T9紫外可见分光光度计应用案例普析

紫外可见分光光度计应用案例案例1.肉制品中亚硝酸盐的测定前处置方式：称取5g（精准至O.OIg）制成匀浆的试样，置于50mL烧杯中，加12.5mL饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70工左右的水约300mL将试样洗入500mL容量瓶中，于滚水浴中加热15min掏出置冷水浴中冷却，并放置至室温。在振荡上述提取液时加入5mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置30min,除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL,滤液备用。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表1）：表1测量参数测量波长（nm）538比色皿光程（cm）2检测界面（见图1）：定里81室H2Q15036鬲询氓屋毎＜jud関豪炮:怨[R-el533.00jui1标進蒂豪炮:怨[R-el533.00jui1标進蒂ft0.00o.aoKi0.OLOD22.000.031A0.03443标准梓品■i.0DaQ6Z4Q.DB24丁宗Kh:标准觀6.00e.oDa0954a.1256CL0E540.1ESBh溉萍昂：标淮萍品10.00Q.15B3|J.]ES3_T_标准牡品标准觀15.OD20.0025.00a23Z3a.30750.38150.23230.3DT50.3B1E标准洋品-炮:怨[R-rf533.00Mi]L.4B0.02520.OESE2L.E?0.02660.03S6未右芒恳能LHdA.i=[:H：：）4ID茨iL力辻KD0DQ2T4KL001522R0.9939图1肉制品中亚硝酸盐的检测界面上图标准曲线中亚硝酸钠标准系列的质量依次为0.0pg、2.0pg、4.0pg、6.0pg、8.0pg、10.0pg、15.0pg、20.0pg、25.0pg（100mL容量瓶中）。方式检出限：该方式检出限为1mg/kg，能够知足《GB5009.33-2020食物平安国家标准食物中亚硝酸盐和硝酸盐的测定第二法分光光度法》的检测要求。参考标准：《GB5009.33-2020食物平安国家标准食物中亚硝酸盐和硝酸盐的测定第二法分光光度法》案例2.啤酒中甲醛的测定前处置方式：吸取已除去二氧化碳的样品25.00mL移入500mL蒸馏瓶中，加200g/L磷酸溶液20.00mL于蒸馏瓶，接水蒸气蒸馏装置中蒸馏，搜集馏出液于lOOmL容量瓶中（约lOOmL），冷却后加水稀释至刻度。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表2）：表2测量参数测量波长（nm）415比色皿光程（cm）1检测界面（见图2）：A-<fftil'll.Ah.0.'■ 'J[■Ofi]qi5.oom/1Ci.COJDa.koD.000/22-=TioCi.5KI0a.tn?a.ccnD.]QE/.33]moo0.035LI0L5/q电zroou0.0330033/55斬准样品3.OKIDa.(M2D.0420075/G6标淮样品■i.onoHOWD.W0/77标超曲amoo0L23LILt3□.□AB/*□/J.未知畔品DOZL-/二旦.Ab.[■Og]JtDSqi5.oom/J未抑1徉品1未知样品Ci.£03Da.tnaD.003-D.aiB<2未耐品Ci.54啦a.tnrD.COTTp■1.L.43.1 4.9&E8.4帝陰[ur]Als=EL*C)4呦*校E方法勰法ElD-o.DDL-3T11ElD.0IKH*□kH□.■as®图2啤酒中甲醛的检测界面上图标准曲线中，甲醛标准系列的质量依次为：0.0口g、0.5口g、1.0口g、2.0口g、3.0口g、4.0口g、8.0口g（25mL比色管中）。方式检出限：该方式检出限为0.8口g，能够知足《GB/T5009.49-2020发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方式（4.4甲醛）》的检测要求。参考标准：GB/T5009.49-2020发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方式（4.4甲醛）》案例3.食用植物油中过氧化值的测定前处置方式：周密称取约0.01g~1.0g试样（准确至刻度0.OOOlg）于10mL容量瓶内，加三氯甲烷+甲醇（7+3）混合溶剂溶解并稀释至刻度，混匀。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表3）：表3测量参数测量波长（nm）500比色皿光程（cm）1检测界面（见图3）：图3食用植物油中过氧化值的检测界面上图标准曲线中，铁标准系列的质量依次为：0.0口g、2.0口g、5.0口g、10.0口g、20.0口g、30.0口g、40.0口g（10mL比色管中）。方式检出限：该方式检出限为0.4口g,能够知足《GB/T5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方式（4.2过氧化值第二法比色法）》的检测要求。参考标准：《GB/T5009.37-2003食用植物油卫生标准的分析方式（4.2过氧化值第二法比色法）》

案例4.棉籽油中游离棉酚的测定前处置方式：称取l.OOOg（精准至O.OOlg）精制棉油，置于1OOmL具塞锥形瓶中，加入20.0mL丙酮（70%）,并加入玻璃珠3粒~5粒，在电动振荡器上振荡30min，然后在冰箱中冷藏，放置留宿。取此提取液之上清液过滤，滤液供测定用。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表4）：7-汕1[y3?000rn■标准样品||II7-汕1[y3?000rn■标准样品||II0.0®0D.CODO2讦堆艇5.00a.0339D.E33B3讦难晦标准样昌ID.nga.aejsD.L6354按t鮮品4标准样品£0.OD0.1L53D.US5标准样品■W.ODa.2LgoD.El506标准样品EO.ODD.42&47标苣样品120ODQS424D.B4Z4隹里谊H2W4nazs.qiid[Oj£]瓦甫it品-*口未知徉品:沖[d.. 冷亍378.ODm12三总定討- 9-：三总片茫： 三却忤詁 S班0.0518 0.D54Sa.asis D.D5S3f性-d二我XLe=M*ljC)+HDJt.t7iizr=機法KO0.(MKT1丄Edo.ros]Fi0.9999T-表4测量参数测量波长（nm）378比色皿光程（cm）1（石英）检测界面（见图4）：图4棉籽油中游离棉酚的检测界面上图标准曲线中，棉酚标准系列的质量依次为：0.0口g、5.0口g、10.0口g、20.0口g、40.0口g、80.0口g、120.0口g（10mL具塞比色管中）。方式检出限：该方式检出限为0.3口g（当测定试样1.000g时，最低检出浓度为0.06mg/100g），能够知足《GB/T5009.37-2003 （4.4.1紫外分光光度法）》的检测要求。参考标准：《GB/T5009.37-2003 （4.4.1紫外分光光度法）》案例5.油脂中没食子酸丙酯的测定前处置方式：称取10.00g（精准至0.001g）试样，用100mL石油醚溶解，移入250mL分液漏斗中，加入20mL乙酸铵溶液（16.7g/L）,振摇2min，静置分层，将水层放入125mL分液漏斗中（如乳化，连同乳化层一路放下），石油醚层再用20mL乙酸铵溶液重复提取两次，归并水层。石油醚层再用水振摇洗涤两次，每次15mL，归并水层，振摇，静置。将水层通过干燥滤纸滤入100mL容量瓶中，用少量水洗涤滤纸，加入2.5mL乙酸铵溶液（100g/L）,加水至刻度，摇匀。将此溶液用滤纸过滤，弃去20mL初滤液，搜集滤液供测定。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表5）：表5测量参数测量波长（nm）540比色皿光程（cm）1检测界面（见图5）：AMOD1LQ55-i<1:■ [-d定HZfflA0308<md㈡谟〕未知萍品按正方法 采屋法丘难样品-f餐用中）未知梓品】未知样品未知粕应未知样品-25.(KB5.LG135.KI3J5.milS.KIEE5.[叮液盧[RdXLe= +HD-0J3ffi33o.moss54000rn0OffiOAMOD1LQ55-i<1:■ [-d定HZfflA0308<md㈡谟〕未知萍品按正方法 采屋法丘难样品-f餐用中）未知梓品】未知样品未知粕应未知样品-25.(KB5.LG135.KI3J5.milS.KIEE5.[叮液盧[RdXLe= +HD-0J3ffi33o.moss54000rn0OffiOO.OffiL0.00600.OJB]标准样品2C0000标准样品标准样品021%licea.2931Q.2ZS3a.atTOP.CIL爷校正曲妹540DDro标准样品aodaamod2 标淮样品3 标准样品imOD a0545 D标准样品 51000 0.2762 0a.inri图5油脂中没食子酸丙酯的检测界面上图标准曲线中，没食子酸丙酯标准系列的质量依次为：O^g、50口g、100口g、200口g、300口g、400口g、500ug（25mL具塞比色管中）。方式检出限：该方式检出限为18.1ugPGo（测定试样相当于2g时，最低检出浓度为9.1mg/kg。），能够知足《GB/T5009.32-2003油脂中没食子酸丙酯（PG）的测定》的检测要求。参考标准：《GB/T5009.32-2003油脂中没食子酸丙酯（PG）的测定》案例6.果汁饮料中总磷的测定前处置方式：称取必然量经混合均匀的果汁样品5.00g〜10.00g于500mL凯氏烧瓶中，加入2粒〜3粒玻璃珠、10mL〜15mL硝酸（分析纯）、5mL硫酸（分析纯），浸泡约2h。先用微火加热，待猛烈反映停止后，加大火力。溶液开始变成棕色时，当即滴加硝酸（分析纯），直至溶液透明，颜色再也不变深为止。继续加热数分钟至浓白烟逸出，冷却，警惕加入20mL水，再加热至白烟逸出，冷却至室温。将溶液转移到50mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，备用。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表6）：表6测量参数ID5图6果汁饮料中总磷的检测界面上图标准曲线中，磷标准系列的质量依次为:0.0mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、ID5图6果汁饮料中总磷的检测界面上图标准曲线中，磷标准系列的质量依次为:0.0mg/L、2.0mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L、10.0mg/L（50mL容量瓶中）。方式检出限:校正曲结0.T3T0.5420.3TT0.151□HKIEiL0C63B7二二II'.*Iif、T，主A.I5波长y4JW.Won1L230.«KID2COOCi电COODO.OTD0]Tfin.361a.cooaLieasi23446.«KIDo.ssqa.ssq565E邛f6匸8.HMDLQOJQD0.TJ20a.7J2n删轉Qf未知样品顶目宮称沫Jghg/ljA.Ie:卄■MB.COar.LZ制疇品L7；*：=：“]1.5TTD0⑷n.]*]□.L49ill町-（便Bl中｝测量波长（nm）400比色皿光程（cm）1检测界面（见图6）:该方式检出限为0.1mg/L。能够知足《GB/T12143-2020饮料通用分析方式（9.5.3总磷）》的检测要求。参考标准：《GB/T12143-2020饮料通用分析方式（9.5.3总磷）》案例7.茶饮料中茶多酚的测定前处置方式：称取均匀透明的样液1g~5g（精准至O.OOlg）于25mL容量瓶中，加水4mL、酒石酸亚铁溶液5mL，充分摇匀，用pH7.5磷酸缓冲溶液定容至刻度。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表7）：图7图7茶饮料中茶多酚的检测界面表7测量参数测量波长（nm）540比色皿光程（cm）1检测界面（见图7）：上图中，A=0.9598,A=0.0092。12结果计算：x1000(A-A)x1.957x2xx10001 2式中：X——样品中茶多酚的含量（mg/kg）；A1——试液显色后的吸光度；A2——试液底色的吸光度；1.957——用10mm比色皿，当吸光度=0.50时，ImL茶汤中茶多酚的含量相当于1.957mg；K——稀释倍数；m——测按时称取试液的质量（g）。参考标准：《GB/T21733-2020茶饮料（6.2.1茶多酚）》案例8.白砂糖色值的测定前处置方式：称取样品lOO.Og于200mL烧杯中，加入pH7.00的三乙醇胺-盐酸缓冲溶液135mL,搅拌至完全溶解。倒入已预先铺好0.45Mm孔径微孔膜的过滤器中，在真空下抽滤，弃去最初50mL左右的滤液，搜集滤液应很多于50mL。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表8）：表8测量参数测量波长（nm）420比色皿光程（cm）5检测界面（见图8）：图8白砂糖色值的检测界面上图中，A=0.1755。结果计算：AC=x1000bxc式中：C――色值，单位为国际糖色值单位（IU）；A――在420nm波长测得样液的吸光度；b 比色皿光程，单位为厘米（cm）；c 样液浓度［由20°C的折光锤度乘上一系数（白砂糖0.9862，绵白糖0.9854）,然后查表求得］,单位为克每毫升（g/mL）。参考标准：《GB317-2006白砂糖（4.7色值的测定）》案例9.鸡精调味料中呈味核苷酸二钠的测定前处置方式：准确称取均匀的样品2g~4g（精准至O.OOOlg）,用少量0.01mol/L的盐酸溶液溶解并定容于100mL容量瓶中，混匀。将此溶液用滤纸过滤，弃去初滤液20mL。吸取滤液5.00mL于100mL容量瓶中，用0.01mol/L的盐酸溶液定容，混匀，此溶液即为测试液。检测仪器：T9型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）仪器条件（见表9）：表9测量参数测量波长（nm）250比色皿光程（cm）1（石英）检测界面（见图9）：图9鸡精调味料中呈味核苷酸二钠的检测界面上图中，A=0.6021。结果计算：Ax530x2000 “X= x100mx11950x1000式中：X——样品中呈味核苷酸二钠的含量（含7.25分子结晶水）（g/100g）；A——样

品在波长250nm处的吸光度；m——样品质量（g）； 530——含7.25分子结晶水呈味核苷酸二钠的平均分子量；2000——样品的稀释倍数；11950——呈味核苷酸二钠的平均摩尔吸光系数。参考标准：SB/T10371-2003鸡精调味料（5.2.4呈味核苷酸二钠）》

案例10.食物中二氧化硫的测定前处置方式:称取适量（5~10g）粉碎混匀后的样品，浸泡提取生成稳固络合物后过滤，取适量滤液与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫色络合物，利用T9通过与标准系列比较定量。检测仪器：北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。仪器条件:具体参数见表1。表1仪器参数紫外参数测量方法单波长法光度模式吸光度（Abs）吸收波长550nm比色皿光程10mm检测谱图（见图1）:标序号匚=flAb"1-□DL79B2B.B5253□33333未知样品未抑样品1二 标序号匚=flAb"1-□DL79B2B.B5253□33333未知样品未抑样品1二 i标堆样品o.aaao uuuliliD.DDDD2标准样品0.5000 H0LL9D.01193二氧仁陆口标淮萍品i.aaaa ojnoreD.D3794一氧㈱毘标宜样品s.aaaa 0.0707D.D7D75二氧伽5标难样品衍准韩品□L4D4Q.aaaa□.14D4D.2152&T二氧仁陆口标准样品e.aaaa 0.2767D.27B70二氢愀运标塞样品lo.aaao u337905379g二M化硫伯标准祥品20.0000 11703?0.703710二化解斬难韩品^a.aaaa l.38331.3B335TT.00m上面谱图显示R=0.9999。样品检出限：该方式检出限为0.001g/kg,能够知足GB5009.34-2003的检测要求。参考标准：GB5009.34-2003案例11.食物中的氰化物的检测前处置方式:迅速称取10g样品，加入乙酸锌溶液，酒石酸溶液进行水蒸气蒸馏，以氢氧化钠溶液作为吸收液。取适量蒸馏液遇酸产生氢氰酸,氢氰酸与苦味酸钠作用生成异氰紫酸钠,显红色,利用T9通过与标准系列比较定量。检测仪器：北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。仪器条件:具体参数见表1。表1仪器参数紫外参数测量方法单波长法光度模式吸光度（Abs）吸收波长638nm比色皿光程10mm检测谱图（见图1）:序号矣型浓度Ab5【宅］638.00mi1标准萍品序号矣型浓度Ab5【宅］638.00mi1标准萍品LILIOLIOLi.OiTHU.OULil2标准祥品LL50000.1246u.12-te.-£标.隹存吕标蛙样帛1UUUL150000.2716n0.27L6n护㈣5标准样品E00000.STLi'dU.5709序号类型浓匿Abs遍辰[y]630.00iui1未知萍品0.0419LI.00180.00182未和萍品0.04150.00170.00173未知萍品ir.D-LI.0015-0.00154丰知样品0D3S1□0CO70.00075CLD3TT□.0CO6n.onosE未即样帛005710.0C620.0062* 匚图1标准曲线谱图上面谱图显示R=0.9994。样品检出限：该方式知足GB5009.48-2003的检测要求。参考标准：GB5009.48-2003，GB5009.36-2003案例12.食物中的杂醇油的检测前处置方式:酒中杂醇油比较复杂，以异戊醇和异丁醇为代表，异戊醇和异丁醇在浓硫酸作用下脱水生成异戊烯和异丁烯，再与对二甲氨基苯甲醛作用显橙红色，与标准比较定量。检测仪器：北京普析通用仪器有限责任公司T9型紫外可见分光光度计。仪器条件:具体参数见表1。

表1仪器参数紫外参数测量方法单波长法光度模式吸光度（Abs）吸收波长520nm比色皿光程20mm检测谱图（见图1）:■5=AALsJ±>5■5=AALsJ±>5滅长[nifij530.LOm宗百紺标L0.QOM-0.00D27aOEQ7Q0D2标莊样品HOLM0.064511QB4SHQ04S常e样品0OEDO01BE3fl1BES0标程年品110303LL25400.254011254fl杯堆样品0EDOu3237u323703237标莊样品iiosm0.412A0.4L2Ao.q]£qAAtsJLb=:狀单[ng]53J.C0rmL幸知样品11rmitT詁000?fl00£57fl025700257加=f(c)未抑样品1-E未^样品O.DO^I0.0Z5B0.QZMo.azsa方程魁—次町、-r-kri+tbK-.-ni越法NO0.0ZG5K]S.Lt®F；0.999&上面普图显示R=0.9996，说明标曲线性良好，能够进一步进行定量测定。样品检出限：该方式检出限为lmg/kg，能够知足GB/T5009.48-2003的检测要求。参考标准：GB/T5009.48-2003案例13.食物中的组胺的检测前处置方式:称取适量（5~10g）粉碎混匀后的样品，用三氯乙酸浸泡后正戊醇提取，遇偶氮试剂显橙色，利用T9通过与标准系列比较定量。检测仪器：北京普析通用仪器有