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文档简介

水中总大肠菌群的测定主讲人：王福红动物性食品微生物检验

能力目标：

掌握生活饮用水总大肠菌群的测定方法掌握水源水总大肠菌群的测定方法判定水被大肠菌群污染的程度和水的卫生质量水中总大肠菌群的测定检验依据：GB/T5750.12-2006方法：多管发酵法实验内容1乳糖发酵试验4证实试验5结果分析与报告1培养基制备2乳糖发酵试验3分离培养实验器材水样生活饮用水、水源水培养基乳糖蛋白胨培养液、伊红美兰培养基试剂革兰氏染色液、稀释剂等实验器材其他无菌工作台、酒精灯、稀释液、灭菌吸管、灭菌试管、小倒管、试管架、接种环、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、载玻片、香柏油、平皿、天平、电炉等培养基制备乳糖发酵管双料管单料管伊红美兰平板放置小倒管并排气一、乳糖发酵（初发酵）试验自来水直接接种10mL水样于双料培养基，每个水样共接种5管水源水加大稀释度，每个稀释度接种5管，每个水样共接种15管

各10ml1ml各1ml水样1:10稀释水各1ml乳糖发酵试验一、乳糖发酵（初发酵）试验培养36℃士l℃24h士2h观察产酸产气情况不产酸产气产酸产气第二天二、分离培养产酸产气的发酵管分别转种EMB平板（分区划线）36℃士l℃24h士2h第三天三、证实试验（复发酵试验）观察EMB平板菌落形态深紫黑色、具有金属光泽的菌落紫黑色、不带或略带金属光泽的菌落淡紫红色、中心较深的菌落一半进行涂片、染色、镜检另一半进行接种（证实试验用）三、证实试验（复发酵试验）只有染色镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌才接种乳糖蛋白胨管36℃士l℃24h士2h第四天四、结果报告观察乳糖发酵管产气情况产酸产气者，即证实有总大肠菌群存在查MPN检索表根据证实为总大肠菌群阳性的管数报告每100ml水样中的总大肠菌群最可能数（MPN）四、结果报告5管法结果见表1，15管法结果见表2表1用5份10mL水样时各种阳性和阴性结果组合时的最可能数（MPN)5个10mL管中阳性管数最可能数（MPN）

0<2.212.225.139.2416.05>16.0表2总大肠菌群MPN检索表(部分）（总接种量55.5mL，其中5份10mL水样，5份1mL水样，5份0.1mL水样）接种量/mL总大肠菌群/(MPN/100mL)接种量/mL总大肠菌群/(MPN/100mL)10ml管1ml管0.1ml管10ml管1ml管0.1ml管000<21002001210140024102600351038四、结果报告稀释样品查表后所得结果应乘稀释倍数表2采用3个稀释度（10mL、1mL和0.1mL),每个稀释度5管表2内所列接种量如改用100mL、10mL和1mL时，表内数字应相应降低10倍；如改为1mL、0.1mL和0.0

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