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文档简介
动物遗传学实验实验四果蝇唾腺染色体的
制备和观察
一、实验目的1.练习分离果蝇幼虫唾腺的技术,学习唾腺染色体的制片方法2.观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征二、实验原理果蝇是双翅目昆虫,幼虫期具有很大的唾腺细胞,其中的染色体是巨大的唾液腺染色体唾液腺染色体不断地进行自我复制而不分开,经过许多次的复制形成约1000~4000拷贝的染色体丝,合起来达5mm宽,400mm长,比普通中期相染色体大得多(约100~150倍),所以又称为多线染色体唾液腺染色体具有许多重要特征,为遗传学研究的许多方面,如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料三、实验材料与器具三龄幼虫0.9%生理盐水胭脂红染色液解剖镜解剖针吸水纸
四、实验步骤(1)
(1)剥离唾腺在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水,选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫,或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。每只手各持一个解剖针,在解剖镜下进行操作。果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处,左手持解剖针按压住虫体后端三分之一的部位,固定幼虫,右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位,适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。唾腺是一对透明的棒状腺体,外有白色的脂肪组织(不透明)。去除幼虫其它组织部分,并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。果蝇唾腺剥离示意图四、实验步骤(2)(2)染色:吸去生理盐水,注意操作时要边观察边吸湿,最好用解剖针轻压,防止连同唾腺一起吸走;滴加胭脂红染色液,染色20-30min(3)压片:染色完成后,盖上干净的盖片,并覆一层滤纸。将片子放在实验台上,用大拇指均匀用力压片。(注意不要使盖片移动。)五、注意事项1.一定加生理盐水,否则唾腺易干。2.将脂肪组织清除干净3.水不可太多,否则幼虫会漂浮而且活跃4.染色时间不可过长,否则背景也着色5.压片时要逐渐加力,用力要均匀6.染色完以后,将旧的染色液吸去,加新的染色液,再压片7.吸水时勿将唾腺一起吸走六、实验结果观察检查你制作的制片,寻找形态良好、分散适中的
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