免疫凝集试验

免疫凝集试验第一页，共五十三页，2022年，8月28日

教学目的掌握：直接凝集反应和间接凝集反应的试验原理、类型；抗球蛋白参与的试验原理熟悉：凝集反应的特点、应用第二页，共五十三页，2022年，8月28日第一节免疫凝集试验的基本原理凝集反应(agglutinationreaction)

是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗体（或抗原）发生特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。第三页，共五十三页，2022年，8月28日分两个阶段：①抗原抗体的特异性结合阶段②出现肉眼可见的凝集现象第一节免疫凝集试验的基本原理第四页，共五十三页，2022年，8月28日第五页，共五十三页，2022年，8月28日可见反应形成第六页，共五十三页，2022年，8月28日第二节直接免疫凝集试验直接凝集反应(directagglutination)细菌、螺旋体、红细胞等颗粒性抗原，在适当电解质参与下直接与相应抗体结合出现肉眼可见的凝集现象。第七页，共五十三页，2022年，8月28日一、玻片凝集试验

(slideagglutinationtest)YYY+第八页，共五十三页，2022年，8月28日第九页，共五十三页，2022年，8月28日红细胞悬液BA红细胞血型鉴定第十页，共五十三页，2022年，8月28日

方法评价:定性试验简便和快速敏感度低

临床应用:菌种鉴定血清学分型血型鉴定第十一页，共五十三页，2022年，8月28日

在试管内颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。二、试管凝集试验第十二页，共五十三页，2022年，8月28日试管凝集试验第十三页，共五十三页，2022年，8月28日

免疫血清12310

1：10阴性对照

………血清稀释度1:201:401:80步骤：1）加生理盐水0.5ml2）依次倍比稀释免疫血清

3）加相同浓度的细菌悬液0.5ml第十四页，共五十三页，2022年，8月28日

方法评价：半定量试验简便、快速敏感度低可有假阳性

临床应用：WidalreactionWeil-felixreactionWrighttest:布鲁菌病交叉配血试验第十五页，共五十三页，2022年，8月28日

第三节间接免疫凝集试验间接免疫凝集试验(indirect

agglutination)

将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。第十六页，共五十三页，2022年，8月28日正向间接免疫凝集试验反向间接免疫凝集试验间接免疫凝集抑制试验协同免疫凝集试验一、间接免疫凝集试验的类型第十七页，共五十三页，2022年，8月28日抗原致敏载体--检测抗体（一）正向间接免疫凝集试验第十八页，共五十三页，2022年，8月28日（一）正向间接免疫凝集试验

特点：简便快速，敏感性和特异性均高，成本低廉。应用：伤寒沙门菌的多糖抗原致敏绵羊红细胞测伤寒抗体。抗原抗体载体颗粒抗原致敏颗粒第十九页，共五十三页，2022年，8月28日（二）反向间接免疫凝集试验用抗体致敏载体----检测抗原第二十页，共五十三页，2022年，8月28日（二）反向间接免疫凝集试验应用：检测HbsAg、AFP等。特点：本方法快速、敏感性高、特异性强。

抗体抗原载体颗粒抗体致敏颗粒

第二十一页，共五十三页，2022年，8月28日（三）间接免疫凝集抑制试验用抗原致敏载体--检测抗原第二十二页，共五十三页，2022年，8月28日（三）间接免疫凝集抑制试验

+

说明标本中不存在相应抗原

—

说明标本中含有相应抗原第二十三页，共五十三页，2022年，8月28日

抗原抗原致敏颗粒A抗体抗原抗体不凝集复合物抗原致敏颗粒无抗原

B抗体游离抗体凝集

第二十四页，共五十三页，2022年，8月28日

结果判定试验结果+(凝集)--(不凝集)

检测结果--+第二十五页，共五十三页，2022年，8月28日SPA:SPA-IgGFc;SPA抗体致敏----测抗原反向间接凝集反应（四）协同免疫凝集试验第二十六页，共五十三页，2022年，8月28日（四）协同免疫凝集试验载体：金黄色葡萄球菌。优点：特异、灵敏、简便、快速。应用：可用于细菌、病毒、毒素及各种可溶性抗原的快速检测。第二十七页，共五十三页，2022年，8月28日第二十八页，共五十三页，2022年，8月28日

载体种类：常用的载体有动物或人红细胞、聚苯乙烯胶乳颗粒、明胶颗粒和活性炭等。第二十九页，共五十三页，2022年，8月28日二、间接免疫血凝试验第三十页，共五十三页，2022年，8月28日

（一）载体：是以红细胞作为载体的间接免疫凝集试验。常用的载体有：绵羊、家兔、鸡红细胞和O型人红细胞。二、间接免疫血凝试验第三十一页，共五十三页，2022年，8月28日（二）致敏

蛋白质致敏红细胞的方法有：

直接法和间接法。（三）血凝试验微量滴定板或试管标本倍比稀释（1：64）1滴

+0.5%致敏红细胞悬液1滴充分混匀室温1-2h第三十二页，共五十三页，2022年，8月28日血凝反应强度示意图第三十三页，共五十三页，2022年，8月28日二、间接免疫血凝试验载体：红细胞优点：红细胞来源广，价格低。该试验为最经典的抗原抗体反应之一。应用：常用于测定抗核抗体、类风湿因子等。

第三十四页，共五十三页，2022年，8月28日三、颗粒免疫凝集试验（一）胶乳颗粒凝集试验第三十五页，共五十三页，2022年，8月28日（一）胶乳颗粒凝集试验载体：聚苯乙烯胶乳优点：性能稳定，均一性好。缺点：敏感度不及血凝试验。应用：临床常用于检测抗溶血素0

和类风湿因子等。第三十六页，共五十三页，2022年，8月28日第三十七页，共五十三页，2022年，8月28日（二）明胶颗粒凝集试验（三）炭颗粒凝集试验（四）甲苯胺红颗粒凝集试验第三十八页，共五十三页，2022年，8月28日第四节

抗球蛋白红细胞免疫凝集试验

(antiglobulintest)抗球蛋白试验又称Coombs试验第三十九页，共五十三页，2022年，8月28日一、直接Coombs试验检测红细胞上抗体不完全抗体第四十页，共五十三页，2022年，8月28日一、直接Coombs试验

抗球蛋白抗体

抗膜抗原的抗体凝集结合在红细胞表面第四十一页，共五十三页，2022年，8月28日第四十二页，共五十三页，2022年，8月28日

可用玻片法定性，也可用试管法半定量分析。临床应用：新生儿溶血症、特发性自身免疫性贫血、自身免疫性溶血症、和医源性溶血性疾病等的检测。第四十三页，共五十三页，2022年，8月28日二、间接Coombs试验检测血清中的抗红细胞抗体第四十四页，共五十三页，2022年，8月28日二、间接Coombs试验检测血清中游离的不完全抗体标本中不完全抗体抗球蛋白抗体具有特异抗原的红细胞凝集

第四十五页，共五十三页，2022年，8月28日第四十六页，共五十三页，2022年，8月28日

临床应用：

1.检测母体Rh(D)抗体，以便尽早发现和避免新生儿溶血症发生。

2.输血前交叉配血或不相容输血后抗体检测。第四十七页，共五十三页，2022年，8月28日

第五节自身红细胞凝集试验

与一般间接免疫血凝试验不同之处在于反应中的红细胞是未经致敏的受检者新鲜红细胞。

第四十八页，共五十三页，2022年，8月28日第六节免疫凝集试验的临床应用一、直接免疫凝集试验的临床应用

1、玻片凝集试验:定性检测，如细菌菌种鉴定及分型、ABO血型鉴定等

2、试管凝集试验:半定量检测，如辅助诊断伤寒、副伤寒的肥达试验等。

第四十九页，共五十三页，2022年，8月28日

第六节免疫凝集试验的临床应用二、间接免疫凝集试验的临床应用（一）抗原的检测病原体可溶性抗原、各种蛋白质检测（二）抗体的检测检测细菌、病毒等产生的抗体、自身免疫病抗体、超敏反应抗体等第五十页，共五十三页，2022年，8