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文档简介
阳离子端基肽类脂生物学性能研究
大学生创新创业训练计划负责人:田甜同组人:周美玲班级:化学112指导教师:赵轶男主要汇报内容课题背景及意义实验内容阶段性成果下一阶段工作计划41235大学生创新创业训练计划课题背景及意义
阳离子脂质体作为非病毒基因载体,具有类细胞结构和生物膜的特性,在体内可降解。阳离子脂质体带正电,可使带负电的质粒DNA附着其表面形成复合物(Lipoplex)。复合物带正电而易于与带负电的细胞膜表面结合,并通过细胞内吞作用转移至细胞内,其转染效率可高达90%。以氨基酸或肽制备阳离子脂质体,能延长其在体内的半衰期和增强靶向性。多肽几乎无毒,类脂结构中的多氨基结构能提高脂质体的转染效率。大学生创新创业训练计划
因此,多肽阳离子脂质体作为非病毒基因载体中重要的一种,因转染的低毒性和高效性而得到研究人员的广泛关注。多肽阳离子类脂的研究对其他多价阳离子类脂的性能改进具有参考意义,将从化学结构上解决多价阳离子类脂高的转染效率和低的毒性不能兼顾的矛盾,为多价阳离子类脂基因载体的研究提供了一条新的途径。并可能为治疗多种疾病提供新的基因转运载体。通过进一步的研究与完善,多肽阳离子脂质体在今后的基因治疗领域中将发挥其无穷的潜力。课题背景及意义大学生创新创业训练计划实验内容2013年5月—2013年7月:设计阳离子类脂分子结构,以赖氨酸肽为阳离子头部,含16碳(18碳)双长碳链为疏水尾部,设计合成2个肽头部阳离子类脂。以羰基二咪唑、正十六醇、二乙烯三胺为原料,在40℃、搅拌、氮气保护的条件下反应,经热过滤、旋转蒸发、重结晶等步骤合成类脂中间体CD16,结构经质谱、红外光谱、核磁进行结构表征。大学生创新创业训练计划实验内容实验内容2013年9月—目前,以羰基二咪唑、正十八醇、二乙烯三胺为原料,在40℃、搅拌、氮气保护的条件下反应,经热过滤、旋转蒸发、重结晶等步骤合成类脂中间体CD18。以赖氨酸、Boc酸酐、CuSO4·5(H2O)、碳酸氢钠、无水碳酸钠、8-羟基喹啉、Fmoc-OSu、盐酸、石油醚为原料合成赖氨酸肽头部中间体。大学生创新创业训练计划实验内容实验内容Fmoc-L-lys(Boc)-OH的合成称取2mmolL-lys溶于15ml水中,2mmolBoc2o溶于丙酮并滴加到赖氨酸水溶液中,分批加入1mmolCuSO4·H2O于27℃搅拌,反应14h,再加入10ml20%(质量分数)的碳酸氢钠水溶液,搅拌反应3h,分批加入2g无水碳酸钠和适量的8-羟基喹啉,室温搅拌反应1h,将2mmolFmoc-OSu加入到上述溶液中,室温搅拌数小时,过滤,滤液冷却至0℃,用盐酸调节PH=2-3,静置数小时,得粗产品。再用乙酸乙酯(石油醚)重结晶,得到白色结晶粉末。最后,用毛细管电泳测产品纯度,用熔点仪测定熔点,用旋光仪测定旋光度,以及用红外光谱、核磁共振进行产品性质检测。阶段性成果122论文《不同端基肽头部阳离子类脂基因转运研究》在2013年“挑战杯”比赛中获辽宁省三等奖。在国家核心期刊《化学世界》发表了一篇论文《不同端基肽头部阳离子类脂基因转运研究》。大学生创新创业训练计划下一阶段工作计划1、将合成的阳离子类脂中间体CD16、CD18与肽头部中间体赖氨酸三肽连接,得到所设计的阳离子类脂。2、将阳离子类脂制备阳离子脂质体,
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