上课体外受精和早期胚胎培

1999年4月23日晚9时，在广州中山医科大学第一附属医院出生一健康女婴，她是我国首例第三代试管婴儿，父母身体健康、婴儿的母亲7年前生下一男婴，孩子一岁后发病，最后死于脑出血，5年后，她第二次怀孕6个月时，到医院抽羊水及脐带血诊断，发现胎儿是男孩，而且是血友病患者，遂引产。夫妇二人最后来到中山医科大学附属医院做试管婴儿。医生培养了7个可做活体检查的胚胎，并抽取每个胚胎1－2个细胞进行检查后，选择了两个胚胎进行移植最后一个移植成功，资料一（1）试管婴儿技术作为现代生物技术和母亲正常怀孕，生产的过程相同之处是（）不同之处是（）有性生殖产生，在母体子宫内发育形成胎儿通过受精作用在体外，并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植（2）血友病的遗传方式为（），如果用B、b分别表示血友病基因和正常基因，则父亲、母亲的基因型分别是（）和（），如果该夫妇再生一男孩，患血友病的概率是（）隐性遗传伴X染色体XBY1/2XBXb根据资料回答下列问题的概率为50％，女性正常男性胎儿从母亲获得b基因，患病1/4（3）医生抽取活体胚胎的1或2个细胞后，可通过观察（），判断胎儿的性别，你认为医生应选用（）胚胎进行移植原因是（），自然状态下，出现这样胚胎的概率是（）。该实例体现了现代科学技术应用于社会和人类生活的重要意义。染色体组成女性名词：借腹怀胎（生子）所谓“借腹生子”是指利用试管动物（婴儿）技术和胚胎移植技术，在受体母亲子宫内使胎儿发育成熟而生出的过程试管动物技术

是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育成早期胚胎后，再经移植产生后代的技术。从试管牛说起实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是（）和（）的培养体外受精早期胚胎（1）体外受精：①概念采取雌性动物的（）和雄性动物的（），使其在（）中受精。卵细胞精子试管注：但发育的主要场所是（）母体采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精良种牛体外受精胚胎胚胎移植受体牛良种犊牛成熟期牛屠宰加工厂市场采集卵巢中的卵母细胞“试管牛”工厂化生产的技术流程图体外受精哺乳动物的体外受精主要包括：卵母细胞的采集精子的获取受精体外受精1.卵母细胞的采集和获能对不同动物,采集卵母细胞的方法不同如何使雌性动物排出更多的卵子促性腺激素处理对实验动物小鼠、兔和小家畜,猪、羊动物如何采集卵子从输卵管中冲取卵子，又叫（冲卵）对于大家畜或大型动物如何采集卵子屠宰场从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢，再从卵巢中采集卵母细胞。超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜（活体）采集的卵子是否马上可以受精初级卵母细胞，体外培养至MII中期2.精子的采集和获能

1)采集的方法:假阴道法,手握法和电刺激法等

2)获能处理:

获能处理的方法培养法：啮齿动物、家兔和猪化学法：牛、羊一定浓度的肝素A23187溶液（钙离子载体）试管动物克隆动物生殖方式有性生殖无性生殖技术手段体外受精、胚胎移植核移植技术、胚胎移植遗传规律遵循无试管动物与克隆动物比较2.受精在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程体外受精：主要包括（）（）和（）等几个主要步骤。卵母细胞的采集最常用的方法是卵巢经过()处理，具体做法是给供体注射()，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从（）中冲取卵子，又叫（）直接与获能的精子在体外受精。还可以使用(

)确定卵泡位置，插入()将泡卵液（连同卵母细胞）取出，在体外进行人工培养，使其成熟。收集精子的方法有：（)(）（)卵母细胞的采集精子的获能受精超数排卵促性腺激素超声监视器穿刺针输卵管假阴道法手握法冲卵电刺激法精子体外获能的方法:有（）和（），对于（）动物家兔和猪等一般采用培养法，从附睾中取出成熟的精子，放入人工配制的获能液中，培养一段时间，精子即可获能。对于牛羊等家畜的精子常采用化学法，即将精子放在一定浓度的培养法诱导法化学啮齿性（）或（）溶液中，用化学药物（）精子获能。肝素或钙离子载体A23187诱导受精：获能的精子和成熟后的卵细胞在体外合适的环境下共同培养一段时间，便可受精二胚胎的早期培养（体外）培养受精后形成的受精卵需经（）才能完成植入或着床，通常移植的最合适时期是发育到（）个细胞以上的胚胎，如桑葚胚或早期囊胚；最后，经过产仔就得到：试管动物。8早期发育不同动物胚胎移植时间不同桑椹胚阶段：牛、羊8个或16细胞胚阶段：小鼠、家兔4个细胞胚阶段：试管婴儿1、胚胎体外培养

（1）概念：是应用人工创造条件，对获取的（）进行体外培养。由于胚胎不同发育时期生理代谢的需求不同，进行胚胎体外培养时，必须配制一系列含有不同成分的培养液，用以培养不同发育时期的胚胎。由于哺乳动物胚胎发育条件异常复杂，胚胎培养比组织培养和细胞培养要困难得多。目前，只能对少数物种不同阶段的胚胎进行培养，尚无从受精卵到新生儿的全体外胚胎培养技术。早期胚胎胚胎的早期培养培养液:

水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等.二氧化碳培养箱中培养：培养条件为39℃、100%湿度和5%二氧化碳的空气。牛的培养时间为20-24小时，卵丘卵母细胞复合体经成熟培养后，卵丘细胞层扩散靠近卵母细胞周围的卵丘细胞呈放射状排列，出现放射冠，用DNA特意性染料染色后，在显微镜下进行核相观察，可见卵母细胞处于第2次成熟分裂中期。

胚胎移植的概念及过程：

胚胎移植技术是将经济价值较高、遗传性状优秀的母畜，经过激素处理，使其超数排卵后受精，然后将发育的（）移植到的（）的子宫内，通过代孕母妊娠产仔的技术。因此胚胎移植也被称做“（）”“借腹生子”，提供胚胎的动物为（），接受胚胎的动物叫（）（又叫代孕母），两种雌性动物可以专门提供（），而代孕母让健康的（）品种的（）性动物来完成。早期胚胎代孕母借腹怀胎供体受体胚胎一般雌同期发情同期发情技术：主要是借助外源激素剌激卵巢，使其按照预定的要求发生变化，使处理母畜的卵巢生理机能都处于相同阶段，从而达到同期发情。超数排卵应用外源性促性腺激素诱发卵巢多个卵泡发育，并排出具有受精能力的卵子的方法，称为超数排卵，简称“超排”。超数排卵是进行胚胎移植时，对供体母畜必须进行的工作，其目的是为了得到多量的胚胎。诱使单胎家畜产双胎也是超数排卵的目的之一。

超数排卵处理的时机应该选择在母畜的发情末期，即发情将要出现的前几天，或者使用药物，先促使卵巢上的黄体消退，再用药物使卵泡发育。

(一)超数排卵使用的药物和剂量

1、孕马血清促性腺激素

随着孕马血清促性腺激素的剂量增大，卵巢的反应亦会增强，发情时间提前。但是大剂量的激素其超排效果不稳定。注射剂量如果超过3000IU，并不能增加母牛卵巢的排卵数。PMSG的剂量和排卵数的关系见下表。由于PMSG在体内半衰期较长，一般情况下母牛的使用剂量为2000-3000IU，作1次肌肉注射。使用PMSG作超数排卵效果良好，药效比较稳定，卵巢体积不会过度增大，处理后卵巢容易恢复正常，排卵率高，残留的成熟卵泡少。如配合使用抗PMSG可以控制发育的卵泡数不会过多，排卵时间较集中，一侧卵巢排出比较理想卵子5-8枚。从一头母畜（供体）发情排卵并经（）后，在一定时间内从其生殖器官中（）取出早期胚胎，然后把它们分别移植到另外一头与供体同时发情排卵、但未经配种的母畜（受体）的相应部位，这个来自供体的胚胎能够在受体子宫（）、并继续发育，最后产下供体的后代。配种输卵管和子宫角着床得到早期胚胎的其他方法小结：试管牛工厂化生产技术流程（）（包括卵细胞采集、精子的获能、受精等步骤）（）（）（）良种牛犊成熟期牛例题1

从澳大利亚和新西兰引进一流良种无角道赛特肉用绵羊和布尔肉用山羊，能否设计一种快速繁殖子代个体，而又大大缩短良种本身周期的办法？简述其具体的过程。体外受精早期胚胎的培养胚胎移植代孕母牛能。分别取赛特肉用绵羊和布尔肉用山羊的卵母细胞和精子，然后做以下处理：卵母细胞培养成熟精子获能体外受精受精卵早期胚胎胚胎移植普通羊子宫里幼体发育分娩（1）赞同。该措施可以帮助一些家庭解决不孕不育现象，而且可以帮助一些由于自身素质不良，如果怀胎、分娩会造成生命威胁的母亲，实现得到亲生子女的愿望。（2）不赞同。给社会和人类伦理道德造成一定的冲击。讨论：你对新科技条件下出现的“借腹生子”现象赞同吗？所谓“借腹生子”是指利用试管婴儿和胚胎移植技术，在受体母亲子宫内使胎儿发育成熟而生出的过程巩固练习试管婴儿、试管苗和克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果，下面叙述正确的是

A都属于无性生殖能保持母本性状

B都是细胞工程或胚胎工程的技术范围

C都充分体现了体细胞的全能性

D都不会发生基因重组和变异巩固练习供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是（）A、防止受体牛不愿意接受胚胎B、只有受体与供体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育C、只要发情排卵后，各阶段时间内的变化，供、受体生理状态完全相同D、同期发情处理后，卵细胞和精子受精结合能力强巩固练习以下关于试管婴儿生产技术不存在的是（）A、体外受精B、细胞培养C、胚胎移植D、基因重组巩固练习关于设计试管婴儿的问题，下列哪项不合乎道德规范（）A、利用试管婴儿提供骨髓造血干细胞，救治病人B、利用设计试管婴儿技术设计畸形胎儿，以供展览C、利用试管婴儿的脐带血D、设计试管婴儿，不一定非考虑他的性别

巩固练习采集的卵母细胞，都要要体外经人工培养成熟后，才能与获能的精子受精，以下原因不正确的是（）A、卵子从输卵管中冲出也