EUGMP附录5：免疫类兽用药品的生产-中文

原则在使用和评估免疫类兽药生产的质量体系时应充分考虑其生产的特殊情况。由于动物及其致病抗原种类繁多，造成免疫制品的种类很多，而生产量（需求）又很低，所以生产往往分阶段的。而且因为该类制品的生产工艺本身的性质，如采用培养工艺，无法最终灭菌等，应特别注意防止制品遭受污染及交叉污染。必须防止生产过程对外界环境的污染，尤其是生产过程中使用致病生物制剂。当生产过程中使用对人有致病性的生物制剂时，必须充分考虑对操作人员的保护措施。制品生产工艺的局限性，免疫制品本身的不确定性，质控检定并不能提供制品质量的充分信息，所有这些因素决定了质量保证体系在生产过程中的特殊地位和作用。对GMP和本附录所述各个方面的控制，无论如何强调都不会过分。特别重要的是，应严格地对GMP各方面（设备、厂房、产品等）监控所获得的数据进行评估，作出书面决定，采取必要措施并有相应记录。人员.所有在制品生产区域工作的人员（包括清洁和维护人员）都必须给予卫生和微生物方面的知识培训，以及与其工作相关的产品知识的培训。.负责人员则应获得下列某些或全部专业领域的培训：细菌学、生物学、生物统计学、化学、免疫学、药学、寄生虫学、药剂学、药理学、病毒学和兽药学，此外，他们还应具备环境保护方面的必要知识。.应采取措施防止生产人员被生产过程中所用的生物制剂所感染，若所用生物制剂对人体具有致病性，则应采取有效措施防止操作人员被制剂或实验动物感染。必要时，人员应接种疫苗和接受体检。.应采取必要措施防止操作人员将生物制剂携带出生产区。应根据生物制剂的种类，采取诸如要求员工在离开生产区前更衣和强制淋浴的措施。.对于免疫制品而言，应特别关注人员所致的污染或交叉污染的风险。应采取一系列的措施并制定确保不同生产步骤使用适当防护服的规程，才能防止人员对制品的污染。应采取一系列措施，制定规程，确保人员在采取适当的消除风险的预防措施后，方可从一个区域去另一个区域，此条件下，才能防止人员对制品的交叉污染。在同一天内，人员不得从活疫苗生产区或动物饲养区进入其他产品的生产区域。若此情况不可避免时，必须制定明确的脱污染规程，这类生产区的人员应更衣、换鞋，接着再淋浴（必要时）。若封闭生产区在过去的12小时内没有敞开的生物操作，人员进入该区域对密封的培养物和去污的表面进行检查，则可认为无交叉污染的风险，除非那种生物体是外来生物体。厂房.厂房设计应同时考虑对产品和环境的防污染控制。可采用隔离区、独立系统/洁净区或控制区来实现这一目标。.活生物体的处理应在隔离区进行。隔离区域的级别取决于该微生物的致病性和是否系特异生物体（参见90/219/EEC和90/220/EEC类其他法规文件）。.应在洁净区处理已灭活生物制剂。从组织中分离的非感染细胞株的操作，以及在某些情况下，培养基的除菌过滤，也应在洁净区进行。.产品或组分的暴露操作，如在后续生产步骤中不再灭菌处理，则须在B级区的层流保护（A级）下进行。.其他活生物体的处理（如：QC，研发和诊断试验等），若与生产操作处在同一厂房，应在隔离和分开的区域进行。隔离区域的级别取决于该微生物的致病性和是否为外来生物。在进行诊断操作时，都会引入高致病生物，因此隔离区的级别应足以消除风险。对于与生产处于相邻厂房的QC或其他操作，有时需考虑使用隔离系统。.隔离装置应易于消毒并满足以下要求：a.无直接对外的排风口b.保持负压，排风应通过高效过滤器，不得在本区域以外的区域使用循环回风。循环回风应安装有高效过滤器再次进行处理（通常，循环风通过正常供风管经高效过滤器进入该区域）。但如排风通过两道高效过滤，对第一道高效滤器连续监控其完整性，能在第一道滤器损坏后仍能保证排气的安全，则跨区域再循环利用回风也是允许的。c.用于处理外来生物制剂的生产区的排风必须通过两组相互串联的高效过滤处理，且不得使用循环回风。d.应有收集并消毒灭菌器、生物反应器等设备流出的污染液体（包括受污染的冷凝水）的系统。固体废物，包括动物尸体，应经适当的消毒、灭菌或焚化处理。被污染过滤器的拆除方式应保证安全。e.更衣室的设计和使用应采用气锁方式，并有适当的清洗和淋浴装置（必要时）。压差设计应确保工作区域和外界无空气对流，并且在外界穿的衣服不被污染。f.物流气锁系统的设计应确保工作区域和外界污染空气无对流，且在气锁中的物料不被污染。气锁的大小应考虑能有效地对通过该气锁物料的表面作去污染处理。应考虑气锁门之间的时间延迟装置，以使其中的去污过程有时间保证。g.在多数情况下，应设双扉灭菌柜式的隔离方式，以便废物在去污后移出，物料在灭菌后进入。.物流和人流通道应装备有互锁或其他适当装置以防止两边的门被同时打开。更衣室送风的洁净度应与生产区一致，并设排风系统，使其空气循环系统独立于生产区域并保持适当的换气次数。物料通道通常也应具备相同的排风装置，但是不具排风或只有送风的物流通道也可以接受的。.易引起污染的生产操作，如细胞维护，培养基配制，病毒培养等，应在分开独立的区域进行。对于动物和动物制品的处置操作应有适当的防护措施。.对消毒剂具耐受性的生物制剂（如，形成芽胞的菌）的处理，应使用专门独立的生产区域，直至该生物制剂被完全灭活。.除混合及随后的灌装外，一个区域只能同时生产处理一种生物制剂。.生产区的设计应方便在产品更换时，易采用经验证的方法进行清洁消毒。.生物制品的生产可在控制区中进行，先决条件是能在完全密闭经热力灭菌的设备中生产，且所有管道在连接后并断开前进行热力灭菌。如在层流罩下采用无菌操作技术，对已灭菌管道连接次数较少，且能保证不泄漏，则这种方式也是可以接受的。不同生物制品所用管道断开前脱污染的灭菌参数必须经过验证确定。若无意外的交叉污染的风险，则同一区域的不同生物发生器可以生产不同的生物制品。然而在一般情况下，通常要求使用隔离系统生产的制品，应做到专区专用。.生产用动物饲养的动物房应有适当的隔离和/或洁净区措施，且与其他动物房分开。使用致病生物制剂QC试验用动物房，应充分隔离。.只有经批准的人员方可进人生产区，必要时，应将简明的规程张贴在生产区出入口。.所有厂房相关的文件，应保存在工厂的主文件夹中。应采用平面图和文字描述的方式详细描述工厂厂址及建筑，每个房间的功能和使用条件，用于何种生物制品等都应有详细描述。此外，应标明人流和物流。应在文件中注明不同动物房所饲养动物的种类，或在现场作适当标志。应注明工厂周边的设施。在隔离区和/或洁净区域的平面图上应描述空调净化系统，标出送风及排风口、过滤器位置及其规格标准，每小时的换气次数和压差。还应标出压差表监控哪些地方的压差。设备.设备的设计和安装应符合产品生产的特定要求。在生产使用前，应对设备进行确认和验证，此后应进行定期维护和再验证。.必要时，设备应确保对所生产生物制品的一级隔离。若要求，设备的设计和建造方式，应便于有效进行去污染/灭菌操作。.用于生物制品一级隔离的密闭设备的设计和建造方式，应能防止任何形式的跑冒滴漏。呼吸气口应有措施确保充分隔离，如采用疏水性过滤器。物料的进出应采用可无菌的封闭的系统，若可能应在层流保护条件下进行。.必要时，设备在使用前应灭菌，最好采用高压蒸汽灭菌法。若设备的性质而无法采用蒸汽灭菌时，可采用其他灭菌方法。不能忽视对小设备，如台式离心机、水浴锅的灭菌。用于纯化、分离或浓缩的设备至少在更换生产产品前必须灭菌或消毒。应对设备灭菌方法的有效性和持续时间进行验证，以决定设备灭菌的周期。所有灭菌工艺都应验证。.设备的设计应避免不同生物体或产品间的混淆。管道、阀门和滤器及其功用，应有适当的标识。不同有机体或细胞的培养，已感染和未感染容器的培养应使用不同的培养箱。只有采取适当的密封，表面去污染、及容器分隔措施后，才允许培养箱内的有机体或细胞可多于一种。培养容器等必须单独标识。这类器具难于清洁和消毒，应予特别注意。用于生物制剂和产品的储存设备，其设计和使用应能避免任何差错。所有储存的物料都应有清晰明确的标识，并存放于防泄漏的容器中。细胞库和种子库应用专门的设备保存。.有些设备，例如要求温度控制的，应安装记录和/或报警装置。为避免设备故障，应建立并施设备预防性维护及记录数据趋势分析的系统。.冻干机的装载操作应在洁净/隔离区域中进行。冻干机的卸载操作会污染操作环境。因此，若使用单门冻干机，只有对该洁净区进行去污染处理后，才能进行下批生产（两批生产相同制品除外）。若使用双扉冻干机，且一侧门不开向洁净区，则应在每一程序完成后对冻干机进行灭菌。冻干机的灭菌要求参见上述第24条。若是分阶段性生产，则每一阶段生产后，应对冻干机灭菌。动物和动物房.在80/609/EEC法令中规定了对动物房，动物饲养和隔离检疫的总体要求。.动物房必须与其他生产厂房分开并要求设计恰当。.生产用动物的清洁卫生要求必须规定并监控记录。一些动物的试验使用应遵照特定的专论要求（如，特定的洁净动物要求专论）。.动物、生物制剂的使用和实验实施应有一套标识系统，以防止任何可能的混淆并控制潜在发生的危险。消毒-废物处理.对于免疫制品生产而言，消毒和/或废物和排污处理尤其重要。为防止对环境的污染，应认真考虑处理规程和设备，并应对他们进行验证。生产.因为产品的多样性，免疫类兽药生产往往包括很多步骤且生产过程存在多变性，因此，必须严格遵循经验证的操作规程，对各生产各个阶段的持续进行监控并进行中间控制。此外，应特别注意虑对原料、培养基和种子库使用的要求。原料.书面的质量标准应规定对原料的各种要求，这包括供应商、生产方法、产地来源、来源动物的品系，以及对原料的检测方法和要求。微生物监控尤其重要。.原料的检测结果必须符合标准。有些原料的检定需要较长的时间（如：SPF鸡胚的检定），在这种情况下，原料可以在检定结果出来前用于生产，但只有该原料的检定结果合格时，方可放行最终成品。.在评估一个原料的供货是否适用及质控检定的内容是否充分时，应特别考虑供应商的质量保证体系。.可能时，应采用热力灭菌法对原料进行灭菌，也可采用其他经过验证的方法，如辐射灭菌法。培养基.培养基对促进生长的能力应事先进行验证。.培养基灭菌最好的方法是在线热力灭菌。气体、培养基、酸、碱、消泡剂和其他引入无菌生物反应器中的物料均应事先灭菌。种^库和细胞库系统.为防止由于重复、多次传代所引起的性状变异，所有通过微生物培养、细胞或组织培养、或鸡胚和动物培养生产的免疫类兽药制品必须建立种子库和细胞库系统。.最终成品与种子或细胞库间的代次（倍增次数、传代次数）应与政府批准的注册文件一致。.种子库和细胞库必须按预定的质量标准进行充分的检定，并作外源污染物的检定。种子库和细胞库的建立、储存和使用应尽量避免污染或变异的风险。在种子库和细胞库建立过程中，操作人员不得在同一场所同时从事处理其他活的或具感染性物料（如病毒和细胞株）的活动。.种子库和细胞库的建立应在适当的环境中进行，以保护种子库/细胞库，操作人员及外部环境。.应有详细文件描述种子材料的来源、制备和储存。应提供种子和细胞的稳定性和复壮的证据。储存容器应密封、有醒目标签标识并保存在适当的温度条件下。应对储存环境进行监控。应建立库存和使用台帐，每一支使用情况都应有说明。.只有经批准的人员，才能处置种子库和细胞库，处置过程应在负责人的监督下进行。不同的种子库和细胞库的保存方式应能避免混淆。建议将同一种子库或细胞库分别在不同地方保存，避免由于一次意外丢失所有的种子。操作原则.在生产过程中应尽量避免液滴、气雾和泡沫的形成和产生。易出现这类现象的离心和混合工艺应在隔离区或隔离/洁净区进行，以防活生物体的扩散。.意外泄漏，尤其是活生物体的泄漏，必须迅速并安全地处理。每种生物体的去污方法都应经过验证。同种细菌不同株系或十分相似的病毒，只需验证去污染方法对其中一种株系的有效性，除非有理由相信不同株系间的抗污染性存在显著差异。.物料转移操作，如无菌培养基、培养物或产品，必须使用预先灭菌的密闭容器。若不可能，则这类操作须在层流保护条件下进行。.应在适当的环境下向生物反应器和其他罐中添加培养基或培养物，以确保不引入污染物。在添加培养物时，应仔细检查，确保管道连接正确无误。.若必要，例如在同一区域有两个以上的发酵罐，取样和加料口、接头（连接后、通料前、和断开前）必须用蒸汽灭菌。在其他情况下，进出料口的化学消毒和在层流环境保护下的连接可以被接受。.设备、玻璃器皿、产品容器和其他类似类材料的外表面，应采用经验证的方法（见上47条）进行消毒后，方可离开隔离区。应特别注意生产批文件，只有GMP所必须的最少数量的文件才能进出隔离区。若文件被明显污染，如被溢出液或气雾污染，或生产的是外来生物体，则文件必须经过消毒设备彻底消毒后，方可开隔离区，或将信息通过拍照、传真方式传出隔离区。.液态或固态废物，如收获后的鸡蛋残骸、一次性培养瓶、废弃培养物或生物制剂，应经灭菌或消毒后移出隔离区。有些情况下，可采用其他方法，如用密封的容器或通过管道将它们移出。.必须严格控制进入生产区的物料和文件，只有与该批生产相关的物料和文件才能进入。应对进入和离开生产区的物料进行物料平衡检查，确保生产区无物料的遗留物。.热稳定性好的物料应通过双扉蒸汽灭菌柜或干热灭菌器进入洁净区或洁净/隔离区，非热稳定性物料应通过双门互锁的气锁，在气锁室经消毒后进入洁净区或洁净/隔离区。在其他地方灭菌的物料，如有双层包装，采取一定措施后，也可通过气锁进入生产区。.培养期间，应采取措施避免污染和混淆。应有培养箱的清洁和消毒规程。在培养箱中的容器应有正确无误的标识/标签。.除混合和随后的灌装操作外（或使用全封闭系统时），同一时间，同一生产区只能生产一