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文档简介
检测生物组织中的糖类脂肪和蛋白质苹果马铃薯黄豆花生?它们中那种有机物最丰富2021/4/272某些化学试剂能够使生物组织中的相关有机化合物产生特定的颜色反应。
实验原理:鉴定物质还原性糖脂肪蛋白质淀粉试剂实验现象
斐林试剂砖红色沉淀苏丹Ⅲ橘黄色苏丹Ⅳ红色
双缩脲试剂紫色
碘
蓝色2021/4/273实验的材料的选择和处理有什么要求?材料的选择材料的处理还原性糖的鉴定脂肪的鉴定含还原糖高,颜色为白色的植物组织如苹果和梨富含脂肪的种子,如花生浸泡3~4小时/蛋白质的鉴定富含蛋白质的牛奶或鸡蛋清鸡蛋清要先稀释淀粉的鉴定马铃薯/2021/4/274一、可溶性还原糖的检测:还原糖:具有还原性基团(醛基或酮基)的糖类,
如葡萄糖、果糖和麦芽糖等。
蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。1、选材:苹果、梨、白萝卜等。(含糖量较高,颜色为白色或近于白色的植物组织)2、检测试剂:斐林试剂甲液:0.1g/mL的NaOH乙液:0.05g/mL的CuSO4等量混匀后制成2021/4/275选材:3.实验流程(步骤)制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨,过滤:(用单层纱布)样液:显色反应
现象:
2ml组织样液1ml新配制的斐林试剂5065℃水浴加热约2min棕色浅蓝色砖红色2021/4/276一、可溶性还原糖的检测:4、检测原理:0.1g/mL的NaOH溶液与0.05g/mL的CuSO4
溶液混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2悬浊液。
还原糖在水浴加热的条件下,可将Cu(OH)2还原为砖红色的Cu2O沉淀。2021/4/277二、蛋白质的检测:1、选材:鸡蛋清、牛奶2、检测试剂双缩脲试剂A液:0.1g/mL
NaOHB液:0.01g/mL
CuSO4三、淀粉的检测:1、选材:面粉、马铃薯样液2、试剂:
碘液
3、检测过程:2ml组织样液
滴加碘液观察颜色变化3.检测过程:鸡蛋清溶液
结果显示
NaOH溶液滴加CuSO2
溶液,滴加后均需摇匀2021/4/278二、蛋白质的检测:4、实验原理:
碱性环境(NaOH)中,蛋白质中的肽键能和双缩脲试剂中的Cu2+反应生成紫色的络化物,这个反应叫做双缩脲反应三、淀粉的检测:4、原理:蓝色淀粉+碘液2021/4/279比较项目试剂及成分原理方法加热与否结果可溶还原糖的鉴定斐林试剂甲液:NaOH,0.1g/mL乙液:CuSO4,0.05g/mL砖红色沉淀蛋白质的鉴定双缩脲试剂A液
NaOH0.1g/mLB液
CuSO40.01g/mL溶液呈紫色斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?新配制的Cu(OH)2溶液与加入的还原糖,在加热条件下生成砖红色的Cu2O在碱性环境下的Cu2+,与类似于双缩脲结构的肽键发生反应生成紫色络合物甲乙等量混合而后立即使用先A液1mL,然后再加B液4滴水浴加热不需要2021/4/2710四、脂肪的检测1、选材:经浸泡去种皮的花生种子。2、检测试剂:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液3、实验步骤:2021/4/2711橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒脂肪+苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液橘黄色(或红色)4、实验原理:2021/4/2712若取少量植物油,加入苏丹Ⅲ(IV),震荡,可看到溶液呈什么颜色?
橘黄色(红色)2021/4/2713问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液?作对照2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3~4滴而不能过量?过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久?时间太长,Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。拓展2021/4/27144.若有西瓜、西红柿,适合作检测还原性糖的材料吗?
不适合,此材料中虽富含还原糖,但含有色素,会遮盖反应颜色5.甘蔗、甜菜根适合作检测还原性糖的材料吗?此材料中虽不含色素,富含蔗糖,但蔗糖是非还原性糖2021/4/2715安徽阜阳劣质奶粉事件震惊全国,引起世人注目。鉴定脱脂淡奶粉是否为伪劣产品,肯定不需要用到的化学试剂是()
A.斐林试剂B.红墨水
C.双缩脲试剂D.苏丹Ⅳ染液
B
2021/4/2716各种可供实验的材料梨黄桃胡萝卜黄豆花生种子小麦种子①其中适合于鉴定可溶性还原糖的是
,理由是梨的组织细胞
,你打算用什么试剂鉴定?
。②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪,这是因为
,你打算用什么试剂鉴定?
.
[例]做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时,需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题:梨颜色为白色,并且糖含量较高
斐林试剂脂肪含量不如花生高,也不容易做切片
用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ试剂2021/4/2717③小麦种子中糖类化合物
含量很高,却不适合用来鉴定
__________,这是因为
________________________________________。
④适合于鉴定蛋白质的是
,理由是
,鉴定所用的试剂是
。
蛋白质含量高
黄豆和花生
双缩脲试剂淀粉
可溶性还原糖淀粉是非还原糖且不溶于水
2021/4/2718
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