物质是所需要的芳香油吗？________，原因是______________________________________。【解析】(1)图中装置表示用水蒸气蒸馏法提取橘皮芳香油。在加热条件下，蒸气将橘皮中的芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分为油层和水层。(2)提取橘皮中的芳香油有三种方法：水蒸气蒸馏法、旋转蒸发器法、压榨法。(3)冷凝管内水的温度较低，而蒸气的温度较高，当蒸气经过时起到冷凝作用。出水口在进水口上端，水流速度较慢，可以减小水和蒸气之间的温差，防止冷凝管骤冷破裂。(4)用锥形瓶收集到的物质是油水混合物，油水的密度不同，静置后油便浮于水的表面，需要用分液漏斗分离，才能得到所需要的芳香油。【答案】(1)水蒸气蒸馏橘皮中的芳香油有较强的挥发性，随着水蒸气蒸馏，而成分不被破坏(2)旋转蒸发器法和压榨(3)起到冷凝的效果减小水和蒸气之间的温差，防止冷凝管骤冷破裂(4)不是是油水混合物，油轻水重，需要分离才能得到芳香油12．(15分)如图为一种核酸分析方法，请据图分析回答有关问题：(1)被分析的材料应属于一条________链。如果它存在另一条互补链，该互补链的碱基序列是(在下图中标出)：(2)如果选择性断开的位置是碱基G，那么随机出现的被标记片段应有________种，在电泳带上被分离的显示位置应有________处，在泳动方向的最前端的片段是________序列段，与图示泳动位置相比，在同样电泳条件下该片段应位于①的________(填“上方”或“下方”)。(3)应用上述原理分析了某种未知序列核酸的一条单链，结果如下图所示，此结果说明，该核酸的此单链含________个核苷酸，其A∶T∶G∶C＝________，同时也可推断其碱基序列是___________________。【解析】从图中可以看出，DNA单链的磷酸末端即5′端的磷酸基团被标记，如果选择从A处断开，DNA单链中有几个A就能形成几条DNA片段。在凝胶介质上，长度不同的DNA片段通过电泳时因相对分子质量不同就会自然分开。根据产生DNA片段的个数确定DNA中每种碱基的个数，根据电泳时在电场中分布的先后顺序可以确定四种碱基在DNA单链中的排列顺序。(1)根据碱基互补配对原则写出互补链碱基，要注意反向平行。(2)由于此单链中的G碱基有5个，所以从G处断裂也会产生5种被标记片段，在电泳带上也会显示5处位置，在距磷酸基的第二个碱基处就会断裂，所以此片段为TG，比①处的TGGA还短，所以运动速度比①快，位于①的下方。(3)此单链中的核苷酸数为4个T＋5个A＋5个G＋4个C＝18个，碱基序列也就已经分析出来了。【答案】(1)DNA单AGCATGCGTTCAAGTCCA(2)55TG下方(3)185∶4∶5∶4AACGTAGGGTTACCCTGA模块综合测评(时间：45分钟，分值：100分)一、选择题(共8小题，每小题5分，共40分)1．下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是()A．参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体B．果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋C．在腐乳制作过程中必须有能分解蛋白质的微生物参与D．在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐的用量【解析】果醋发酵利用的醋酸菌为原核生物，不含有线粒体；制作果醋不仅需要比果酒制作温度较高的环境，还需要氧气；在腐乳装瓶时，自下而上随层数的增加逐渐增加盐的用量。【答案】C2．下面两图是某研究人员研究甘蓝自然乳酸发酵过程中硝酸盐、亚硝酸盐、pH的变化曲线。图中各曲线代表的是()A．①硝酸盐②亚硝酸盐③亚硝酸盐④pHB．①亚硝酸盐②硝酸盐③亚硝酸盐④pHC．①硝酸盐②亚硝酸盐③pH④亚硝酸盐D．①亚硝酸盐②硝酸盐③pH④亚硝酸盐【解析】植物体内含有的硝酸盐，在发酵初期，具有还原能力的大肠杆菌等杂菌，能将硝酸盐转化成亚硝酸盐；随着乳酸菌产生乳酸量的不断增加，环境pH不断下降，杂菌生长受到抑制，亚硝酸盐的生成量减少，约在pH为左右时，亚硝酸盐已达到最大积累量，尔后，随着pH降低，亚硝酸盐迅速分解。【答案】C3．下列有关微生物营养的说法正确的是()A．纤维素分解菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的B．在纤维素分解菌生长的培养基中只需碳源、氮源、水、无机盐即可正常生长C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物的生长越有利D．生长因子是微生物生长必需的，而微生物本身合成这些物质的能力往往不足【解析】纤维素分解菌与硝化细菌的同化作用类型不同，因此所利用的碳源不同；任何微生物都不能合成所必需的全部物质；培养基的浓度影响细胞的渗透作用，与细胞代谢有关。【答案】D4．下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是()A．利用涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D．用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少【解析】用涂布平板法可以分离微生物也可以对微生物进行计数；接种划线可以将聚集的菌种分散，最后得到单个细胞，经过培养可以得到单个菌落；以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌；在泡菜的腌制过程中，开始亚硝酸盐含量增加，10d后含量开始下降。【答案】A5．下列关于植物芳香油提取技术的叙述中，正确的是()【导学号：67850065】①提取植物芳香油都必须用蒸馏法②水蒸气蒸馏法是利用水蒸气将挥发性强的芳香油携带出来③压榨法是通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油④萃取法是使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油A．①②③ B．②③④C．①②④ D．①③④【解析】水蒸气蒸馏法的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，适用于提取挥发性较强的芳香油，如玫瑰精油、薄荷油等。萃取法原理是植物芳香油易溶于有机溶剂，只要把溶剂蒸发出来，就可获得纯净的植物芳香油，适用范围较广。压榨法是通过机械加压、压榨出果皮中的芳香油，适用于易焦糊原料的提取，如柑橘、柠檬等。【答案】B6．下列说法不正确的是()A．科学家从70～80℃热泉中分离得到耐高温的TaqB．统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值C．设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度D．同其他环境中的生物相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多【解析】统计平板上的菌落数时，应选择菌落数在30～300之间的平板，每个稀释度至少取3个平板，为了提高准确度，应求其平均值。【答案】B7．生物产品的分离、纯化是现代生物技术中一种常见的技术。下列关于物质提取、纯化原理的叙述中，不正确的是()A．采用凝胶色谱法分离果胶酶的原理是蛋白质分子的相对分子质量不同，在色谱柱中的移动速度不同B．使用透析法可以去除样品中相对分子质量较大的杂质C．电泳法是利用样品中各种分子带电性质和数量以及样品分子大小不同，产生的迁移速度不同而实现样品中各种分子的分离D．离心法分离蛋白质的依据是不同大小的分子离心时沉降速度不同【解析】透析的原理是小分子能够通过半透膜，利用透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质。【答案】B8．下列操作过程中需要利用水浴加热的一组是()①胡萝卜素的萃取②橘皮芳香油的提取③亚硝酸盐含量的测定④DNA的鉴定A．①② B．②③C．③④ D．①④【解析】提取胡萝卜素时，用水浴加热可以避免发生燃烧或爆炸等事故；含DNA的丝状物与二苯胺混合后，为了使两者充分反应，需要用沸水浴加热；橘皮芳香油用压榨法提取，亚硝酸盐含量用比色法测定，这两个实验都不用水浴加热。【答案】D二、非选择题(共60分)9．(15分)用基因工程技术从分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因，然后进行PCR扩增。表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。表1PCR反应体系缓冲液脱氧核苷酸引物A引物BDNA聚合酶模板DNA50μL50μLμL50μLμLU1～2μL加去离子水补足至50μL表2(1)从表1和表2中可得出，PCR技术与DNA复制相比较，主要区别之一是________。此外，从反应条件看，所使用的DNA聚合酶应具有________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在对固氮基因产物的生产研究中，需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的相关原理。甲乙①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质，原因是________________________________________________________________________________________________________________________。②图乙所示实验模拟电泳现象，U型管左侧的颜色逐渐变深，原因是____________________________________________________________。【解析】(1)PCR技术与生物体内DNA复制相比，不需要ATP、解旋酶、但是需要加入两种引物和耐高温的DNA聚合酶。(2)相对分子质量大的蛋白质无法进入凝胶内部，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，所以最先从色谱柱内洗脱出来。带电离子在电场的作用下会向着与其所带电荷相反的电极移动，Fe(OH)3胶体带正电荷，所以向阴极移动。【答案】(1)不需要ATP(或需要加入引物、或不需要解旋酶等)耐高温DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链(2)①相对分子质量较大的蛋白质，从凝胶颗粒之间的间隙穿过凝胶柱，路程短，移动速度较快，最先洗脱出来②Fe(OH)3胶体带正电荷，在电场作用下，向阴极移动10．(12分)某同学用不同种类的洗衣粉进行了如下实验。请分析回答相关问题：【导学号：67850066】实验一：温度/℃303540455055普通洗衣粉去污力/%1518202122加酶洗衣粉去污力/%304048504837(1)该实验的目的是探究________________________。(2)上述实验结果可以得出的结论是________________________________________________________________________________________________________________________、____________________________________________________________。实验二：探究复合酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果是否存在差异。实验设计如下：项目设计内容对照设置两组实验，分别使用蛋白酶洗衣粉和复合酶洗衣粉变量控制两组实验的洗衣粉用量、被洗涤的衣物量、衣物质地、污染物性质和量、被污染的时间、洗涤时间、洗涤方式等全部相同结果观察根据污渍去除程度得出结论(3)该实验设计中有一处明显的错误，请指出_____________________。(4)修改后的实验最可能的实验结果是___________________________。(5)推广使用加酶洗衣粉代替含磷洗衣粉，有利于保护生态环境，这是因为____________________________________________________________。【解析】(1)实验一中有两个变量：温度和洗衣粉的种类。可以探究同一温度下不同种类洗衣粉洗涤效果的比较；也可探究不同温度对同一种洗衣粉洗涤效果的影响。(2)根据单因子变量实验原则，可以得出结论：相同温度下加酶洗衣粉的去污力比普通洗衣粉高；使用加酶洗衣粉的适宜温度为45℃左右。(3)探究复合酶洗衣粉与普通洗衣粉的洗涤效果，实验变量应为复合酶洗衣粉和普通洗衣粉。(4)复合酶洗衣粉中的酶具有高效性，洗涤效果好于普通洗衣粉。(5)酶具有高效性且易分解，避免水体富营养化。【答案】(1)不同洗衣粉在不同温度下的去污力的变化(2)相同温度下加酶洗衣粉的去污力比普通洗衣粉高使用加酶洗衣粉的适宜温度为45℃(3)对照组设计错误，应设计复合酶洗衣粉和普通洗衣粉作为对照(4)使用复合酶洗衣粉的去污程度大于普通洗衣粉的去污程度(5)酶具高效性且可被分解，避免水体富营养化11．(15分)蛋白质分子的大小、形状、结构不同，所带电荷的性质和多少不同，以及在盐溶液中溶解度不同，可以利用以上的不同对不同种类的蛋白质进行分离纯化，请回答以下问题：(1)分子大小：对于分子大小方面有一定差别的蛋白质可采用密度梯度离心、________、________等方法将它们分开。(2)形状：对两种相同质量的蛋白质而言，________形蛋白质具有较小的有效半径，在通过膜、凝胶过滤或电泳凝胶中的小孔运动时，遇到的摩擦力小，从而也能达到分离蛋白质的目的。(3)溶解度：蛋白质具有盐溶和________现象，根据蛋白质在不同浓度的盐溶液中________不同，通过控制____________可分离析出蛋白质；蛋白质在不同浓度的有机溶剂中的溶解度有很大不同，从基本不溶(＜10μg/mL)直至极易溶解(＞300μg/mL)不等，故可分离蛋白质。(4)电荷：蛋白质净电荷取决于________________________，利用待分离样品中各种分子带电性质，可用________的方法将其分离；或者改变蛋白质混合物溶液中的盐离子浓度、pH和(阴、阳)离子交换填料，不同蛋白质对不同的离子交换填料的吸附容量不同，蛋白质因________________________________而分离。(5)稳定性：多数蛋白质加热到94℃【解析】分离蛋白质的方法除密度梯度离心法外，还有透析法和电泳法等；蛋白质在不同盐浓度或有机溶剂溶液中溶解度不同；可通过调节盐浓度或有机溶剂的浓度来析出相应的蛋白质；不同蛋白质所带电荷的性质和数量不同，因此可用电泳法分离出不同的蛋白质。【答案】(1)透析电泳(2)球(3)盐析溶解度盐浓度(4)氨基酸残基所带的正负电荷的总和电泳吸附容量不同或不被吸附(5)仍具有活性的可溶性抗蛋白酶12．(18分)酶是生物体内细胞合成的生物催化剂，没有酶，生物体内的几乎所有代谢反应都不能进行。随着生物科学技术的发展，酶已经走出实验室走进人们的生产和生活。果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁更容易，也使得浑浊的果汁变得更加澄清。请回答下列有关酶的问题：(1)每当到了丰收的季