抗酸染色课件

抗酸染色临床微生物学教研室抗酸染色临床微生物学教研室1分枝杆菌的细胞壁内含大量脂质（主要是分枝菌酸）包围在肽聚糖的外面，一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使其着色。分枝菌酸与染料结合后，就很难被酸性脱色剂脱色，故名抗酸染色。抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物，用3%盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为兰色。实验原理：分枝杆菌的细胞壁内含大量脂质（主要是分枝菌酸）包围在肽聚糖的2

通过抗酸染色,可以将抗酸性细菌和其它非抗酸性细菌染上不同的颜色，可用于抗酸菌的形态学鉴定。通过抗酸染色,可以将抗酸性细菌和其它3目的要求掌握结核分枝杆菌形态、培养特性和常用鉴定方法。掌握抗酸染色法。目的要求掌握结核分枝杆菌形态、培养特性和常用鉴定方法。4仪器和材料菌种：卡介苗.培养基:改良罗氏培养基.试剂:抗酸染色液其他:痰标本、显微镜、酒精灯等.仪器和材料菌种：卡介苗.5结核杆菌的培养特点

培养基：罗-琴氏（LowenateinJensen）培养基主要成分：蛋黄、甘油、天门冬素、马铃薯淀粉、无机盐、孔雀绿。蛋黄含脂质生长因子，能刺激生长，孔雀绿可抑制杂菌生长结核杆菌的培养特点6生长特点：缓慢；固体培养基：2-4周可见菌落，为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，不透明，乳白色或米黄色。如结节状、菜花状菌落。

液体培养基：菌膜。生长特点：缓慢；7实验方法

一、涂片标本的制备涂片干燥固定（充分研磨，防止细菌成团）实验方法一、涂片标本的制备8二、染色

初染（5%石炭酸复红）

脱色（3%盐酸酒精）

复染（碱性美蓝）

吸水纸吸干油镜镜检初染：用木夹夹持玻片，滴加石炭酸复红，以盖满标本为度，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，如此反复数次，染3-5分钟，若染液蒸发减少，可再加染液。3～5min冷却后水冲1min水冲30秒左右水冲脱色：用3%盐酸酒精脱色，至无红色染液流下为止二、染色9三、油镜观察结果抗酸菌：红色（+）非抗酸菌和背景：蓝色（—）初染脱色复染初染脱色复染三、油镜观察结果抗酸菌：红色（+）初染脱色复染初染脱色复染10抗酸染色课件11抗酸染色课件12报告“—”：仔细观察至少300个视野未发现抗酸菌.“±”：100—300个视野内发现1-2条抗酸菌(全部涂膜镜检3遍).“﹢”：100个视野内发现3-9条抗酸菌(全部涂膜镜检1遍).“2﹢”：10个视野内发现1-9条抗酸菌.“3﹢”：每个视野内发现1-9条抗酸菌.“4﹢”：每个视野内发现9条以上的抗酸菌.报告“—”：仔细观察至少300个视野未发现抗酸菌.13注意事项1涂片时要充分研磨，固定温度要合适；2染色过程中染色时间要掌握好；3加热过程中不能让液体沸腾，冲洗时要等玻片冷却后冲洗，避免玻片炸裂。4掌握好脱色的时间和程度；注意事项1涂片时要充分研磨，固定温度要合14抗酸染色临床微生物学教研室抗酸染色临床微生物学教研室15分枝杆菌的细胞壁内含大量脂质（主要是分枝菌酸）包围在肽聚糖的外面，一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使其着色。分枝菌酸与染料结合后，就很难被酸性脱色剂脱色，故名抗酸染色。抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物，用3%盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为兰色。实验原理：分枝杆菌的细胞壁内含大量脂质（主要是分枝菌酸）包围在肽聚糖的16

通过抗酸染色,可以将抗酸性细菌和其它非抗酸性细菌染上不同的颜色，可用于抗酸菌的形态学鉴定。通过抗酸染色,可以将抗酸性细菌和其它17目的要求掌握结核分枝杆菌形态、培养特性和常用鉴定方法。掌握抗酸染色法。目的要求掌握结核分枝杆菌形态、培养特性和常用鉴定方法。18仪器和材料菌种：卡介苗.培养基:改良罗氏培养基.试剂:抗酸染色液其他:痰标本、显微镜、酒精灯等.仪器和材料菌种：卡介苗.19结核杆菌的培养特点

培养基：罗-琴氏（LowenateinJensen）培养基主要成分：蛋黄、甘油、天门冬素、马铃薯淀粉、无机盐、孔雀绿。蛋黄含脂质生长因子，能刺激生长，孔雀绿可抑制杂菌生长结核杆菌的培养特点20生长特点：缓慢；固体培养基：2-4周可见菌落，为粗糙型，表面干燥呈颗粒状，不透明，乳白色或米黄色。如结节状、菜花状菌落。

液体培养基：菌膜。生长特点：缓慢；21实验方法

一、涂片标本的制备涂片干燥固定（充分研磨，防止细菌成团）实验方法一、涂片标本的制备22二、染色

初染（5%石炭酸复红）

脱色（3%盐酸酒精）

复染（碱性美蓝）

吸水纸吸干油镜镜检初染：用木夹夹持玻片，滴加石炭酸复红，以盖满标本为度，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，如此反复数次，染3-5分钟，若染液蒸发减少，可再加染液。3～5min冷却后水冲1min水冲30秒左右水冲脱色：用3%盐酸酒精脱色，至无红色染液流下为止二、染色23三、油镜观察结果抗酸菌：红色（+）非抗酸菌和背景：蓝色（—）初染脱色复染初染脱色复染三、油镜观察结果抗酸菌：红色（+）初染脱色复染初染脱色复染24抗酸染色课件25抗酸染色课件26报告“—”：仔细观察至少300个视野未发现抗酸菌.“±”：100—300个视野内发现1-2条抗酸菌(全部涂膜镜检3遍).“﹢”：100个视野内发现3-9条抗酸菌(全部涂膜镜检1遍).“2﹢”：10个视野内发现1-9条抗酸菌.“3﹢”：每个视野内发现1-9条抗酸菌.“4﹢”：每个视野内发现9条以上的抗酸菌.报告“—”：仔细观