实验四-高效液相色谱法课件

实验四高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量

实验四高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量1一、目的要求

1．掌握高效液相色谱外标法含量测定的原理。2．熟悉高效液相色谱仪的操作、使用及注意事项。

一、目的要求1．掌握高效液相色谱外标法含量测定的原理。2二、操作步骤

本品为阿莫西林的胶囊剂（标示量为250mg），含阿莫西林（C16H19N3O5S）应为标示量的90%～110.0%。

二、操作步骤本品为阿莫西林的胶囊剂（标示量为250mg），31．色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；水-甲醇（40：60）为流动相；流速为1ml/min；检测波长为254nm。1．色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；42．对照品溶液的制备

精密称取阿莫西林对照品适量，置50ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH5.0）溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。（实称阿莫西林对照品0.0308g）

2．对照品溶液的制备精密称取阿莫西林对照品适量，置50ml53．供试品溶液的制备

取阿莫西林胶囊(平均装量0.2498g）内容物，混合均匀，精密称取细粉适量，置100ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH5.0）溶解并稀释成每1ml中约含0.6mg的溶液，用0.45µm孔径的滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液。（实称细粉0.0659g）

3．供试品溶液的制备取阿莫西林胶囊(平均装量0.2498g64．测定精密吸取供试品溶液10µL与对照品溶液3、6、9、12、15µL进样，测定，即得。5．计算按标准曲线法以峰面积计算出供试品中阿莫西林（C16H19N3O5S）占标示量的百分含量。

4．测定7三、思考题

1.中国药典HPLC法常用的固定相及流动相有哪些？2.HPLC法系统适用性试验内容有哪些？3.HPLC法常用的检测器有哪些？4.含量测定方法的效能指标有哪些？三、思考题1.中国药典HPLC法常用的固定相及流动相有哪些8液相色谱流程图溶剂输液泵进样器柱温箱检测器数据处理液相色谱流程图溶剂输液泵进样器柱温箱检测器数据处理9高效液相色谱工作站高效液相色谱工作站10实验四-高效液相色谱法课件11实验四-高效液相色谱法课件12实验四-高效液相色谱法课件13实验四-高效液相色谱法课件14实验四-高效液相色谱法课件15实验四-高效液相色谱法课件16实验四-高效液相色谱法课件17实验四-高效液相色谱法课件18实验四高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量

实验四高效液相色谱法测定阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量19一、目的要求

1．掌握高效液相色谱外标法含量测定的原理。2．熟悉高效液相色谱仪的操作、使用及注意事项。

一、目的要求1．掌握高效液相色谱外标法含量测定的原理。20二、操作步骤

本品为阿莫西林的胶囊剂（标示量为250mg），含阿莫西林（C16H19N3O5S）应为标示量的90%～110.0%。

二、操作步骤本品为阿莫西林的胶囊剂（标示量为250mg），211．色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；水-甲醇（40：60）为流动相；流速为1ml/min；检测波长为254nm。1．色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；222．对照品溶液的制备

精密称取阿莫西林对照品适量，置50ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH5.0）溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。（实称阿莫西林对照品0.0308g）

2．对照品溶液的制备精密称取阿莫西林对照品适量，置50ml233．供试品溶液的制备

取阿莫西林胶囊(平均装量0.2498g）内容物，混合均匀，精密称取细粉适量，置100ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH5.0）溶解并稀释成每1ml中约含0.6mg的溶液，用0.45µm孔径的滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液。（实称细粉0.0659g）

3．供试品溶液的制备取阿莫西林胶囊(平均装量0.2498g244．测定精密吸取供试品溶液10µL与对照品溶液3、6、9、12、15µL进样，测定，即得。5．计算按标准曲线法以峰面积计算出供试品中阿莫西林（C16H19N3O5S）占标示量的百分含量。

4．测定25三、思考题

1.中国药典HPLC法常用的固定相及流动相有哪些？2.HPLC法系统适用性试验内容有哪些？3.HPLC法常用的检测器有哪些？4.含量测定方法的效能指标有哪些？三、思考题1.中国药典HPLC法常用的固定相及流动相有哪些26液相色谱流程图溶剂输液泵进样器柱温箱检测器数据处理液相色谱流程图溶剂输液泵进样器柱温箱检测器数据处理27高效液相色谱工作站高效液相色谱工作站28实验四-高效液相色谱法课件29