SE技术在畜禽产品残留的应用

报告人：单吉浩SPE技术在畜禽产品残留分析中的应用1/18/20231

食品与农产品：残留分析要求

高选择性—降低或消除基质干扰高灵敏度—痕量物质可靠的结果：定量准确度和化合物确认—重现性，稳定性和动态范围—样品基质中低浓度目标物质的准确定量—按照法规要求进行确认方法稳定性—复杂样品基质，减少样品净化操作1/18/20232残留分析:样品前处理的重要性

是影响实验成败的决定性步骤

—占样品分析时间的比例最大(70-80%)–样品预处理所用时间远多于色谱分离的时间

—占分析消耗总成本的比重最大

–消耗大量的溶剂及其它化学品

—对分析结果的重现性及准确性影响最大的环节—影响实验结果好坏的最重要因素(回收率,%RSD）1/18/20233样品前处理的通用方法

高速离心取上清液过滤、超滤选择性沉淀衍生反应液-液萃取

固相提取(SolidPhaseExtract,SPE)1/18/20234为什么要用SPE?

样品浓缩–提高灵敏度

样品净化–提高灵敏度–延长系统不间断开机时间–延长色谱柱寿命

比液－液萃取更快,节省溶剂可自动化批量处理重现性好1/18/20235不断革新的SPE技术

1977–率先推出业界第一个硅胶基质固相提取技术的商品化产品：Sep-Pak

1996–推出第一个水－浸润性聚合物基质SPE吸附剂(Oasis®HLB)–快速通用性反相SPE方法学1997–用于Oasis®HLB的先进的新型方法学，可以获得更干净的本底(2D优化方法学)1999–推出混合机理吸附剂(Oasis®MCX和MAX)，从而可以对碱性和酸性化合物进行高选择性和高灵敏度的提取–Oasis®96孔提取板设计获得R&D100大奖1/18/20236不断革新的SPE技术2002–Waters最新革新SPE技术首次使得洗脱体积低至25µL无需挥发与重现配制，洗脱后直接进样即可是小体积样品的理想提取工具灵敏度可以提高25x

2004–推出用于保留强碱(如季铵盐)和强酸(如磺酸盐)的WCX和WAX吸附剂1/18/20237SPE小柱的种类

根据吸附剂的划分

–正相

Silica/Alumina(A,B,N)/Florisil/NH2/CN–反相

C18/tC18/C8/tC2/Porapak/RDX/NH2/CN–离子交换

SCX、MCX、PCX、WCX、MAX1/18/20238传统(C18)SPE吸附剂的问题对极性化合物—保留不足

–药物（农药）及代谢产物难以同时提取对碱性化合物回收不足—强硅羟基相互作用

–碱性样品回收率低小柱跑干—不吸附

–操作过程需仔细控制回收率低，重现性差是其主问题。1/18/20239理想的样品处理方法除去干扰物在很宽的极性范围内，对酸性、碱性及中性化合物均有可重现的高回收率很容易实现自动化，对大量样品进行高通量处理容易使用并且耐受性好快速并且最终的成本低1/18/202310PEP(Polymerenhancedpolymer)：：极性性提高了了的共聚聚物具有反相相SPE的最佳佳性质pH：0-14，810m2/g亲水性单单体：亲亲水”—使填料料具有水水可浸润润性质—允许溶溶剂跑干干而不会会损失回回收率和和重现性性“亲脂”—提供对对分析物物的反相相保留能能力1/4/202311C18与PEP小柱柱相比：—溶剂跑干对回回收率的影响响(普鲁卡因胺、、醋氨酚酚、雷尼替替丁、心心得安、、多虑平)1/4/202312C18与PEP小柱柱相比：—溶剂跑干对回回收率的影响响1/4/202313PEP可取取代C18的优势–吸附容量量更大是C18的3到10倍，常用规规格1mL/30mg（C18：100mg）–操作更简简便小柱干涸不不影响回收收率–方法更通通用适合性质各各异的各种种物质的提提取1/4/202314PEP可取取代C18的优势–开发方法更更容易聚合物基质质，无硅醇醇基影响–对极性物物质的提取取回收率更更高药物(农药)及代谢产物物同时提高高1/4/202315样品前处理理：适适于HPLC分析的的通用SPE方法—此通用方方法适于多多种样品基基质的绝大大多数被测测物。—当分析碱碱性化合物物时，不要要使用高有有机含量的的水溶液进进行清洗，，因为PEP吸附剂剂中不含硅硅醇基。—首先使用用通用方法法提取。若若需进一步步降低干扰扰，可使用用优化方法法1/4/202316样品前处理理：适适于HPLC分析的的通用SPE方法1/4/202317pH与化化合合物物反反相相保保留留1/4/202318血清清中中的的四四环环素素1/4/202319血清清中中四四环环素素的的提提取取结结果果比比较较SPE化化合合物物%回回收收率率%RSDPEP二二甲甲胺胺四四环环素素94.81.4四环环素素1040.55C18二甲甲胺胺四四环环素素52.82.82四环环素素68.42.446次次实实验验结结果果：：加加标标水水平平：：2.5µg/mL1/4/202320四环环素素类类残残留留分分析析（日本本政政府府食食品品安安全全公公告告））2003年年８８月月宣宣布布有有关关来来自自中中国国的的虾虾中中的的四四环环素素类类药药物物监监测测（（TetracyclineintheshrimpfromChina））–如如果果为为养养殖殖虾虾，，政政府府要要求求必必须须监监测测四四环环素素类类药药物物残残留留(mandatory)–如如果果为为非非养养殖殖虾虾，，政政府府推推荐荐监监测测残残留留(voluntary)–需需HPLC、荧荧光光检检测测器器法规规更更新新：：蔬蔬菜菜和和蜂蜂蜜蜜加加工工的的食食品品必必须须监监测测残残留留–法法规规以以前前不不要要求求检检测测农农药药残残留留，，但但因因在在加加工工食食品品和和蜂蜂蜜蜜中中发发现现了了许许多多农农药药，，故故现现在在要要求求检检测测1/4/202321食用用肉肉中中的的四四环环素素1/4/202322牛奶中的四环环素1/4/202323四环素—食品品分析的结果果化合物牛牛肉猪猪肉牛牛奶奶牛牛奶0.5µg/g0.5µg/g25µg/L50µg/L4土霉素96.2(5.7)103(5.0)70.7(3.5)67.7(5.8)四环素素91.4(5.5)99.8(6.1)73.7(7.3)68.5(5.1)金金霉素80.6(6.8)83.4(6.1)76.7(2.9)67.3(1.8）结果以%回回收率表示,括号内数字字为%RSD1/4/202324反相－－离子子交换换双重重机理理吸附附剂MCX：阳阳离子子交换换—反反相吸吸附剂剂—用于于碱性性物质质提取取MAX：阴阴离子子交换换—反反相吸吸附剂剂—用于于酸性性物质质提取取WCX：弱弱阳离离子交交换——反相相吸附附剂—用于于强碱碱性物物质(如季铵铵盐类类)提取WAX：弱弱阴离离子交交换——反相相吸附附剂—用于于强酸酸性物物质提提取1/4/202325适合于于碱性性药物物提取取的MCX小小柱1/4/202326双机理吸吸附剂：：碱性化化合物的的保留1/4/202327混合机理理:阳离离子交换换与反相相的保留留1/4/202328MCXSPE通用方方法1/4/202329常见兽药残留留的SPE推荐方法法名称规规格克仑特罗MCX/SCX/PCX沙丁胺醇MCX/SCX/PCX磺胺C18/PEP/AluminaB氯霉素C18/PEP/Silica氟喹诺酮PEP/C18硝基咪唑类药药物PEP/C18己烯雌酚PEP/C18四环素PEP/C18莱克多巴胺AluminaA/MCX1/4/202330SPE在残留留分析方面的的成功实例硝基咪唑类药药物：JAOACInternational,2003,86(3),505-509四环素:JchromatographyA,2003,987,227-233动物组织中盐盐酸克伦特罗罗的SPE与GC/MS分析液相色谱通讯讯，37，13-141/4/202331SPE在残留留分析方面的的成功实例莱克多巴胺：：Analyticachim,2003,483(1-2)P137-145氯霉素：动物源食品中中氯霉素的液液相色谱-质质谱测定,分分析测试学报报，2002，21增刊刊，185-186磺胺：动物组织中磺磺胺类药物残残留量检测方方法---HPLC法1/4/202332磺胺药物样品品前处理—SPE法HLB鸡组织中磺胺胺类药物残留留量检验方法法－高效液相相色谱紫外检检测法–广州出入境境检验检疫局局食品检验处处B(碱性氧化化铝小柱)羊肉组织中七七种磺胺残留留的测定–《Waters液相色色谱通讯》35期，2002年动物源食品中中磺胺类药物物残留的检测测方法－高效效液相色谱法法–农业部３８８号文C18高效液相色谱谱法测定肉类类奶粉中四种种磺胺药物残残留量的方法法研究–《Waters液液相色色谱通通讯》》15期，，1990年动物源源食品品中磺磺胺二二甲嘧嘧啶残残留检检测方方法－－高效效液相相色谱谱法–农业业部３３８号号文；；1/4/202333典型成成功开开发：：动物组组织中中磺胺胺药物物的残残留检检测方方法——HPLC法—NY5029-2001农农业业部““无公公害畜畜产品品例行行监测测”专专用方方法艾杰尔尔科技技———磺胺胺专用用柱1/4/202334动物源源食品品中磺磺胺类类药物物残留留检测测方法法－－高效效液相相色谱谱法简介农业部部畜禽禽产品品质量量监督督检验验测试试中心心1/4/202335主要内内容一、适适用范范围二、原原理三、试试剂和和材料料四、仪仪器设设备五、检检验步步骤1/4/2023361、、适适用用范范围围本方方法法用用于于测测定定动动物物可可食食性性组组织织中中磺磺胺胺间间甲甲氧氧嘧嘧啶啶（（SMM）、、磺磺胺胺二二甲甲基基嘧嘧啶啶（（SM2）、、磺磺胺胺甲甲噁噁唑唑（（SMZ）、、磺磺胺胺二二甲甲氧氧嘧嘧啶啶（（SDM）、、磺磺胺胺喹喹噁噁啉啉（（SQ）单单个个或或混混合合物物的的残残留留量量。。1/4/2023372．．原原理理组织织经经乙乙腈腈提提取取后后，，其其上上清清液液加加入入正正己己烷烷进进行行液液液液分分配配，，取取下下层层溶溶液液加加入入正正丙丙醇醇减减压压干干燥燥，，残残留留物物用用乙乙腈腈溶溶解解，，过过Sep-Pak碱碱性性氧氧化化铝铝柱柱,洗洗脱脱，，干干燥燥后后定定容容，，用用高高效效液液相相色色谱谱仪仪进进行行检检测测。。1/4/2023383、试剂剂和材料料除特别注注明外，，所用试试剂均为为分析纯纯；水为为超纯水水。3.1磺磺胺类类药物标标准品（（SMM、SDM、SM2、SMZ和SQ），（（Sigma公公司，含含量不少少于98.9%）3.2甲甲醇醇色色谱纯3.3乙乙腈腈色色谱纯3.4正正已已烷3.5正正丙丙醇3.6无无水水硫酸钠钠1/4/2023393、试剂剂和材料料3.7碱碱性性氧化铝铝SPE柱（6毫升，，500毫克））3.8磺磺胺胺类药物物标准储储备液（（1mg/mL）分分别精精密称取取上述磺磺胺类药药物标准准品各50mg，甲醇醇溶解并并转移到到50mL容量量瓶，定定容，摇摇匀。置置-20℃以下下冰箱中中保存,有效期期3个月月。3.9磺磺胺类类药物标标准工作作液取取磺胺胺类药物物标准储储备液用用流动相相稀释成成浓度为为0.05,0.1,0.2,0.5,1.0，，2.0µg/mL的的标准工工作液。。置2℃℃-8℃℃冰箱中中保存，，有效期期1周。1/4/2023404、仪器器设备4.1高高效液液相色谱谱仪（配配紫外检检测器））4.2离离心机机4.13固相相萃取装装置（配配考克阀阀）4.4分分析析天平精精度度0.0001g4.5天天平平精精度0.01g4.6旋旋转转蒸发仪仪4.7振振荡荡器4.8匀匀浆浆机4.9涡涡动动混合器器4.10分分液漏斗斗50mL4.11梨梨形瓶100mL4.12离离心管50mL4.13微微孔滤膜膜0.45µm1/4/2023415检检验验步骤骤5.1试料的的制备备5.1.1取绞碎碎后的的供试试样品品,作为供供试试试料。。5.1.2取绞碎碎后的的空白白样品品,作为空空白试试料（（阴性性对照照）。。5.1.3取绞碎碎后的的空白白样品品5g,添加5µg/mL的工工作液液0.1mL，，作为为空白白添加加试料料（阳阳性对对照））。1/4/2023425检检验验步骤骤5.2提取取和纯纯化5.2.1组织样样品5.00g———5g无水水硫酸酸钠+25mL乙乙腈———均均质———振振荡10min———以3000r/min的速速度离离心5min———重重复两两次———并并两次次的上上清液液———加入入正己己烷30mL———振振荡10min———离心心5min———取下下层液液体于于100mL梨形形瓶中中。1/4/2023435检检验验步骤骤5.2.1（续续）加正丙丙醇5mL，50℃℃下减减压干干燥至至干，，残留留物用用95%乙乙腈3ml溶解解，过氧化化铝B柱。。用5mL乙腈腈-水水（95+5））过柱柱，不不收集集，再再用10mL乙乙腈腈-水水（70+30）洗洗脱。。洗脱液液中加加入5mL正丙丙醇，，50℃下下减压压干燥燥至干干，残残留物物用2.0mL流动动相溶溶解，，溶液用用滤膜膜过滤滤，作作为试试样溶溶液，，供高高效液液相色色谱分分析。。1/4/2023445检检验验步骤骤5.3色色谱条条件5.3.1色谱柱柱：C18柱，250×4.6mm（i.d.），粒粒径5µm，或相相当者者；5.3.2流动相相：乙乙腈-甲醇醇-水水-乙乙酸(2+2+9+0.2)；5.3.3流速：：1mL／min；5.3.4检测波波长：：270nm；5.3.5进样量量：20µµL。1/4/2023455检验验步骤5.5测测定法5.5.1取试样样溶液和0.05µµg/mL的对照溶溶液，作单单点校准，，以峰面积积计算。对对照溶液及及试样溶液液中磺胺类类药物的响响应值均应应在仪器检检测的线性性范围之内内，试样溶溶液测定过过程中应参参插注入对对照溶液，，以便准确确定量。5.5.2试剂剂空白试验验除不加试料料外，采用用完全相同同的测定步步骤进行平平行操作。。5.5.3结果果计算和表表述按下式计算算供试组织织中磺胺类类药物的残残留量：Xi=(CSVA)/(ASm)1/4/2023465检验验步骤5.6结结果判定5.6.1线性性范围在0.02μg/mL～1.0μg/mL范围围考察线性性，计算回回归方程，，其相关系系数≥0.995。。5.6.2准确度本方法在100µg/kg添添加浓度水水平上的回回收率范围围为50%～110%。5.6.3允许许相对偏差差允许相对偏偏差≤26%。1/4/202347SPE在盐盐酸克仑特特罗（瘦肉肉精）残残留检测中中的应用样品前处理理：SPE法–参见：中中华人民共共和国农业业部行业标标准：饲料料中盐酸克克仑特罗的的测定参见：中华华人民共和和国国家标标准：动物物组织中盐盐酸克仑特特罗的测定定1/4/202348SPE在盐酸酸克仑特罗（（瘦肉精）残残留检测中中的应用中华人民共和和国农业行业业标准NY/T468——2005动物组织中盐盐酸克伦特罗罗的测定－气气相色谱-质质谱法NY/XQ421-2003“动物尿液中中盐酸克伦特特罗（瘦肉精精）残留的检检测气相色色谱-质谱（（GC-MS）方法”——起草单位位：农业部畜畜禽产品质量量监督检验测测试中心1/4/202349动物组织中盐盐酸克伦特罗罗的测定－气气相色谱-质质谱法——原理对样品在碱化化的条件下用用乙酸乙酯提提取，合并提提取液后，利利用盐酸克伦伦特罗易溶于于酸性溶液的的特点，用稀稀盐酸反萃取取，萃取的样样液pH调至至5.2后用SCX固相相萃取小柱净净化，分离的药物物残留经过双双三甲基硅烷烷三氟乙酰胺胺（BSTFA）衍生后后用带有质量量选择检测器器的气相色谱谱仪测定。1/4/202350动物组织中盐盐酸克伦特罗罗的测定－气气相色谱-质质谱法提取(5±0.05)g动物物肝组织———加入15mL乙酸乙酯酯——加入3mL10.0%碳酸钠钠溶液——均均质——离心心2min———上层有机机溶剂——在在残渣中再次次提取后———并合——加加入5mL0.10mol/L的盐盐酸——离心心2min———重复萃取取——合并下下层溶液———2.5mol/L氢氧氧化钠溶液调调节pH至5.2。1/4/202351动物组织中盐盐酸克伦特罗罗的测定－气气相色谱-质质谱法净化SCX小柱———5mL甲甲醇——5mL水———5mL30mmol/L盐酸活化———萃取液上上样——5mL水———5mL甲甲醇——淋洗洗柱子——抽抽干SCX小小柱——5mL4%氨化甲醇醇溶液——洗洗脱。衍生化在50℃水浴浴——氮气吹吹干——100L甲苯———100LBSTFA——80℃衍生lh——冷却———加入0.3mL甲苯苯——气相色色谱-质谱分分析。1/4/202352动物组织中盐盐酸克伦特罗罗的测定－气气相色谱-质质谱法GC/MS测测定参数设定定色谱柱：HP-5MS5%苯基甲甲基聚硅氧烷烷，30m××0.25mm（内径）），0.25m（膜厚）；；进样口：220℃；进样方式：不不分流；进样体积：1L；柱温：70℃℃（保持0.6min））,以25℃/min升温至200℃（保保持6min），以25℃/min升温至280℃（保持持5min））；载气：氦气，，流速：0.9mL/min（恒流流）；GC/MS传传输线温度度：280℃℃；溶剂延迟：8min；EM电压：高高于调谐电压压200V；；离子源(EI)温度：200℃；四极杆温度：：160℃；；选择离子监测测:(m/z)86，212，262，2771/4/202353动物物尿尿液液中中盐盐酸酸克克伦伦特特罗罗的的测测定定－－气气相相色色谱谱-质质谱谱法法净化化依次次用用甲甲醇醇5mL、、水水5mL和和30mmol/L盐盐酸酸5mL润润洗洗固固相相萃萃取取小小柱柱，，将将上上述述备备用用液液过过柱柱，，依依次次用用水水5mL、、甲甲醇醇5mL淋淋洗洗，，真真空空抽抽干干，，用用4%氨氨化化甲甲醇醇5mL洗洗脱脱SCX小小柱柱，，收收集集洗洗脱脱液液于于具具塞塞玻玻璃璃试试管管中中，，50℃℃下下氮氮气气吹吹干干。。在在样样液液过过柱柱和和洗洗脱脱过过程程中中流流速速控控制制在在1mL/min左左右右。。1/4/202354残留留分分析析SPE前前处处理理应应用用小小结结———以以常常规规方方法法为为起起点点———如如需需要要，，根根据据样样品品性性质质与与基基质质进进行行方方法法优优化化———对对于于碱碱性性或或酸酸性性组组分分采采用用双双机机理理吸吸附附剂剂1/4/202355SPE小小柱柱的的典典型型应应用用实实例例磺胺胺：：Sep-PakAl2O3(B),12cc/2g,WAT054260–动动物物源源食食品品中中磺磺胺胺类类药药物物残残留留物物检检测测方方法法———HPLC金霉霉素素：：Sep-PakC18或者者tC18–金金霉霉素素残残留留的的HPLC测定定伊维维菌菌素素：：Sep-PakC18或者者tC18–伊伊维维菌菌素素残残留留的的HPLC测定定法法1/4/202356SPE小小柱柱的的典典型型应应用用实实例例恩诺沙星星，环丙丙沙星：：Sep-PaktC18(含碳量≥≥16%)–动物性性食品中中恩诺沙沙星和环环丙沙星星残留物物检测方方法——HPLC噁喹酸，，氟甲喹喹：Sep-PaktC18(含碳量≥≥16%)–动物性性食品中中噁喹酸酸和氟甲甲喹残留留物检测测方法——HPLC1/4/202357国家科技技攻关计计划课题题畜禽产品品质量安安全关键键控制技技术系列列标准研研究(课题编编号：2002BA906A75)农业部畜畜禽产品品质量监监督检验验测试中中心1/4/202358国家科技技攻关计计划子课课题三种兽药药使用规规范验证证和四种兽兽药残留留检测方方法研究究(子课题题编号：：2002BA906A37-01)农业部畜畜禽产品品质量监监督检验验测试中中心2005年11月10日1/4/20235920种种兽药药残留留检测测方法法的技技术要要点22.1猪猪组织织中已已烯雌雌酚、、已烷烷雌酚酚、已已二烯烯雌酚酚残留留检测测方法法研究究（气气相色色谱-质谱谱法））在碱化化的条条件下下用乙酸乙乙酯提提取猪组织织样品品中己己烯雌雌酚、、已二二烯雌雌酚和和已烷烷雌酚酚残留留，然然后通通过碳酸钠钠溶液液和硅硅胶柱柱对洗洗脱物物质进进行净净化处理。。净化化后的的样品品平均均分两两份进进行吹吹干后后衍生，，BSTFA衍衍生后进行行气相相色谱谱－质质谱分分析。。检测限限:0.25g/kg-0.5g/kg；；回收收率:60.9%～～85.6%批内变变异系系数≤≤15%，，批间间变异异系数数≤20%1/4/20236022.1猪猪组织织中已已烯雌雌酚、、已烷烷雌酚酚、已已二烯烯雌酚酚残留留检测测方法法研究究（气气相色色谱-质谱谱法））已二烯烯雌酚酚标准准溶液液经衍衍生化化后选选择离离子模模式下下的总总离子子流图图猪肝添添加样样品总总离子子流图图(已已二烯烯雌酚酚添加加浓度度为4μg/kg)1/4/2023612.2猪猪组织中雌雌二醇残留留检测方法法研究（液液相色谱-质谱法））试样匀浆后后,加入氘代雌二醇醇内标,经正己烷脱脂脂,经HLB柱、硅硅胶柱、氨氨基柱净化化后，于液液质联用仪仪上进行测定定。同位素素内标定量量。检测限:1g/kg；；回收率:97.1%～106.1%批内变异系系数≤15%，批间间变异系数数≤20%1/4/2023622.2猪猪组织中雌雌二醇残留留检测方法法研究（液液相色谱-质谱法））猪肝添加雌雌二醇色谱谱图(从上至下添添加浓度依依次为0µg/kg,5µg/kg,2µg/kg,1µg/kg)1/4/2023632.3猪猪尿液中丙丙酸睾酮残残留检测方方法（液相相色谱-质质谱法）猪尿样品经经固相萃取小小柱净化后后，供液相相色谱-质质谱仪测定。丙酸睾酮检检测限:1.0g/kg丙酸睾酮回回收率:62.2%～73.5%批内变异系系数≤15%，批间间变异系数数≤20%丙酸睾酮标标准溶液质质谱图空白猪尿中中添加50μg/L的丙酸睾睾酮标准溶溶液后的SIR色谱谱图1/4/2023642.5猪组组织及猪尿尿中克伦特特罗、沙丁丁胺醇残留留检测方法法（气相色色谱-质谱谱法）试样用高氯酸溶液匀浆、、超声加热热提取，用用异丙醇+乙乙酸乙酯(40+60)萃取，有机机相浓缩，，经弱阳离子交交换柱进行行分离，用乙醇+浓氨氨水(98+2)溶液洗脱，，洗脱液浓浓缩，经N,O双三三甲基硅烷烷三氟乙酰酰胺(BSTFA)衍生后于气质联联用仪上进进行测定。。外标法定定量。检测限:1g/kg；；回收率:60.37%～93.86%批内变异系系数≤15%，批间间变异系数数≤20%1/4/2023652.5猪猪组织及猪猪尿中克伦伦特罗、沙沙丁胺醇残残留检测方方法（气相相色谱-质质谱法）猪肝加标样样色谱图(2g/kg)1/4/2023662.6猪猪组组织及猪猪尿中莱莱克多巴巴胺残留留检测方方法（气气相色谱谱-质谱谱法）样品经过过高氯酸水解提取取，用乙酸乙酯酯和异丙丙醇（4：6））再次提取取后过SCX阳阳离子小小柱净化，用用合适的的溶剂选选择洗脱脱后,氮氮气吹吹干，供供高效液液相色谱谱定量（（质谱检检测器））测定。。外标法法定量。。检测限:1g/kg；回收收率:66.47%～～86.21%批内变异异系数≤≤15%，批间间变异系系数≤20%1/4/2023672.6猪猪组组织及猪猪尿中莱莱克多巴巴胺残留留检测方方法（气气相色谱谱-质谱谱法）300g/L标标准溶液液质谱图图肉添加10g/kg质谱图1/4/2023682.7猪猪组织织中氯霉霉素残留留检测方方法（液液相色谱谱-质谱谱法）样品经过过乙腈-水水（1+1）溶液、乙酸乙乙酯重复提取取，用正己烷除去样品品中的脂脂肪等杂杂质，C18固相萃取取柱进一步净净化，N2气吹干后后供高效效液相色色谱定量量（质谱谱检测器器）测定定。外标标法定量量。检测限:0.1g/kg；回收收率:67.4%～87.0%批内变异异系数≤≤15%，批间间变异系系数≤20%1g/L标标准溶液液图肉添加1g/kg图1/4/2023692.7猪猪组织织中氯霉霉素残留留检测方方法（液液相色谱谱-质谱谱法）1/4/2023702.8猪组组织中粘杆菌菌素残留检测测方法（液相相色谱法）待测动物组织织中残留的粘粘杆菌素经三氯乙酸-甲甲醇溶液提取，C18固相萃取柱净化后，与荧光衍生化试剂反应，用用高效液相色色谱（荧光检检测器）进行行检测，外标标法定量。检测限:75g/kg；定定量限:150g/kg,回回收率:80.1%～108.5%批内变异系数数≤15%，，批间变异系系数≤20%a：空白样品品图b：添添加0.05μg/g粘粘杆菌素样品品图1/4/2023712.9猪组组织中磺胺类类药物残留检检测方法（液液相色谱法））组织样品经乙腈提取后，在上上清液中加入入正己烷进行液液分配配，取下层溶溶液加入正丙醇减压干燥，残残留物用乙酸乙酯溶解，过氨基鍵合小柱柱,以乙酸乙乙醇溶液洗脱脱，氮气吹干干后用流动相相溶解，定容容后用高效液液相色谱仪进进行检测。检测限:3～～5g/kg；回回收率:65.1%～92.1%批内变异系数数≤15%，，批间变异系系数≤20%1/4/2023722.9猪猪组织织中磺磺胺类类药物物残留留检测测方法法（液液相色色谱法法）磺胺类类药物物标准准品色色谱图图猪肝添添加磺磺胺类类药物物色谱谱图1/4/2023732.10猪猪组组织中中乙酰酰甲喹喹残留留检测测方法法（液液相色色谱法法）动物组组织匀匀浆用用双蒸水水、三三氯乙乙酸提取，，经C18固相小小柱净化，，80%甲醇醇洗脱，，收集集洗脱脱液，，作为为试样样溶液液供高高效液液相色色谱（（配紫紫外检检测器器）分分析，，外标标法定定量检测限限:50g/kg回回收率率:60.1%～83.1%批内变变异系系数≤≤15%，，批间间变异异系数数≤20%空白猪猪肉组组织试试样色色谱图图猪肉试试样中中添加加乙酰酰甲喹喹色谱谱图1/4/2023742.11动动物物组织织（猪猪、鸡鸡）中中硝基基咪唑唑类药药物多多残留留检测测方法法（液液相色色谱-质谱谱法））待测动动物组组织中中残留留的硝硝基咪咪唑类类药物物用乙酸乙乙酯提取，，液/液萃萃取分分离,固相萃萃取柱柱净化化后，通通过高高效液液相色色谱/质谱谱联用用的大气压压化学学电离离正离离子检测（APCI+））方式,进行行选择择离子子(SIR)检测测，外外标法法定量量，实实现了了三种种硝基基咪唑唑类化化合物物的多多残留留确证证。。。检测限限:0.5-1.0g/kg；；回收收率:55.31%～88.66%批内变变异系系数≤≤15%，，批间间变异异系数数≤20%猪肝加加标样样选择择离子子检测测色谱谱图.(a)洛硝哒哒唑(M/Z=201,2.0µµg/kg);(b)甲硝唑唑（M/Z=172,1.0µg/kg）;(c)地美硝硝唑（（M/Z=142,1.0µg/kg）1/4/2023752.12动动物物（羊羊、猪猪）组组织中中伊维维菌素素类药药物多多残留留检测测方法法（液液相色色谱法法）待测测动动物物组组织织中中残残留留的的伊伊维维菌菌素素类类药药物物经经乙腈腈提取取，，碱性性氧氧化化铝铝固相相萃萃取取柱柱净净化化后后，，与与荧光光衍衍生生化化试试剂剂反应应，，用用高高效效液液相相色色谱谱（（荧荧光光检检测测器器））,进进行行检检测测，，外外标标法法定定量量，，实实现现了了三三种种阿阿维维菌菌素素类类药药物物的的多多残残留留分分析析。。检测测限限:1.0g/kg；