原发性肝癌中KRAS及BRAF基因突变检测的临床意义-2700字符

原发性肝癌中KRAS及BRAF基因突变检测的临床意义摘要：目的：探讨分析KRAS及BRAF基因突变检测对原发性肝癌的意义。方法：回顾性分析2017年1月-2019年10月我院收治的353例原发性肝癌患者，根据病理临床证实是否存在肝外转移，分为转移组175例，非转移组178例，采集所有患者的血液，检测KRAS、BRAF基因以及突变情况，分析两组KRAS、BRAF基因的突变率，以及突变的情况。结果：转移组KRAS基因突变率明显比非转移组高(PV0.05),两组BRAF基因均未出现突变(P>0.05)。结论：有肝外转移的患者KRAS存在突变，且突变率较高，而转移和非转移均未出现BRAF基因突变，因此可根据KRAS基因突变来判断原发性肝癌是否存在转移，其对原发性肝癌是否存在转移中具有临床价值。关键词：原发性肝癌；BRAF基因；KRAS基因；基因突变；转移；非转移原发性肝癌位于恶性肿瘤的前5位，随着环境污染，社会老龄化，食品平安等问题的，我国发生原发性肝癌的人数也越来越高山。而且原发性肝癌早期没有病症，一旦发现不适即为癌症中晚期，并且常会出现肝外转移的情况，严重影响患者的生命⑵。而对于及时诊断是否存在转移，以及对症治疗方法是临床重点关注的问题。本研究探讨分析KRAS及BRAF基因突变检测对原发性肝癌的意义。1、一般资料基本资料回顾性分析2017年1月-2019年10月我院收治的353例原发性肝癌患者，根据病理临床证实是否存在肝外转移，分为转移组175例，非转移组178例。转移组89例男性,86例女性,年龄40-80岁,平均年龄(62.38+10.73)岁；非转移组91例男性，87例女性，年龄40-例岁,平均年龄(62.91+10.27)岁，31例脑转移，68例肺转移，55例淋巴转移，12例骨转移，9例广泛转移。两组患者在性别、年龄均可比(P>0.05),所有患者或者家属均已经签署了知情同意书,并且也得到了伦理委员会批准，纳入标准：均配合本次研究，符合原发性肝癌的诊断标准，经过病理以及临床证实是否存在转移。排除标准：非原发性肝癌，器官功能障碍，其它恶性肿瘤引发的肝癌，精神性疾病，无法配合本次研究，老年痴呆史，凝血、造血功能障碍。研究方法采集所有患者空腹血液，加入到抗凝管中，使用天根试剂盒提取血液DNA,方法为：在血液中加入1-2.5倍体积的细胞裂解液，离心后去上清，加入200ul的GS,震荡混匀后加入20ulproteinaseK,混匀后加200ul缓冲液GB,混匀后,56度放lOmin,澄清后加入200ul无水乙醇，会出现絮状沉淀，加入吸附柱进行离心，去上清，分别使用缓冲液GD和漂洗液PW进行清洗离心，将吸附柱放入新的EP管中进行洗脱，收集DNA,并对DNA的浓度进行测定。使用KRAS、BRAF基因突变检测试剂盒，检测KRAS、BRAF基因的突变，PCR方法检测：95℃5min进行1个循环；95℃25s,64℃20s,72℃20s进行15个循环；93℃25s,60℃35s,72℃20s进行31个循环。并且设立阳性和阴性对照，并设定平行，检测KRAS、BRAF基因的突变情况，并进行分析。观察指标分析两组KRAS、BRAF基因的突变率，以及突变的情况。统计学处理试验结果用n%表示，x2检验，PV0.05为试验有统计学差异。.结果两组KRAS、BRAF基因的突变率比拟转移组KRAS基因突变率明显比非转移组高(P<0.05),两组BRAF基因均未出现突变(P>0.05),见表1。表1两组KRAS、BRAF基因的突变率比拟(n%)2.2突变的情况组别nBRAF基因突变率(n,%)KRAS基因的突变率(n,%)转移组1750(0%)43(24.57%)非转移组1780(0%)0(0%)X2——49.8039P——0.000043例转移组患者存在KRAS基因突变，其中16例(37.21%)G12D,6例(13.95%)G12V,9例(20.93%)Q61H,5例(11.63%)G12S,7例(16.28%)A146To.讨论原发性肝癌(HCC)是一种常见的恶性肿瘤，主要指由肝脏自身产生的肿瘤,原发性肝癌主要包括：肝癌和胆管细胞癌⑶。而癌症会使癌基因激活，并且抑癌基因缺失或者失活。RAS是原癌基因，RAS基因家族中有KRAS、HRAS、NRAS三种基因与癌症相关，BRAF是RAF的一种亚型⑷。KRAS基因和BRAF基因都是RAS/RAF/MEK/ERK/MAPK激酶信号通路的一员，可以调节对生长信号的细胞反应⑸。本次研究，通过对KRAS、BRAF基因的突变进行检测，发现转移组KRAS基因突变率明显比非转移组高，两组BRAF基因均未出现突变，其中KRAS基因突变中有16例G12D,6例G12V,9例Q61H,5例G12S,7例A146T。证明可以用KRAS突变对肝癌进行评估，而有研究证明KRAS突变会导致EGFR的药物失效，进而通过鉴定KRAS基因突变对肝癌的治疗提供有效的数据。而BRAF基因突变没有发现与肝癌的相关性。综上所述，有肝外转移的患者KRAS存在突变，且突变率较高，而转移和非转移均未出现BRAF基因突变，因此可根据KRAS基因突变来判断原发性肝癌是否存在转移，其对原发性肝癌是否存在转移中具有临床价值。参考文献[1]郭宇美，骆子义，黄华.原发性肝癌中KRAS及BRAF基因突变检测及临床意义分析[J].新发传染病电子杂志,2018,3(1):43-46.[2]陈伊，韦常宏，宁淑芳，等.结直肠癌组织KRAS、BRAF基因突变情况及其临床意义[J].山东医药,2017,57(16):77-80.[引唐华容，杨世峰，胡晓，等.原发小细胞肺癌中BRAF/KRAS以及PIK3CA突变的基因特征及临床特征[J].中华放射肿瘤学杂志,2018,27(9):805-809.[4]沙如拉，李文新.结直肠癌K