抗生素类药物分析

关于抗生素类药物分析第一页，共二十六页，2022年，8月28日

化学纯度较低活性组分易发生变异稳定性差3.来源4.抗生素的特点化学合成半合成生物合成（发酵）生产工艺复杂发酵过程不易控制，易受污染原因一、概述第二页，共二十六页，2022年，8月28日鉴别：物理化学方法、微生物法检查：水分、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等含量/效价测定：

微生物法：与临床疗效吻合，灵敏度高，但操作复杂费时；

理化方法：

准确度与专属性较高，且操作简便，但与临床疗效有偏差5.抗生素质量分析一、概述第三页，共二十六页，2022年，8月28日1.

化学结构包括青霉素类和头孢菌素类青霉素类：6-APA为母核头孢菌素类：7-ACA为母核中国药科大学药学院药分教研室二、β–内酰胺类第四页，共二十六页，2022年，8月28日酸性较强（pKa2.5-2.8）临床常用其碱金属盐（水溶性好）酸性(羧基)有多个手性碳旋光性青霉素类：苯环取代基头孢菌素类：母核有共轭结构UV（共轭）干燥条件较稳定，溶液不稳定稳定性(内酰胺)2、主要理化性质降解失效氧化剂、酸、碱酶、金属离子、Δ青霉素二、β–内酰胺类第五页，共二十六页，2022年，8月28日1）羟肟酸铁反应：

β–内酰胺类羟肟酸显色2）茚三酮反应

α-氨基蓝紫色3）双缩脲反应

β–内酰胺类紫红色4）光谱法（UV、NMR）5）色谱法（HPLC、TLC）NH2OH·HClNaOHFe3+H+茚三酮Δ

碱性酒石酸铜呈色反应3、鉴别二、β–内酰胺类第六页，共二十六页，2022年，8月28日二、β–内酰胺类4、检查聚合物有关物质和异构体吸光度残留溶剂结晶性第七页，共二十六页，2022年，8月28日5、含量测定-----------碘量法（ChP2000）二、β–内酰胺类原理：青霉素与头孢菌素本身不与碘反应，但其碱性降解产物可消耗碘青霉素族头孢菌素族NaOH水解4I2H+8I-I2+2Na2S2O32NaI+Na2S4O6定量过量剩余第八页，共二十六页，2022年，8月28日5、含量测定

-----------碘量法（ChP2000）反应分两步进行：水解反应(按化学计算量进行)氧化-还原反应(无定量关系，受温度、pH值和时间等因素影响，应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定)第九页，共二十六页，2022年，8月28日5、含量测定

-----------碘量法（ChP2000）因样品中杂质会消耗碘，故应作空白试验。加入样品，不加碱；其余试剂（醋酸盐缓冲液，碘液，硫代硫酸钠）都要加碱。空白试验:空白试验与经典空白试验不同：第十页，共二十六页，2022年，8月28日5、含量测定

-----------碘量法（ChP2000）含量％＝×

×

对照品％V样空-V样W对V对空-

V对W样灵敏度高：样品:碘=1:8反应条件、实验操作要求高1份含量V对、V对空V样、V样空加试剂次序、反应时间、滴定速度相同特点：第十一页，共二十六页，2022年，8月28日5、含量测定

-----------电位配位滴定法（汞量法）原理：青霉素不与汞盐反应，其碱性降解产物可与Hg2+络和。Hg++2R-SH(RS)2Hg+2H+方法说明：

a、空白试验与碘量法类似，加样品，不加NaOHb、与碘量法相比，汞量法不需对照试验第十二页，共二十六页，2022年，8月28日5、含量测定

-----------其他常用方法酸碱滴定法：应用广泛硫醇汞盐法HPLC法：应用广泛咪唑HgCl2（λmax324～345nm）青霉素青霉烯酸硫醇汞盐第十三页，共二十六页，2022年，8月28日1.

化学结构三、氨基糖苷类都是以氨基环醇与氨基糖缩合而成的苷；分子结构中都含有多羟基；均为碱性抗生素；链霉素第十四页，共二十六页，2022年，8月28日临床应用其硫酸盐碱性(氨基)（糖）：有多个手性碳旋光性(糖)水溶性溶解度(氨基、羟基)强酸、碱条件均可水解稳定性(苷)2、主要理化性质三、氨基糖苷类第十五页，共二十六页，2022年，8月28日3、鉴别三、氨基糖苷类茚三酮反应：具羟基胺类，α-氨基酸性质链霉素+

水和茚三酮蓝紫色链霉素N-甲基葡萄糖胺N-甲基葡萄糖胺（Elson-Morgan）反应：红色水解对二甲氨基苯甲醛乙酰丙酮OH-第十六页，共二十六页，2022年，8月28日OH-重排Fe3+8-羟基喹啉NaOBrOH-水解坂口（Sakaguchi）反应：(链霉胍特有）麦芽酚（Maltol)反应：(链霉糖特有）三、氨基糖苷类-------鉴别链霉素麦芽酚紫红色链霉素链霉胍

橙红硫酸盐反应或α-萘酚第十七页，共二十六页，2022年，8月28日4、检查-------------来源：发酵中产生BP:薄层色谱法（杂质对照品法）要求：NC2≥2000，C2a峰和C2峰的分离度应符合要求，重复进样RSD<2.0%三、氨基糖苷类链霉素中链霉素B的检查庆大霉素C组分测定（系统适用性试验）色谱柱：ODS流动相：

H2O-HAc-MeOH配制的庚烷磺酸钠溶液(0.2M)，必要时调节甲醇的含量。检测波长：

330nm（邻苯二甲醛柱前衍生）第十八页，共二十六页，2022年，8月28日4、含量检测三、氨基糖苷类氨基糖苷类含量检测微生物法、HPLC法等第十九页，共二十六页，2022年，8月28日四、四环素类1.

化学结构第二十页，共二十六页，2022年，8月28日四、四环素类-OH：酸性N(CH3)2：碱性与酸、碱均可成盐临床多用盐酸盐两性旋光性易发生异构化，降解等反应，性质不稳定稳定性酚羟基、烯醇基与Ca2+、Mg2+络合显色与金属离子络合2、主要理化性质UV和荧光第二十一页，共二十六页，2022年，8月28日四、四环素类

2.

主要理化性质碱性C环开环，形成内酯异四环素弱酸性（pH2-6）A环C-4异构化差向四环素酸性（pH<2）C环脱水脱水四环素第二十二页，共二十六页，2022年，8月28日四、四环素类AApH2.0~6.0差向异构体DDDCBBCBC脱水四环素类第二十三页，共二十六页，2022年，8月28日异四环素OH-四、四环素类第二十四页，共二十六页，2022年，8月28日四、四环素类

3.

鉴别1）浓硫酸反应2）F