《微生物的实验室培养》试题库

《微生物的实验室培养》试题库题组11.含C、H、O、N的大分子有机化合物可以作为()A.异养微生物的氮源、能源B.异养微生物的碳源、能源C.自养微生物的碳源、氮源、能源D.异养微生物的碳源、氮源、能源解析:含C、H、O、N的大分子有机化合物一般是蛋白质,因此可给异养微生物提供碳源、氮源、能源。答案:D2.培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是()①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥ B.①②③④⑤⑥C.⑥②③④①⑤ D.③④②①⑥⑤解析:培养基用高压蒸汽灭菌;培养皿能耐高温,用干热灭菌;接种环可通过灼烧灭菌达到迅速、彻底的灭菌效果;实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒,如用酒精擦拭双手;空气可用紫外线消毒;牛奶可采用巴氏消毒法,使营养成分不被破坏。答案:A3.下列说法正确的是()A.为微生物的生长繁殖提供营养基质的是固体培养基B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的菌落解析:培养基是微生物生长繁殖的营养基质,根据培养基的物理性质不同,可将培养基分成固体培养基、液体培养基和半固体培养基;液体培养基不加凝固剂。答案:D4.三个培养皿中分别加入10mL不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36h后,计算菌落数,结果如表所示。下列选项错误的是()培养皿培养基成分菌落数Ⅰ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、生长因子250Ⅲ琼脂、生长因子0A.该实验采用的是固体培养基B.该实验可采用稀释涂布平板法接种C.Ⅰ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D.Ⅱ和Ⅲ对照,说明大肠杆菌的生长需要糖类解析:培养基中均加入了琼脂,故为固体培养基;微生物接种的方法很多,最常用的是平板划线法或稀释涂布平板法;Ⅰ组和Ⅲ组存在两个变量,不能说明大肠杆菌的生长是否需要生长因子;Ⅱ组和Ⅲ组对照,自变量是葡萄糖的有无,说明大肠杆菌的生长需要糖类。答案:C5.细菌培养基常在121℃压力锅中灭菌。如果只是在100℃温度下将细菌培养基灭菌,下列生物仍会存活的是()A.大肠杆菌B.一种青霉菌C.枯草芽孢杆菌的芽孢D.沙门氏菌解析:芽孢是为了抵御外界不良环境而形成的一种休眠体,100℃的温度不能将其杀死。答案:C6.产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A.一个细菌、液体培养基B.许多细菌、液体培养基C.一个细菌、固体培养基D.许多细菌、固体培养基解析:菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体,形成于固体培养基上,有一定的形态结构,肉眼可见。由一个细菌形成的菌落,形态结构是相同的。如果有许多细菌形成的菌落,就可能不会有比较标准的形态。答案:C7.下列操作属于灭菌的是()A.接种前用火焰灼烧接种环B.接种前用酒精擦拭双手C.将平板倒置,放入培养箱中培养D.接种在酒精灯的火焰旁完成解析:要正确区分灭菌、消毒和防止杂菌污染的措施。A属于灭菌,B属于消毒,C、D都是实验操作过程中防止杂菌污染的措施,与灭菌无关。答案:A8.利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌,经培养后发现培养基上出现了多种菌落,不可能的原因是()A.培养基制备过程中被杂菌污染B.接种过程中,无菌操作不符合要求C.系列稀释时,无菌操作不符合要求D.由大肠杆菌的种类不同造成的解析:大肠杆菌培养基中出现了多种菌落,说明污染了杂菌,杂菌可能来自培养基,也可能是因为操作过程中无菌操作不符合要求。答案:D9.某同学为了纯化大肠杆菌,配制了如下培养基,下列相关叙述不正确的是()牛肉膏蛋白胨固体培养基配方牛肉膏g蛋白胨gNaClg将上述物质溶解后,添加蒸馏水,定容至1000mLA.该培养基配方成分中缺少凝固剂B.由该培养基配方可确认所培养微生物的同化类型C.培养大肠杆菌,需进行接种,接种环境须做到无菌D.进行接种时,接种环须进行酒精消毒解析:本题考查大肠杆菌需要的营养及功能、如何配制固体培养基、接种的环境及最常用的方法。牛肉膏、蛋白胨含有C、H、O、N等元素,所以它们既是有机碳源又是有机氮源,大肠杆菌同化类型为异养型。接种时应进行无菌操作,防止杂菌污染。用于接种的接种环须进行灼烧灭菌而不是“酒精消毒”。答案:D10.右图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是()A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B.划线操作必须在火焰上进行C.最可能得到所需菌落的区域是1D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌解析:操作前要将接种环放在火焰上灼烧灭菌;划线操作必须在火焰旁进行,而不是火焰上;最可能得到所需菌落的区域是5。答案:D11.下列依次表示倒平板、接种的位置,以及划线法接种的路径示意图,其中错误的是()解析:在划线法接种时,第二次划线应从第一次划线的线末开始。D图第二次划线与第一次划线、第三次划线与第二次划线都有间隙。答案:D12.稀释涂布平板法是微生物培养中常用的一种接种方法。下列相关叙述错误的是()A.操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释B.需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面C.不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落D.操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格的灭菌处理解析:若菌液浓度过大,形成的菌落连在一起,则得不到单个的菌落。答案:C13.为了保持菌种的纯净,需要进行菌种的保藏,下列有关叙述不正确的是()A.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D.对于需要长期保存的菌种,可以采用低温-4℃保藏的方法解析:对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法,保存于-20℃的冷冻箱中。答案:D14.根据所学的微生物知识回答下列相关的问题。(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑、和渗透压等条件。由于该种细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、、等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行(填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手需进行清洗和;静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能。(3)通常可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的。(4)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。(5)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。解析:大肠杆菌体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短,常作为遗传学研究的实验材料。微生物培养的操作过程要保证在无菌条件中进行。答案:(1)温度pH易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)鉴定(或分类)(4)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生(5)灭菌15.下面是有关微生物的培养与应用的问题,请分析作答。(1)图中是利用法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。为达到这一目的,操作上应注意

(答出一点即可)。(2)菌落形成的根本原因是。将乳酸菌接种到彻底灭菌的固体培养基上,要使其正常生长必须给予的条件是。(3)下表是一种培养基配方,请回答下列问题。成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂含量/g①该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供。②如果要对培养基的菌落进行纯化,在培养基上划线操作中,操作的第一步及每次划线之前都要灼烧接种环,目的是对接种环进行。解析:(1)根据图示可知,图中利用的是平板划线法接种。每次划线前要灼烧接种环;冷却后从上一区划线末端开始划;首尾区不重叠等。(2)乳酸菌是厌氧菌,要在无氧条件下培养。(3)葡萄糖是微生物的能源物质,还提供碳源。接种环进行灼烧,目的是避免接种环上可能存在的微生物污染培养基。答案:(1)平板划线稀释①每次划线前要灼烧接种环;②冷却后从上一区划线末端开始划线;③首尾区不重叠(答出其中一点即可)(2)子细胞成为群体隔绝空气(3)①碳源和能源②灭菌16.检验饮用水中细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题。(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为。下图所示的四种菌落分布图中,图不是由该方法得到的,而是利用得到的。(2)有三种材料或用具需要消毒或灭菌:培养细菌用的培养基与培养皿(A);玻璃棒、试管、烧瓶和吸管(B);实验操作者的双手(C)。其中需要消毒的是,需要灭菌的是。(填代号)(3)下表是一种培养基的配方,该培养基中的碳源是,氮源是。琼脂(填“提供”或“不提供”)营养成分。

成分含量蛋白胨g乳糖g蔗糖gK2HPO4g显色剂g琼脂g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL解析:(1)图中A、B、C为稀释涂布平板法得到的结果,D为平板划线法得到的结果。(2)实验者的手要进行消毒,实验用具都要进行灭菌。(3)含碳物质是碳源,含氮物质是氮源。琼脂是凝固剂,不提供营养成分。答案:(1)稀释涂布平板法D平板划线法(2)CA、B(3)乳糖、蔗糖和蛋白胨蛋白胨不提供题组21．固体培养基中需要加入琼脂的目的是()A．为菌体提供碳源 B．为菌体提供氮源C．使培养基保持水分 D．使培养基凝固[答案]D[解析]加入琼脂的主要目的是使培养基凝固。2．对下列有关平板划线接种法的操作错误的是()A．将接种环放在火焰上灼烧B．将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C．蘸取菌液和划线要在火焰旁进行D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连[答案]D3．下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是()A．防止杂菌污染B．消灭杂菌C．培养基和发酵设备都必须灭菌D．灭菌必须在接种前[答案]B4．下列关于灭菌的说法中，错误的是()A．灭菌是指杀死一定环境中所有微生物的细胞，不包括芽孢和孢子B．对不同的生物材料，应当采取不同的灭菌方法C．培养基一般采取高压蒸汽灭菌法D．高压蒸汽灭菌法最终使菌体蛋白质凝固变性[答案]A[解析]灭菌是一种严格的使所有微生物(包括胞体、孢子、芽孢等)均死亡的措施。5．制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基，关于倒平板的具体描述正确的是()①待培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指完全打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖⑥等待平板冷却5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上A．①③④⑤ B．④⑤⑥C．③⑤ D．①②④⑥[答案]C[解析]琼脂是一种多糖，在98℃以上可溶解于水，在45℃以下凝固，倒平板时高于50℃则会烫手，低于50℃时若不能及时操作，琼脂会凝固。无菌操作应贯穿于操作的全过程，皿盖全打开则空气中的微生物会进入培养基。6．煮沸消毒法与巴氏消毒法的主要区别是()A．温度不同B．时间不同C．前者适用于固体消毒，后者适用于液体消毒D．没有区别[答案]A[解析]煮沸消毒法所需温度为100℃，巴氏消毒法需70～75℃煮30min或80℃煮15min。7．平板冷凝后要将平板倒置，其意义是()A．利于大肠杆菌的接种B．防止杂菌污染C．利于培养基的冷却D．防止皿盖冷却水倒流入培养基[答案]D[解析]平板倒置可避免凝集在皿盖上的水流入培养基。8．利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现了多种菌落，不可能的原因是()A．培养基制备过程中被杂菌污染B．接种过程中，无菌操作不符合要求C．系列稀释时，无菌操作不符合要求D．大肠杆菌的种类不同[答案]D[解析]大肠杆菌培养基中出现了多种菌落，说明污染了杂菌，杂菌可能来自培养基，也可能是因为操作过程中无菌操作不符合要求。9．人们常用琼脂培养基来培养微生物，它在加热后呈溶胶状态，在室温下又呈半透明的凝胶状态。在凝胶状态下，其表面及内部不同部位可生长大量的不同代谢类型的肉眼可见的细菌菌落。请用提供的材料和用具，设计一个实验来探究某种细菌是需氧型、厌氧型还是兼性厌氧型。材料用具：某种细菌的菌种、含琼脂培养基的试管2支、无菌接种设备、恒温箱、水浴锅。实验步骤：(1)将2支含琼脂培养基的试管水浴锅中加热熔化；(2)在培养基冷却而凝固之前，__________________；(3)将2支试管置于恒温箱内培养，每天观察培养基中的菌落情况并做好记录。预测实验可能会出现的结果，并得出相应的结论。Ⅰ._______________________________________________________________________________________________________________________________Ⅱ._______________________________________________________________________________________________________________________________Ⅲ._______________________________________________________________________________________________________________________________[答案](2)用无菌接种设备将某种细菌菌种接种到一支试管中，振荡试管，使细菌均匀混于培养基中，另一只试管不接种作为对照。(3)Ⅰ.若只在培养基的表面生长有这种细菌的菌落，则说明它是需氧型。Ⅱ.若只在培养基的底部生长有这种细菌的菌落，则说明它是厌氧型。Ⅲ.若在培养基的各个部位都有细菌菌落，则说明它是兼性厌氧型。1．下表是关于四种生物能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述。描述正确的一组生物是()硝化细菌乳酸菌根瘤菌衣藻能源氧气、NH3分解乳酸固定N2利用光能碳源CO2糖类糖类CO2氮源NH3N2N2NOeq\o\al(－,3)代谢类型自养需氧型异养厌氧型异养需氧型自养需氧型A.硝化细菌与乳酸菌B．乳酸菌与根瘤菌C．根瘤菌与衣藻D．硝化细菌与衣藻[答案]D2．培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶采用的灭菌、消毒方法依次是()①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤[答案]A3．外科手术器械和罐头食品的消毒，都要以能够杀死什么为标准()A．球菌 B．杆菌C．螺旋菌 D．芽孢[答案]D[解析]消毒一般以杀死芽孢、孢子为标准。4．在平板划线时，若需多次取菌划线，应在哪次划线时灼烧接种环()A．每次都应灼烧 B．只第一次C．每次均不需灼烧 D．第一次和最后一次[答案]A[解析]平板划线时，每次划线都要灼烧接种环。5．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是()A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素B．碳源物质也是该微生物的能源物质C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D．水是该微生物的营养要素之一[答案]B[解析]自养微生物的能源物质为光能或化学能。6．下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是()A．含碳有机物 B．蛋白胨C．含碳无机物 D．花生粉饼等天然物质[答案]C[解析]酵母菌为异养生物，无法利用无机碳。7．高温灭菌的原理是()A．每种微生物生长的最适温度是一定的B．微生物对高温环境不适应C．高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动D．高温降低了环境中氧的浓度[答案]C[解析]相对于动植物来说，微生物的耐高温能力是很强的。灭菌即杀死各种微生物及其他生命形态(如芽孢)，所以要采用更高温度以破坏微生物体内蛋白质、核酸的分子活性，以使其永远丧失生活能力。8．产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A．一个细菌、液体培养基B．许多细菌、液体培养基C．一个细菌、固体培养基D．许多细菌、固体培养基[答案]C[解析]菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体，形成于固体培养基上，有一定的形态结构，肉眼可见。同种细菌形成的菌落，形态结构是相同的。如果有许多细菌形成的菌落，就不可能有比较标准的形态。二、非选择题9．(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________、________和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________(消毒、灭菌)；操作者的双手需要进行清洗和________；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________________________________________________________________________________________________。(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。[答案](1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)比例合适(4)鉴别(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌题组31.下列可以作为自养微生物氮源的是()。、尿素B.牛肉膏、蛋白胨C.尿素、酵母粉D.铵盐、硝酸盐解析:自养微生物需要吸收的是自然界中的无机物,包括无机碳源和无机氮源。尿素、牛肉膏、蛋白胨、酵母粉均不能作为自养微生物的氮源,铵盐、硝酸盐可以作为自养微生物的氮源。答案:D2.下列叙述正确的是()。A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B.培养基只有两类:液体培养基和固体培养基C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D.微生物在固体培养基上生长时,可以形成肉眼可见的单个细菌解析:培养基是微生物生长繁殖的营养基质。按培养基的形态分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基。固体培养基是液体培养基中加入凝固剂后制成的,加水不能再变成液体培养基。单个细菌用肉眼看不见,肉眼可见的是培养基上形成的菌落。答案:A3.下列操作与消毒、灭菌无关的是()。A.接种前用火焰灼烧接种环B.接种前用酒精擦拭双手C.将平板放入培养箱中培养D.接种要在酒精灯的火焰旁完成解析:灼烧接种环、酒精擦拭双手及接种时在火焰旁完成都是为了消毒、灭菌、避免杂菌污染。将平板放入培养箱中培养,则与消毒、灭菌无关。答案:C4.下列有关细菌培养的叙述,正确的是()。A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C.向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动解析:A项,在琼脂固体培养基上长出的单个菌落是由一种细菌增殖而来的;B项,青霉素能破坏细菌等原核生物的细胞壁而抑制细菌的增殖,对真菌没有明显作用;C项,破伤风杆菌是厌氧菌,通入氧气会抑制其生长;D项,半固体培养基中可以观察细菌的运动。答案:D5.下列有关平板划线法的操作,错误的是()。A.将接种环放在火焰上灼烧B.将已冷却的接种环伸入菌液中沾取一环菌液C.沾取菌液和划线要在火焰旁进行D.接种环划线要将最后一区的划线与第一区的划线相连解析:为了避免杂菌污染,沾取菌液和划线要在火焰旁进行。每次划线之前都要对接种环进行灼烧灭菌,划线操作结束仍需灼烧接种环。灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高,杀死菌种。进行平板划线时不能将最后一区的划线与第一区的划线相连。答案:D6.微生物培养过程中,肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是()。A.细菌的大小、形状、颜色 B.菌落的大小、形状、颜色C.有无鞭毛 D.培养基的不同解析:微生物的鉴别和分离,一般要用固体培养基,由于不同微生物在固体培养基上长出菌落的形状、颜色等各不相同,所以可以作为鉴别的标准。而一个细菌细胞很小,肉眼无法看到其颜色、形状等。答案:B7.用培养液培养三种细菌,让它们在三支不同的试管中生长,右图显示了细菌的生长层,如果此时往三支试管中通入氧气,则细菌的繁殖速度将是()。A.甲不变,乙减慢,丙加快B.甲加快,乙加快,丙减慢C.甲减慢,乙减慢,丙加快D.甲减慢,乙加快,丙减慢解析:甲试管内的细菌在试管上部,为好氧菌,乙试管内的细菌均匀分布,为兼性厌氧菌,丙试管内的细菌在试管底部,为厌氧菌。向试管内通入氧气,能够促进兼性厌氧菌和好氧菌的繁殖,抑制厌氧菌的繁殖。答案:B8.外科手术器械和罐头食品的灭菌,都要以能够杀死什么为标准?()A.球菌 B.杆菌C.螺旋菌 D.芽孢解析:灭菌是采用强烈的理化因素杀死所有的微生物,包括芽孢和孢子。答案:D9.下列有关稀释涂布平板法的叙述,错误的是()。A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C.适宜条件下培养D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落解析:稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。用不同稀释度的菌液接种,只有在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,才能够在培养基表面形成单个菌落,而不是所有培养基上均可出现单个菌落。答案:D10.高中生物学实验中,在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是()。A.将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上解析:植物组织培养中的外植体必须在严格的无菌环境中进行培养,而且操作的各环节都要注意严格灭菌,必须无菌操作,C项正确。葡萄酒的制作原理是利用酵母菌无氧发酵产生酒精,在无氧条件下大部分微生物都不能生存,随着发酵的进行,酒精浓度增大,也有杀菌作用;制作腐乳时,主要是将毛霉等微生物接种在豆腐上,此过程的加盐、加卤汤等操作均有一定的杀菌作用;选择培养基只能允许目的菌生长,会抑制其他杂菌生长。因此不进行严格无菌操作时,A、B、D选项的情况比C选项的情况受影响要小。答案:C11.下列关于细菌的叙述中,正确的是()。A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落C.在加入青霉素的培养基中,细菌仍可大量繁殖D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选解析:自养型细菌可以利用无机碳源,异养型细菌只能利用有机碳源,A项错误。分离细菌并获得单菌落需要固体培养基,B项错误。青霉素能杀死细菌,在加入青霉素的培养基中,细菌不会大量繁殖,C项错误。金黄色葡萄球菌有耐高浓度食盐的特点,可以用含高浓度NaCl的培养基筛选金黄色葡萄球菌,D项正确。答案:D12.为了获得纯度高的大肠杆菌,需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。(1)培养大肠杆菌,配制固体培养基的基本步骤:计算→称量→→→倒平板。(2)称量时,由于牛肉膏比较黏稠,可以用挑取,放在上称量。由于牛肉膏和蛋白胨,称量时动作要迅速,称量后要及时盖上瓶盖。(3)在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上的大肠杆菌能生长,说明培养基含有等大肠杆菌生长所需的营养要素。(4)微生物纯化培养可以通过多种接种方法如和等,使大肠杆菌在固体培养基上形成单个,从而获得纯菌株。解析:考查微生物纯化培养的基础知识。配制牛肉膏蛋白胨培养基的基本步骤:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。称量时,可用玻璃棒挑取,放在称量纸上称量,称量时动作要迅速。牛肉膏蛋白胨培养基中含有大肠杆菌所需要的碳源、氮源、无机盐、水等营养要素,所以常用来培养大肠杆菌。微生物纯化培养的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,可使大肠杆菌在固体培养基上形成单个菌落,从而获得纯菌株。答案:(1)溶化灭菌(2)玻璃棒称量纸容易吸潮(3)碳源、氮源、无机盐、水(4)平板划线法稀释涂布平板法菌落13.下表为某微生物培养基的配方,请回答下列问题。成分含量成分含量NaNO33gK2HPO41gKClgMgSO4·7H2OgFeSO4g(CH2O)30g青霉素万单位H2O1000mL(1)该培养基未加入凝固剂,依据物理性质,该培养基属于培养基。(2)该培养基中的碳源是,因为该物质是有机物,因此也可给培养的微生物提供。(3)根据该培养基的配方,所培养的微生物的代谢类型是。(4)该培养基不适合培养细菌,因为青霉素可以抑制细菌的生长,但真菌可以在上面生存,因此由其功能上看该培养基可看作是一种培养基。解析:(1)依物理性质划分,培养基分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基,该培养基没有加凝固剂琼脂且水的含量很多,所以应是液体培养基。(2)(CH2O)是糖类,既可作碳源,也可提供能源。(4)青霉素对培养的微生物有限制和选择作用,所以该培养基可看作是一种选择培养基。答案:(1)琼脂液体(2)(CH2O)能源(3)异养型(4)选择14.有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染,某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答下列问题。(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即和。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。解析:(1)实验目的是筛选出可以降解原油的高效菌株,因此在筛选的时候应该用以原油为唯一碳源的选择培养基,这样只有能够分解原油的微生物才能在该培养基上生长,从而筛选出降解原油的微生物。(2)纯化分离微生物的方法有两种:平板划线法和稀释涂布平板法。(3)微生物降解原油后会形成透明圈,分解圈越大说明该菌株的降解能力越强。(4)常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。答案:(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰15.(2014四川理综,10)有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。图甲图乙(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、四类,该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是。(2)与微生物培养基相比,植物组织培养的培养基常需添加生长素和,这些植物激素一般需要事先单独配制成保存备用。(3)纯化菌株时,通常使用的划线工具是。划线的某个平板培养后,第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域所划的第一条线上无菌落,其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有。(4)为探究苯磺隆的降解机制,将该菌种的培养液过滤离心,取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是,该实验设计是否合理?为什么?。解析:(1)微生物生长繁殖所需营养物质有碳源、氮源、水和无机盐四类。该实验是要分离能降解苯磺隆的菌株,所以以苯磺隆作为唯一碳源。(2)植物组织培养所用的植物激素是生长素和细胞分裂素,应先将这两种植物激素单独配制成母液保存备用。(3)进行菌株纯化时,常用的划线工具是接种环。用接种环进行第二区域划线前需灼烧灭菌,灭菌后的接种环温度过高,若不经冷却立即进行划线操作,会使第一条线上无活菌存在。另外,若划线未从第一区域末端开始,也会导致题述的划线无菌落现象。(4)据图可知,该实验的假设为该微生物产生的分解苯磺隆的物质是蛋白质,该实验的设计不合理,因为缺少空白对照实验。答案:(1)氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖(2)细胞分裂素母液(3)接种环①接种环灼烧后未冷却;②划线未从第一区域末端开始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质不合理,缺少空白对照题组41．以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序正确的是 ()A．计算→称量→倒平板→溶化→灭菌B．计算→称量→溶化→倒平板→灭菌C．计算→称量→溶化→灭菌→倒平板D．计算→称量→灭菌→溶化→倒平板2．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的具体描述正确的是 ()①等培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖⑥等待平板冷却5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上A．①②③④ B．④⑤⑥C．③⑤ D．①②④⑥3．下列有关倒平板操作错误的是 ()A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰C．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌面上D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置知识点二纯化大肠杆菌4．用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。原因是 ()A．平板上的一个菌落就是一个细菌B．菌落中的细菌数是固定的C．此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D．此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同5．能够测定样品活菌数的方法是 ()A．稀释涂布平板法 B．重量法C．直接计数法 D．比浊法6．在接种操作的过程中，不正确的是 ()A．要将接种环灼烧灭菌B．取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C．将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位D．接种后还要将管口灭菌加塞7．有关稀释涂布平板法的说法中，错误的是 ()A．用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液管的橡皮头，吹吸三次，目的是使菌液与水充分混匀B．移液管需经过灭菌C．试管口与移液管应在离火焰1～2cm处D．涂布时可转动涂布器，使菌液涂布均匀8．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是 ()A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温－4℃保藏的方法9．在平板划线操作中，错误的是 ()A．将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红B．将烧红的接种环在火焰旁边冷却C．接种环在平板上的划线位置是随机的D．在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰10．微生物培养过程中，肉眼鉴别金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的重要依据是 ()A．细菌的大小、形状、颜色 B．菌落的大小、形状、颜色C．有无鞭毛 D．培养基的不同11．在培养基的配制过程中，具有如下步骤，其正确顺序为 ()①溶化②调pH③加棉塞④包扎⑤分装 ⑥称量A．①②⑥⑤③④ B．⑥①②⑤③④C．⑥①②⑤④③ D．①②⑤④⑥③12．微生物培养是微生物工程中的基础技术。下列相关叙述正确的一项是 ()A．病毒和细菌的培养基成分相同B．平板划线法中的划线是连续进行的C．微生物培养基中并不都必需添加碳源或氮源D．在培养的过程中，细胞种类、数目都不断地增加13．若某一稀释度下，平板上生长的平均菌落数为80，涂布平板时所用的稀释液体积为mL，稀释液的稀释倍数为106，则每克样品中的活菌数约为()A．8×108 B．8×107 C．8×105 D．8×10614．下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏蛋白胨培养基的配方。请回答：试剂用量牛肉膏g蛋白胨gNaClg琼脂g水1000mL(1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是________和________。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行__________处理。(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________和______________两种。在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是_______________________________________。(3)假设某同学发现培养基上细菌数目过多地连成一片，可能的原因是什么？______________________________________________________________________________________________________________________。15．为了获得纯度高的大肠杆菌，需要对大肠杆菌进行培养和分离。培养大肠杆菌一般用牛肉膏—蛋白胨—琼脂培养基。(1)培养大肠杆菌，配制固体培养基的基本步骤是：计算→称量(2)称量时，牛肉膏由于比较黏稠，可以用________挑取，放在________上称量。牛肉膏和蛋白胨由于________，称量时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖。(3)在牛肉膏—蛋白陈—琼脂培养基上大肠杆菌生长，说明培养基含有_______________等大肠杆菌生长所需的营养要素。(4)微生物纯化培养可以通过多种接种方法如______________和________________等，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个________，从而获得纯菌株。16．下表为牛肉膏蛋白胨培养基的成分列表，据此回答：成分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量g1gg100mL(1)蛋白胨在培养基中的作用是________________________________。(2)要用此原料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的成分是______________。(3)表中各成分含量确定的原则是________________________________________________________________。(4)培养基配制好后，分装前应进行的工作是_____________________________________________________________。(5)从配制培养基直到培养完成，所采用的预防杂菌污染的方法是____________________________________________________________________________________________________________________________。(6)在培养基凝固前要搁置斜面，其目的是_____________________________________________________________。题组51.下列有关实验的叙述不正确的是（）A．用于筛选杂交瘤细胞的培养基属于鉴别培养基B．诱导外植体脱分化需要用含有蔗糖的培养基避光培养C．平板划线法和稀释涂布平板法均可用于分离纯化菌种D．用稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌实际数目低2.下表是关于对四种生物能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，其中正确的一组是（）硝化细菌乳酸菌根瘤菌衣藻能源利用化学能分解乳酸固定N2利用光能碳源CO2糖类糖类CO2氮源NH3N2N2NO3－代谢类型自养需氧型异养厌氧型异养需氧型自养需氧型A.硝化细菌与乳酸菌B．乳酸菌与根瘤菌C．根瘤菌与衣藻D．硝化细菌与衣藻3.微生物培养是微生物工程中的基础技术．下列相关叙述正确的是（）A．培养基中并不都必需添加碳源或氮源B．平板划线法常用于微生物的分离与计数C．病毒和细菌的培养基成分基本相同D．配制牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后还需调pH4.以下部位不含有微生物的是()A.洗干净的脸上B.洗完澡后的皮肤C.刷完牙后的口腔D.灼烧之后的接种环5.为了解土壤微生物是否能分解农药，并尽快得出实验结论，有人用“敌草隆”（一种除草剂）进行了实验，取等量砂土分装于相同的两容器中，a组高压灭菌，b组不灭菌，下列有关事项肯定错误的是（）A．a组为实验组，b组为对照组B．向a、b中喷入等量敌草隆，再置于同一温箱中培养相同时间C．检测敌草隆消失的情况，预计a组敌草隆含量不变，b组敌草隆全部分解。D．只用砂土，实验效果不如几种典型土壤混合后的好6.用平板划线法或稀释涂布平板法都可以纯化大肠杆菌。二者的共同点有（）①可以用相同的培养基②都要使用接种针进行接种⑧都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①②B．③④C．①③D．②④7.煮沸消毒法与巴氏消毒法的主要区别是()A.温度不同B.时间不同C.前者适用于固体消毒,后者适用于液体消毒D.没有区别8.下列说法正确的是（）A.细胞内的诱导酶一旦产生，其活性将一直保持下去B.组成酶不是微生物细胞中一直存在的，而是微生物生长到一定阶段后才产生C.诱导酶的合成除取决于诱导物外，还取决于细胞内所含的基因D.大肠杆菌分解葡萄糖的酶是诱导酶，分解乳糖的酶是组成酶9.下列有关大肠杆菌的培养的叙述不正确的是（）A．在大肠杆菌的培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件B．在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒C．若要测定培养液中大肠杆菌的数量，除应多次重复外还应保证待测样品的稀释度D．使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃10.抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图a)，继续在同样条件下培养3天，结果如图b。分析结果，得出的结论是()A.乙菌产生了抗生素B.丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制C.乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制D.丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长11.如下图为谷氨酸发酵装置图。(1）图中3、6处是发酵罐夹层中水的进出口，水在发酵罐夹层流动的作用是。(2）谷氨酸发酵液的pH应控制在7～8范围内，随着代谢产物的积累，发酵液pH变化趋势是,控制办法是。发酵过程中，若谷氨酸积累过量，会抑制的活性，导致合成途径中断，这种代谢调节方式称为调节。(3）如果在4处通人空气，谷氮酸产量会，原因是。12.微生物的抗性突变是自发产生的？还是与相应的环境因素有关？有人设计下列实验，以研究探讨该问题．实验选用对链霉素敏感的大肠杆菌K12．培养基3、7、11中含有链霉素，其它培养基中不含链霉素．请据实验回答：（1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养，接着通过如图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养．“印章”位置保持不变．培养皿2、3根据其功能，分别称为培养基、培养基．“印章”使用前需作处理．（2）培养基2中的菌落是，培养基3中的菌落是．（3）培养基3的A点处有菌落生长，将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中．如图反复几次实验．请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”：，原因是．（4）培养液4、8中的菌液越来越少，但培养皿7、11中的菌落越来越多．你的解释是：．（5）要分离出单个菌落，除了本实验中的涂布法外，还可以用法．（6）上述不含链霉素培养基通常使用的是，下表是另一种培养基配方，该培养基具有作用．成分KH2PO4Na2PO4MgSO4？7H2O葡萄糖尿素琼脂含量（7）现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如表所示．根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是．物质突变体培养基中加入的物质ABCDEG1---+-+2-+-+-+3-----+4-+++-+5++++-+题组61．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是()。A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素B．碳源物质也是该微生物的能源物质C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D．水是该微生物的营养要素之一解析该微生物以CO2为唯一碳源，但CO2不能为微生物提供能量，不属于能源物质。答案B2．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是()。A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D．待平板冷却凝固约5～10min后将平板倒过来放置解析制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却至50℃左右时，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时进行倒平板。平板冷却凝固约5～10min后还需倒置。答案A3．平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是 ()。A．接种时再拿起来方便B．在皿底上标记日期等方便C．正着放置容易破碎D．防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染解析平板倒置主要是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。答案D4．下列有关稀释涂布平板法，叙述错误的是()。A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C．适宜条件下培养D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落解析稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。用不同稀释度的菌液接种，只有在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，才能够在培养基表面形成单个菌落，而不是所有培养基上均可出现单个菌落。答案D5．为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是()。A．对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法B．临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上C．临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D．对于需要长期保存的菌种，可以采用低温－4℃保藏的方法解析对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后灭菌，将1mL菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱中保存。答案D6．(10分)大肠杆菌通常容易居于人的结肠中，对人体无害，但某些菌株能造成尿路感染和腹泻。请回答下列问题。(1)在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行______(消毒、灭菌)；操作者的双手需进行清洗和______(消毒、灭菌)；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________________。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的______。(4)通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________________________________。(5)培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________________。(6)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。解析本题主要考查微生物培养的综合知识。消毒一般只是消灭体表的微生物，而灭菌是杀灭所有的微生物及孢子等。观察细菌等微生物的有无通常是通过培养来观察菌落的形状、颜色等。答案(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌7．(10分)从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从______环境采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择______的培养基，并在______条件下培养。(3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。获得图A效果的接种方法是______，获得图B效果的接种方法是______。(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行______，接种前要进行______，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在______条件下进行。解析噬盐菌的菌样应从高盐环境采集。微生物产生淀粉酶说明其碳源是淀粉，应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养。图A菌落分布较均匀，接种方法是稀释涂布平板法，图B菌落集中呈线状，接种方法是平板划线法。配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行。答案(1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温(3)稀释涂布平板法平板划线法(4)pH调整高压蒸汽灭菌无菌8．(10分)(2011·上海高考)分析有关微生物的资料，回答下面相关的问题。1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌。(1)幽门螺杆菌的遗传物质集中分布的区域称为______。(2)图中4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基(琼脂含量g/L)中的生长状态，其中②号试管代表幽门螺杆菌的生长状态，由图判断，该菌在______条件下不能生长。产甲烷杆菌的生长状态最能由试管______代表。(3)下表是某培养基的配方。成分葡萄糖KH2PO4MgSO4NaClCaSO4CaCO3琼脂蒸馏水含量10ggggg5gg1L将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中，置于37℃下培养一段时间后，在该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时______，主要原因是_________________________________________________________。(4)幽门螺杆菌形态如图所示，该菌在人体中可引起胃溃疡等胃部疾病。幽门螺杆菌生长的最适pH为6～7，人体胃腔内pH在1～2之间，但胃黏膜的黏液层靠近上皮细胞侧pH为左右。若幽门螺杆菌随食物进入胃腔，结合其结构特点以及能导致胃溃疡的特性，推测该菌在胃内如何存活？解析(1)幽门螺杆菌为原核生物，没有核膜包围的细胞核，遗传物质集中在拟核。(2)幽门螺杆菌生活在半固体培养基的中部，说明它不能生活在氧气浓度过高或过低的地方；产甲烷杆菌为厌氧型细菌，应生活在半固体培养基的底部。(3)培养基中缺乏氮源，幽门螺杆菌不能正常生活，数量会减少。(4)幽门螺杆菌进入胃腔后，可以先依靠鞭毛运动至pH较高处缓冲，然后分泌蛋白中和胃酸，提高pH，以便继续生存和繁殖。答案(1)拟核(核区)(2)氧气浓度过高或过低③(3)少缺少氮源(缺少氮源和生长因子)(4)幽门螺杆菌进入胃腔后，首先依靠鞭毛运动至pH较高处缓冲，然后分泌蛋白中和胃酸，提高pH，以便继续生存和繁殖。题组71.下列可以作为自养微生物氮源的是()、尿素B.牛肉膏、蛋白胨C.尿素、酵母粉D.铵盐、硝酸盐2.有关微生物营养物质的叙述中,正确的是()A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量3.获得纯净培养物的关键是()A.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B.接种纯种细菌C.适宜环境条件下培养D.防止外来微生物的入侵4.以下部位不含有微生物的是()A.洗干净的脸上B.洗完澡后的皮肤C.刷完牙后的口腔D.灼烧之后的接种环5.煮沸消毒法与巴氏消毒法的主要区别是()A.温度不同B.时间不同C.前者适用于固体消毒,后者适用于液体消毒D.没有区别6.为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏,下列有关叙述不正确的是()A.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异D.对于需要长期保存的菌种,可以采用-4℃低温保藏的方法7.(2013·江苏高考)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是()A.培养基分装到培养皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D.培养过程中每隔一周观察一次8.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。(1)培养基中含有的蛋白质、淀粉分别为细菌培养提供了和。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是和。(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于中培养,培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验。(4)培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越。1.不同培养基的具体配方不同,但一般都含()A.碳源、磷酸盐和维生素B.氮源和维生素C.水、碳源、氮源和无机盐D.碳元素、氧元素、氢元素、氮元素2.高温灭菌的原理是()A.每种微生物生长的最适温度是一定的B.微生物对于高温环境不适应C.高温破坏了细胞内蛋白质、核酸的结构,影响其生命活动D.高温降低了环境中氧的浓度3.关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的说法,叙述错误的是()A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D.待平板冷却凝固约5min～10min后将平板倒过来放置4.(2013·宜春高二检测)如图是微生物平板划线示意图,划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是()A.操作前不用做任何处理B.划线操作必须在火焰上进行C.在每个区域中都可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌5.下列操作与消毒或灭菌有关的是(多选)()A.接种前用火焰灼烧接种环B.接种前用酒精擦拭双手C.将平板倒置,放入培养箱中培养D.接种在酒精灯的火焰旁完成6.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如图所示,①为土壤样品。请回答下列问题:(1)②中培养目的菌株的培养基中应加入作为碳源,②中不同浓度碳源的培养基(A.影响;B.不影响)细菌的数量,如果要测定②中活细菌数量,常采用法。(2)④为对照,微生物在④中不生长,在⑤中生长,④与⑤培养基的主要区别在于;使用法可以在⑥上获得单菌落;采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养?。(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小?。(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染?。7.(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑、和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、、等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行(消毒、灭菌);操作者的双手需要进行清洗和;静止于空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能。(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的。(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的。(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。答案解析1.【解题关键】自养微生物所要的氮源为无机氮。最常用的氮源为铵盐、硝酸盐。【解析】选D。自养微生物需要吸收的是自然界中的无机物,包括无机碳源和无机氮源。虽然N2可以被固氮菌直接利用,但是固氮微生物不属于自养型微生物。2.【解析】选D。不同的微生物所需营养物质有较大差别,要针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项,它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同时是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同时是能源,如葡萄糖;有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样,如二氧化碳,可作为自养型微生物的碳源,NaHCO3可作为自养型微生物的碳源和无机盐,而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项,无机氮源提供能量的情况是存在的,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。3.【解析】选D。获得纯净培养物的关键是防止外来微生物入侵,即在各步操作中都应做到无菌操作。4.【解析】选D。用清水洗脸、洗澡、刷牙只是起清洁作用,达不到灭菌效果,只有灼烧过的接种环才是真正无菌的。5.【解析】选A。煮沸消毒法是指在100℃条件下煮沸5min～6min,而巴氏消毒法则是在70℃～75℃条件下煮30min或在80℃条件下煮15min,二者的关键区别是温度不同。6.【解析】选D。对于需要长期保存的菌种,需要在-20℃的冷冻箱中保存。7.【解题关键】解答本题，需要注意以下两点：(1)明确处理有机废水的微生物类型是异养型，不需要进行光合作用。(2)明确培养皿是在倒平板的时候使用。【解析】选B。本题考查微生物的分离和培养。A项中，培养基分装到培养皿前进行灭菌，故错误。B项中，从前一区域划线的末端开始往后一区域内划线之前，需要灼烧接种环，故正确。C项中，有机废水中的微生物只能利用现成的有机物，不能进行光合作用，没有必要放在光照培养箱中培养，故错误。D项中，微生物的繁殖速度很快，应培养24h后观察和记录结果，故错误。8.【解析】(1)蛋白质中含有C、N元素,为细菌培养提供氮源和碳源,淀粉只能提供碳源。(2)培养基采用高压蒸汽进行灭菌效果好。(4)不同微生物形成的菌落不同,有多种菌落即有多种细菌;菌落总数越多,污染程度越重。答案：(1)氮源(碳源不作要求)碳源无机盐水(2)高压蒸汽灭菌(3)恒温培养箱无菌水(4)多高1.【解析】选C。培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。2.【解析】选C。蛋白质和核酸是细胞表现生命活动的最重要物质,它们都是大分子化合物,具有复杂的空间结构,高温能使它们的空间结构受到破坏而失去活性。3.【解题关键】解答本题需明确培养基的具体配制步骤、为避免杂菌污染和防止接种的微生物受损伤在倒平板时的注意事项;同时还应注意培养基中各组分的量要准确,尽量减少实验误差。【解析】选A。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,不能颠倒。牛肉膏容易受潮,当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却至50℃左右时,用手触摸锥形瓶刚刚不烫手,并且培养基处于溶化状态时进行倒平板。平板冷却凝固(大约需5min～10min)后还需要倒置。4.【解析】选D。每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目减少,以便得到菌落。划线后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。【规律方法】平板划线法和稀释涂布平板法对大肠杆菌的纯化的比较(1)平板划线法中,由于划线时每次从上一次划线的末端开始,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。(2)稀释涂布平板法中,由于将菌液进行了一系列的梯度稀释和涂布培养,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,形成单个菌落。5.【解析】选A、B、D。接种用具、器皿、空气中都充满了微生物,都有污染的可能,必须严格消毒、灭菌。A、B、D都是实验操作过程中消毒、灭菌或防止杂菌污染的措施。将平板倒置,放入培养箱中培养是为了防止杂菌污染,不属于消毒和灭菌。6.【解析】(1)研究人员从土壤中筛选只能利用苯酚的细菌菌株,因此,在选择培养基中应加入苯酚作为碳源,不同浓度的苯酚会影响细菌的数量。测定细菌数量,常采用稀释涂布平板法。(2)由于该细菌菌株只能利用苯酚,④中无苯酚,⑤中含有苯酚,⑤可培养获得分解苯酚的菌株,④则不能。使用稀释涂布平板法或平板划线法可以在⑥上获得单菌落。(3)自变量为不同菌株,因此,本实验用同样浓度的苯酚培养不同菌株,一定时间后,测定培养液中苯酚含量的变化情况。若苯酚浓度下降较多,说明此菌株分解苯酚能力较强。(4)实验过程中防止微生物污染的措施有多种,用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌,接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌,接种过程在酒精灯上方形成的无菌区域进行。答案：(1)苯酚A稀释涂布平板(2)④含除苯酚外的其他碳源,⑤以苯酚作为唯一碳源稀释涂布平板法或平板划线避免培养过程中产生的水分影响微生物的生长(3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株,一定时间后,测定培养液中苯酚的含量(4)培养基灭菌,接种环灭菌,接种过程无菌操作【规律方法】正确判断培养基制作与接种操作是否合格的方法(1)从培养基制作是否合格上判断:如果未接种的培养基在恒温箱中保温1d～2d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。(2)从接种操作是否符合无菌要求上判断:如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合接种菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,重新操作。7.【解析】(1)大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点,培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。(2)灭菌:是用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,所以对培养基和培养皿进行灭菌。消毒:是用较为温和的物理或化学方法,仅能杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物,操作者的双手需要进行清洗和消毒。紫外线能使蛋白质变性,还能损伤DNA的结构。(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养,应保证样品稀释的比例合适。(4)对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定。答案：(1)温度酸碱度易培养生活周期短(2)灭菌消毒损伤DNA的结构(3)比例合适(4)鉴定(或分类)(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生(6)灭菌题组81．有关微生物营养物质的叙述中，正确的是()A．是碳源的物质不可能同时是氮源B．凡是碳源均提供能量C．除水以外的无机物只提供无机盐D．无机氮源也能提供能量解析对于异养微生物而言，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源又是氮源；CO2是自养细菌的碳源但并不提供能量；CO2和N2是无机物可作为微生物的碳源和氮源；硝化细菌的氮源是氨，同时氨氧化也是硝化细菌的能量来源。答案D2．不同微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养描述中不正确的是()A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素B．碳源物质也是该微生物的能源物质C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D．水是该微生物的营养要素之一解析自养微生物碳源为无机物，不能作为能源，能源应是光能(如光合细菌)或氧化无机物释放的化学能(如硝化细菌)。答案B3．下列操作与灭菌无关的是()A．接种前用火焰灼烧接种环B．接种前用酒精擦拭双手C．培养基在50℃时搁置斜面D．接种在酒精灯的火焰旁完成解析接种用具、器皿、空气、及操作者手上、衣服等都带有微生物，都有污染的可能，都要进行消毒与灭菌。培养基在50℃时搁置斜面，目的是扩大接种面积，与灭菌无关。答案C4．对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是()①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤解析培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿能耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底的灭菌效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；为不破坏其营养成分，对牛奶可采用巴氏消毒法。答案A5．获得纯净培养物的关键是()A．