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文档简介
第十六章细胞死亡与细胞衰老一、判断题1.细胞凋亡时,核小体间DNA断裂直接由Caspase切割产生。()2.细胞质膜破损、内容物释放以及细胞引起周围组织出现炎症等的细胞死亡形式就是细胞凋亡。()3.抑制细胞凋亡,可以增大小鼠体积。()4.细胞凋亡过程中,DNA被选择性地切割形成DNA梯带,而非完全降解。()5.对多细胞生物而言,细胞凋亡有助于个体正常发育。()6.蛙发育过程中尾巴的退化是通过细胞自噬实现的。()7.没有Caspase的参与,细胞就不会凋亡。()8.Bcl-2是一个抑癌基因。()9.在很多动物细胞中,使用Caspase抑制剂或将Caspase敲除后,细胞虽然可以出现凋亡,但已经不是程序性死亡形式了。()10.细胞坏死也有可能是程序性死亡形式。()11.细胞接受凋亡刺激信号后,线粒体除释放Cytc外,还会释放其他物质。()12.细胞自噬就是同类细胞“吃掉”同类细胞。()13.通常细胞内寿命较短的蛋白质通过泛素-蛋白酶体系统降解,而寿命较长的蛋白质则通过溶酶体降解。()14.植物细胞以及酵母细胞不发生程序性细胞死亡。()15.正常细胞都有一定的寿命,称为Hayflick界限。()16.正常的体外培养的二倍体成纤维细胞只能进行有限次数分裂,其分裂增殖次数不仅与供体年龄有关,还与物种寿命有关。()17.随着传代次数增加,体外培养的正常细胞群体中表达衰老相关β-半乳葡萄糖苷酶的细胞逐渐增多。()18.如果表达出有活性的端粒酶,增殖细胞的端粒将会逐渐变长()19.端粒的缩短会使细胞中的p53含量明显增加。()二、分析与简答题1.可用哪些方法检测细胞凋亡,并简要说明实验依据?2.将细胞色素c(cytochromec)显微注射到以下两株细胞的细胞质基质中,一株是野生型,另一株是Bax和Bak基因缺陷型。请解释这两株细胞是否会凋亡(参考WeiMCetal.Science292,727~730)。3.Fas及Fas配体的一个重要作用是介导杀手淋巴细胞清除肿瘤细胞。研究发现不少原发肺癌和结肠癌细胞都能扩增并过量表达一种与Fas配体结合的分泌蛋白而存活下来。请解释这种蛋白的过量表达为何能增强这些肿瘤细胞的生存能力(来源于Nature,1998,396,699-703)4.细胞死亡有凋亡(apoptosis)和坏死(necrosis)等不同类型。凋亡过程中,细胞质膜完整、内容物并不释放到细胞外、形成凋亡小体;坏死过程中,细胞质膜丧失完整性、内容物释放到细胞外、不形成凋亡小体等。已知荧光染料Hoechst33342能进入质膜完整的细胞而与DNA特异结合显示蓝色荧光,而荧光染料碘化丙啶(PI)能穿过坏死细胞的质膜与DNA结合显示桔红色荧光。试根据上述背景知识,简单设计试验区分正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞。5.细胞色素C(CytC)在细胞质基质翻译后并不能诱导细胞凋亡,而当其进入线粒体并从中释放到细胞质基质后便能诱导细胞凋亡。有人认为可能原因是CytC进入线粒体后经过了修饰变化,从而赋予其诱导细胞凋亡的功能,但也有人认为是因为CytC进入线粒体前经过了糖基化等修饰的缘故。请你解释哪种说法更有道理。【参考答案】一、判断题1.×Caspase激活的核酸酶CAD在核小体间切割DNA2.×称为细胞坏死3.×小鼠不能正常发育4.√5.√6.×是通过细胞凋亡实现的。7.×有Caspase非依赖性细胞凋亡途径存在。8.×原癌基因9.×有Caspase非依赖性细胞凋亡途径存在,且是程序性凋亡。10.√11.√12.×细胞自噬是细胞降解细胞自身物质的过程。13.×都通过蛋白酶体降解14.×有程序性细胞死亡。15.√16.√17.√18.×端粒序列长度将维持在一定范围内19.√二、问答与分析1.答:从形态学和生物化学特征,方法有:(1)形态学观测:应用各种染色体法可观察到细胞的各种形态学特征。用荧光染料DAPI与DNA结合,可以观察到细胞核的形态变化。(2)DNA电泳:细胞发生凋亡时,DNA在核小体间的断裂产生180bp~200bp整倍数的片段。(3)彗星电泳法:凋亡细胞中形成的DNA降解片段,在电场中游动的速度较快,使细胞核呈现出一种简便的凋亡检测法。(4)流式细胞仪分析。2.答:两株细胞都会凋亡,因为细胞色素C可以诱导细胞凋亡。3.答:过量表达的这种分泌蛋白与FasL结合后,可阻止细胞毒性T淋巴细胞分泌的FasL与肿瘤细胞表面的Fas结合,从而阻止了Fas受体介导的细胞凋亡信号途径。4.答:方法:用Hoechst33342和碘化丙啶(propidiumiodide,PI)对细胞进行双重染色,然后用荧光显微镜观察,可以区别凋亡、坏死及正常细胞。若有蓝色
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