妊娠及新生儿的生物化学检验

妊娠和新生儿的生物化学检验1掌握:妊娠与相关疾病常用化学指标〔HCG、E3、Prog、AFP〕的检测；胎儿肺成熟度评价熟悉:正常妊娠；临床生化检验工程在妊娠相关疾病诊治中的应用；产前与新生儿筛查的生物化学检验了解：正常妊娠母体和胎儿的生物化学改变；胎儿纤维连接蛋白、抑制素A、妊娠相关血浆蛋白Ａ测定本章教学要求：23妊娠：是胚胎及胎儿在母体内发育成长的复杂过程新生儿期：自分娩出结扎脐带起至出生后满28天第一节概述4一、正常妊娠〔一〕妊娠、胚胎和胎儿发育从末次月经第一天算起，妊娠期通常持续280天〔40周〕，正常分娩发生在37-42周。全程分为3个时期：早期妊娠：0-13周中期妊娠：14-27周晚期妊娠：28周以后5678〔二〕胎盘是胎儿与母体之间物质交换的重要器官，是胚胎与母体组织的结合体，由胎儿局部羊膜、叶状绒毛与母体局部底蜕膜构成。具有多种功能。91.胎盘的功能

胎盘具有物质交换、代谢、分泌激素、防御以及合成功能，是维持胎儿在子宫内营养发育的重要器官。

10不转运大多数蛋白质；甲状腺素；母体IgM、IgA；母体和胎儿红细胞限制性被动运输游离甾体类化合物；甾体类硫酸盐；游离脂肪酸被动运输分子量≤5kD、脂溶性物质；氧、二氧化碳；钠、氯、尿素、乙醇等跨细胞膜主动运输葡萄糖；多种氨基酸；Ca2+受体介导的细胞摄取母体IgG、胰岛素、低密度脂蛋白胎盘运输方式112.胎盘激素妊娠期雌激素75%～95%来源于胎儿-胎盘复合体蛋白类激素hCG、胎盘催乳素〔placentallactogen,PL〕等类固醇激素孕酮〔Prog〕、雌酮〔E1〕、雌二醇〔E2〕和雌三醇〔E3〕等12〔三〕羊水羊水：胚胎发育期间羊膜腔内的液体。为胎儿在子宫内生活的环境，由胎盘、胎儿肾脏、肺、皮肤及羊膜等器官产生，体积和化学组成被控制在一个动态的范围内，其功能是保护胎儿和减少胎动引起的母体不适感。131.羊水的来源早期：由母体血清通过胎膜进入羊膜腔的透析液，类似于细胞外液。中期：胎儿尿可能为羊水重要来源。钠离子浓度和渗透压降低，尿素、肌酐和尿酸浓度增加，羊水外表活性蛋白质增加。2.羊水量随妊娠时间而不同10周——30ml20周——40ml38周——1000ml足月——800ml143.羊水颜色和透明度妊娠早期(earlytrimesterofpregnancy)：无色或淡黄色、清晰、透明；妊娠晚期(latetrimesterofpregnancy)：乳白色、清晰或稍混浊。

16二、母体及胎儿的生物化学改变1、血液学变化2、物质代谢变化3、肾功能变化4、内分泌变化〔一〕母体适应17〔二〕胎儿功能发育妊娠10周内的人胚称为胚胎，自11周称胎儿，是生长成熟的时期。胚胎和胎儿功能发育主要表现在以下几个方面1、肺功能：羊水泡沫试验、L/S等2、肝功能：结合胆红素3、肾功能：葡萄糖、肌酐4、血红蛋白18第二节妊娠相关的生物化学检验一、妊娠与相关疾病〔一〕人绒毛膜促性腺激素〔HCG〕定义：妇女受精卵移行至子宫内着床后形成胚胎，由胎盘滋养层细胞分泌产生，具有促性腺发育的一种糖蛋白激素。结构:两个肽链：α多肽链〔分子量1.7万〕β多肽链〔分子量3.2万〕HCG特有19检测方法1、定性检查〔1〕血凝抑制试验和胶乳凝集抑制试验〔2〕尿液HCG定性试验：胶体金法2、定量检查：时间分辨免疫荧光分析、ELISA、化学发光或电化学发光免疫方法20单克隆抗体胶体金标记免疫层析定性检查A:吸水材料，试纸条上端B：吸水材料，试纸条下端C：金标区〔金标记鼠IgG、金标记鼠抗人β-HCG单抗〕T：测试区羊抗人HCG多抗R：质控区羊抗鼠IgG抗体21质控线：羊抗鼠IgG抗体+金标记鼠IgG紫红色反响线：金标记鼠抗人β-HCG单抗+人尿液HCG抗原〔有/无〕+羊抗人HCG多抗双抗体夹心法23参考区间HCG定性：非孕期阴性，妊娠后阳性定量：<6U/L临床意义1.早期妊娠诊断血清中HCG略高于尿中，用ELISA和胶体金标记法，在妊娠后7～10天即能测出。24252.滋养层细胞肿瘤诊断及预后判断：葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮癌、男性睾丸畸胎瘤等，尿HCG↑，且较正常妊娠妇女明显增高。3.协助诊断异位妊娠及流产〔1〕异位妊娠〔宫外孕〕约50%尿HCG阳性如果48小时内血清HCG升高程度<60%，那么异位妊娠的可能性大，宫外孕血清孕酮水平较低〔2〕不全流产HCG持续阳性完全流产HCG由阳性转阴性26〔二〕胎盘催乳素〔PL〕胎盘催乳素〔PL〕也称绒毛膜促生长催乳素〔hCS〕。hPL也是由胎盘合体滋养层细胞产生与分泌，分泌后大局部进入绒毛间歇和胎盘血窦，很少出现于胎体内。妊娠4-5周左右可在血清中检测出PL，15-30周迅速上升，34周达顶峰，在分娩前胎盘分泌PL量达1-2g/24h，是所有人类激素中分泌量最高的激素，产后迅速下降，产后2小时即不能检测出来。27检测方法ELISA、CLIA、ECLIA参考区间未妊娠妇女：妊娠22周：妊娠30周：妊娠42周：3-8mg/L28临床意义1、妊娠期PL异常增高：妊娠期糖尿病、母子血型不合2、PL减低：胎盘功能低下、妊娠期高血压、子娴前期、子娴、异位妊娠、葡萄胎、先兆流产、胎儿宫内发育缓慢、胎儿宫内窒息等3、葡萄胎患者血中PL减低，HCG明显升高，因此HCG/PL比值比正常妊娠高100倍。29〔三〕雌三醇〔E3〕E3是雌二醇的代谢产物，约占总量90%的E3来自胎儿肾上腺合成的硫酸脱氢表雄酮〔DHEAS〕，其余局部来自胎儿的E2和母体的DHEAS。胎盘合成的E3通过母体血液循环在肝脏代谢，和硫酸或葡萄醛酸结合形成结合性E3，再经尿排出。母体血液中的E3以结合和未结合〔uE3〕两种形式存在。胎儿产生的是uE3。30检测方法ELISA、CLIA、ECLIA、时间荧光免疫分析参考区间未妊娠妇女：妊娠21周：妊娠35周：妊娠41-42周：羊水：，为危险值31临床意义对于处于月经初潮到更年期这段时间的未妊娠女性，E2是重要的雌激素，对于妊娠女性，重要角色是E3。1、动态监测母体血清及尿E3，如发现持续下降，提示胎盘功能不良2、3天内E3水平平均下降30%-50%预示可能对胎儿产生危害3、母体血清或尿E3超过参考区间的上限提示双胞胎的可能4、母体患有高血压、肾疾病、糖尿病时，E3测定值对胎儿死亡具有较好的预测价值。32〔四〕孕酮〔Prog〕在妊娠期，孕酮〔黄体酮〕主要由胎盘利用母体的胆固醇合成，从妊娠36天起胎盘即能产生足够黄体酮，伴随孕周增加其水平逐渐升高，可一直保持到临产前才稍降，待胎盘娩出后迅速降至10-20ng/ml。雌激素和黄体酮在妊娠过程中维持子宫内膜的正常形态和功能、充足血供并为分娩作准备。33检测方法ELISA、CLIA、ECLIA等参考区间未妊娠妇女：0-15mg/L妊娠5周：妊娠32周：妊娠37周：最顶峰150mg/L34临床意义1、降低：子娴、先兆流产、胎儿发育缓慢、死胎、异位妊娠2、升高：双胎和多胎妊娠、妊娠期高血压、妊娠期糖尿病、子痫前期、葡萄胎、原发性高血压3、在妊娠中后期，测定血清黄体酮可以反映胎盘功能，如妊娠期血清黄体酮持续下降，那么预示早产，但意义不如E3。35〔五〕甲胎蛋白〔AFP〕AFP最早由卵黄囊少量合成，在卵黄囊退化后由胎儿肝脏大量合成，肠和肾也能合成微量AFP。母体血清中AFP约在妊娠10周时可检测到，妊娠26周左右可达，然后母体浓度缓慢下降直至分娩。分娩后母体血清AFP迅速下降至2ug/L以下。AFP进入胎儿血液魂环后，通过尿液进入羊水，并经胎儿内吞及进入母体循环得以去除。36检测方法ELISA、CLIA、ECLIA等参考区间母体血清AFP结果一般用同孕周正常妊娠中位值的倍数〔MoM〕来表示。AFPMoM：37临床意义1、母体血清AFP升高预示胎儿神经管畸形的危险性增加2、母体血清AFP降低预示唐氏综合征的危险性增加3、如果在妊娠15-20周母体血清AFP及羊水AFP均>2MoM，且羊水胆碱酯酶活性升高，那么应考虑脊柱裂、无脑儿、腹裂、脐膨出的可能。38二、母体健康评价1、妊娠前：血常规、尿常规、ABO血型鉴定、Rh血型鉴定、红细胞抗体筛查、肝肾功能、人乳头状瘤病毒〔HPV〕检测、风疹病毒效价、快速血浆反响素试验、脱落细胞涂片、淋病奈瑟菌培养、梅毒螺旋体检查、衣原体检测、乙肝五项、HIV、HCV检测、禁忌药物的筛查。2、补充叶酸以减少胎儿神经管病变的风险。3、妊娠24-28周，进行葡萄糖耐量试验来筛查妊娠性糖尿病。4、24-30周筛查妊娠妇女早产的风险。39三、胎儿健康评价包括胎儿成熟度评价和胎儿先天性缺陷的筛查。胎儿肺成熟度〔FLM〕评价是目前最主要的胎儿成熟度评价方式，能帮助判断围生期胎儿能否获得最正确生存、对分娩时机选择，降低新生儿特发性呼吸窘迫综合征〔IRDS〕，提高生存率具有重要意义。40卵磷脂／鞘磷脂比值〔L／S〕泡沫稳定性实验〔FSI〕荧光偏振(FPA)薄层小体计数羊水双饱和磷脂酰胆碱〔DSPC〕测定磷脂酰甘油(PG)测定胎儿肺成熟度评价试验卵磷脂〔L〕与鞘磷脂〔S〕是肺泡外表活性物质的主要成分，可维持肺的稳定性，在胎儿出生后能保障生命所必需的气体交换。薄层层析色谱法〔TLC〕

〔一〕卵磷脂/鞘磷脂比值〔L/S〕检测方法参考区间L/S比值≥

L/S＜1.49:表示肺脏不成熟，IRDS(特发性呼吸窘迫综合征)严重；L/S为～1.99:表示肺脏发育不够成熟，有IRDS可能；L/S为～3.4:表示肺脏已成熟；L/S为～3.9:表示肺脏肯定成熟；L/S＞4.0:表示过熟儿。临床意义羊水中的肺泡外表活性物质饱和磷脂是既亲水又亲脂的两性界面物质，具有一定的外表张力，其在乙醇中振荡后形成的泡沫可维持数小时，并形成稳定泡沫层。而羊水中的蛋白质、胆盐、游离脂肪酸及不饱和磷脂也能形成泡沫，但乙醇能消除这些物质所形成的泡沫。〔二〕泡沫稳定指数〔FSI〕44检测方法在固定体积的未稀释羊水中，逐渐增加乙醇量并混合，在羊水能够支持泡沫稳定的情况下，记录所需乙醇的最大体积。参考区间为肺成熟

45〔三〕荧光偏振〔FPA〕FPA是目前最普遍使用的定量方法。在羊水中参加荧光染料NBD-卵磷脂〔NBD-PC〕时，NBD-PC可渗入磷脂形成的微粒和聚集体中，具有外表活性的磷脂含量越高，荧光偏振值越低。荧光染料PC-16不仅可与脂质微粒结合，也可与白蛋白结合，由于羊水中白蛋白含量相对恒定，同样可作为参照，用含磷脂和白蛋白的校正液进行校正，报告单位为磷脂/白蛋白〔mg/g〕46检测方法TDxFLMII法、NBD-PC法参考区间正常妊娠末：磷脂/白蛋白>70mg/gNBD-PC:<260mP荧光偏振值＜260mP提示肺明显成熟，＞290mP提示肺不成熟。羊水中血液污染>0.5%，会降低P值结果。以<230mP为明显成熟、＞290mP为不成熟。磷脂