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DNA多聚酶链式反应扩增DNA片断课题2目录上页下页习题参考书返回一、DNA分子复制的过程参与的组分在DNA复制中的左右解旋酶打开DNA双链DNA母链提供DNA复制的模板4种脱氧核苷酸合成子链的原料DNA聚合酶催化合成DNA子链引物使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸目录上页下页习题参考书返回二、PCR原理PCR参与的组分在DNA复制中的作用高温变性解旋酶打开DNA双链DNA母链提供DNA复制的模板4种脱氧核苷酸合成子链的原料Taq酶(耐高温)DNA聚合酶催化合成DNA子链15-30个核苷酸构成DNA或RNA单链引物使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸目录上页下页习题参考书返回DNA双链反向平行3’5’5’目录上页下页习题参考书返回基本单位目录上页下页习题参考书返回①②③④⑤目录上页下页习题参考书返回实验操作步骤:(准备)按配方将所需试剂摆放在实验桌上(移液)用微量移液器按配方在微量离心管中依次加入各组分(混合)盖严离心管口的盖子,用手指轻轻弹击管壁(离心)将微量离心管放在离心机上(反应)将离心管放入PCR仪上,设置好PCR仪的循环程序目录上页下页习题参考书返回反应周期高温变性低温退火适温延伸反应循环数扩增倍数106--10925--30目录上页下页习题参考书返回目录上页下页习题参考书返回目录上页下页习题参考书返回950C变性550C复性720C延伸PCR过程第一轮实验结果与分析DNA含量=50x(260nm的读数)x稀释倍数目录上页下页习题参考书返回移液器目录上页下页习题参考书返回离心管离心

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