疫苗凝集反应课件

药学微生物基础教案授课内容：

第九章常用血清学试验上课时间:200年月日授课人:汪穗福、卓家珍任教班级:200级班课时:课型:教学媒体:药学微生物基础教案授课内容：1教学目标：１、熟记变态反应、疫苗、凝集反应、沉淀反应等基本概念；２、理解并掌握四种变态反应的特点及防治；常用疫苗及其优缺点；３、熟练掌握凝集试验、沉淀反应、免疫标记技术等几种常用的血清学试验的理论知识及相关操作；4、了解各类变态发应、几种血清学试验与医药学的关系，在医学中的作用。教学重点、难点：1、免疫学相关定义概念、特点2、几个易混淆的知识点的比较：四种变态反应、死疫苗与活疫苗等。3、几种常用的血清学试验的原理4、相关知识和实验操作与医药学的联系教学目标：2内容概述第一节免疫基础知识

一.抗原与抗体

1.1抗原1.2抗体

二.变态反应

三.疫苗3.1传统疫苗3.2新型疫苗

第二节血清学试验

一.凝集试验二.沉淀试验三.免疫标记技术内容概述第一节免疫基础知识第二节血清学试验3二、变态反应

正常情况下机体对抗原产生的免疫反应起保护作用，可以帮助机体消灭病原微生物、防治癌症等。但是异常情况下的免疫应答也会对机体有害，其中最重要的是变态反应。

变态反应也称超敏反应，是机体受同一抗原或半抗原再次刺激后产生的一种异常的或病理性的，以组织损伤或生理功能紊乱为表现的免疫反应。变态反应与免疫反应一样，也具有特异性和记忆性。引起变态反应的抗原称为变应原或过敏原。它们可以是完全抗原，如异种动物血清、某些微生物、花粉等；也可以是半抗原，如青霉素、磺胺等药物。变态反应的发生与变应原的性质、剂量、进入机体的途径及机体的免疫机能状态等因素有关。二、变态反应正常情况下机体对抗原产生的免疫反应起保4根据变态反应的发生机理和临床特点，分为四个类型，称为为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型变态反应。（一）Ⅰ型变态反应Ⅰ型变态反应又称过敏反应，是临床上最常见的变态反应。（1）本型特点

①反应发生快，消失也快，一般在接触过敏原后数秒钟至数十秒钟内就出现反应，数十分钟至数小时内即可消失；②反应过程以生理功能紊乱为主，无明显的组织损伤；③参与的抗体为IgE；④有明显的个体差异，与遗传因素有关。根据变态反应的发生机理和临床特点，分为四个类型，称为为Ⅰ型5（2）变应原引起Ⅰ型变态反应的变应原很多，主要为蛋白质或与蛋白质结合的化学半抗原，如花粉、尘螨、霉菌、寄生虫、动物皮屑或羽毛、食物中的鱼、虾、蛋、奶、药物中的青霉素、链霉素、磺胺、麻醉药等均是重要的变应原。（3）常见疾病过敏性休克、呼吸道过敏反应、消化道过敏反应、皮肤过敏反应等均属于该型变态反应。发生机理

Ⅰ型变态反应的发生分为两个阶段，第一阶段称致敏阶段，是机体第一次接触变应原，使机体处于致敏状态，不表现出疾病。处在致敏状态的机体再次接触变应原后即进入第二阶段（发敏阶段），表现出过敏症状。（2）变应原引起Ⅰ型变态反应的变应原很多，主要为蛋白质或与6I型超敏反应的发生机理I型超敏反应的发生机理7Ig－E与肥大细胞脱题粒Ig－E与肥大细胞脱题粒8（二）Ⅱ型变态反应

Ⅱ型变态反应又称细胞溶解型或细胞毒型变态反应。（1）本型特点①参与反应的抗体为IgG和IgM；②有补体、巨噬细胞及K细胞的参与，表现出的疾病主要为细胞溶解或损伤。（2）变应原红细胞血型抗原，药物半抗原、微生物等吸附的靶细胞等。

（3）常见疾病物过敏性血细胞减少症、新生儿溶血症、输血反应、自身免疫性溶血性贫血、肺-肺综合症等。（二）Ⅱ型变态反应Ⅱ型变态反应又称细胞溶解型或细胞毒型9II型超敏反应的发生机理II型超敏反应的发生机理10II型超敏反应造成细胞损伤II型超敏反应造成细胞损伤11补体介导的溶菌反应补体溶菌杀菌作用抗体介导的调理作用补体介导的溶菌反应补体溶菌杀菌作用抗体介导的调理作用12（三）Ⅲ型变态反应

本型又称免疫复合物型或血管炎型变态反应。

（1）本型特点

①参与的抗体为IgG或IgM；②变应原与相应抗体形成中等大小的可溶性免疫性复合物，并沉积于血管基底膜等处；③有补体参与并导致组织损伤。

（2）变应原

某些细菌、病毒、寄生虫、异种动物血清及某些药物等均可成为该型变态反应的变应原。

（3）常见疾病

血清病、链球菌感染后的肾小球肾炎、类风湿性关节炎、人类局部免疫复合物病等。（三）Ⅲ型变态反应

本型又称免疫复合物型或血管炎型变态反13III型超敏反应的发生III型超敏反应的发生14（四）Ⅳ型变态反应

Ⅳ型变态反应又称迟发型变态反应或细胞介导型变态反应。（1）本型特点

①反应发生慢（一般发生于机体再次接触变应原48～72h后），消失也慢；②由致敏淋巴细胞引起，与抗体和补体无关；③病变部位以单个核细胞浸润和细胞坏死为主；④多数无个体差异。

（2）变应原引起Ⅳ型变态反应的变应原有胞内寄生菌（如结核杆菌、麻风杆菌和布氏杆菌等）、病毒、某些真菌、小分子半抗原（青霉素、磺胺、农药、染料、油漆、塑料等）以及异体组织器官等。（四）Ⅳ型变态反应

Ⅳ型变态反应又称迟发型变态反应或15Ⅳ型变态反应的发生Ⅳ型变态反应的发生16

（3）常见疾病：临床上所见的传染性变态反应（如分枝杆菌、原虫、真菌感染）、接触性皮炎（如接触化学药品、药物半抗原后引起的湿疹）、移植排斥反应、某些自身免疫病等均属于Ⅳ型变态反应。另外，结核菌素皮肤试验时，感染结核杆菌者的注射局部出现的红肿、硬结也属于Ⅳ型变态反应。接触性皮炎系统性红斑狼疮（3）常见疾病：临床上所见的传染性变态反应（如分枝杆菌、原17以上四种类型的变态反应是根据发生机制和参与的成分不同而划分的，临床实际情况却远较此复杂。某些变态反应疾病并非单一类型，可以是几型共存，而以某一类型为主。如肾小球肾炎，一般以Ⅲ型变态反应为主，又有Ⅱ、Ⅳ型超敏反应的机制参与。同一变应原在不同的机体可以引起不同类型的超敏反应，而且表现的轻重也差别很大，如青霉素在不同的机体或者因使用时间长短、剂量和途径等的不同可以引起Ⅰ～Ⅵ型变态反应。青霉素引起的荨麻疹、哮喘、过敏性休克属于Ⅰ型超敏反应；长期大剂量静脉注射青霉素引起的溶血性贫血属于Ⅱ型超敏反应；引起的关节炎属于Ⅲ型超敏反应；多次涂抹皮肤，引起的接触性皮炎又属于Ⅳ型超敏反应。以上四种类型的变态反应是根据发生机制和参与的成分不同而划分的18（五）变态反应的防治

1、预防方面

（1）避免接触变应原询问病人及家属的过敏史，查明变应原，尽量避免与其接触。

（2）皮肤过敏试验在使用青霉素、链霉素、普鲁卡因、抗毒素等易引起过敏反应的药物之前，除询问患者有无过敏史外，必须进行皮肤过敏试验。方法是将少量被试物质注入受试者皮内，在10～30min内观察局部有无红肿引起的硬结现象。（五）变态反应的防治1、预防方面

（1）避免接触变应原19

（3）脱敏疗法对已查明过敏原者，应尽量避免再接触变应原，对难以避免接触的患者，可用脱敏疗法。例如，抗毒素皮试阳性而又必须采用时，可将抗毒素血清分成小量，多次逐渐增量的方法注入体内，使患者逐渐脱去过敏性，暂时处于脱敏状态，这时注入大量抗毒素血清不会发生过敏。

2、治疗方面对已发生的过敏性疾病，临床上可根据疾病类型、病情轻重采用不同的药物结合其它途径治疗，常用的抗过敏药物有：色甘酸二钠、儿茶酚胺类、茶碱类、苯海拉明、异丙嗪、扑尔敏、肾上腺素、肾上腺皮质激素类、环磷酰胺等。它们分别适应于不同类型和不同症状的过敏反应。（3）脱敏疗法对已查明过敏原者，应尽量避免再接触变应原20三.疫苗目前疫苗应用广泛，不仅预防，而且已作为治疗制剂使用。概念：指用微生物制备而成的用于人工免疫的类生物制品(剂)（抗原物质）传统疫苗：传统用于抗感染的免疫制剂死疫苗活疫苗类毒素新型疫苗：近年来应用免疫学、生物化学和基因工程等新技术研制的更有效和安全的免疫制剂亚单位疫苗结合疫苗重组抗原疫苗重组载体疫苗合成肽疫苗DNA疫苗转基因植物疫苗国际上统称为疫苗菌苗：常将用细菌制备而成的制剂＋疫苗：用病毒、螺旋体、立克次体制成的制剂＋

类毒素国内所指三.疫苗目前疫苗应用广泛，不仅预防，而且已作为21(一)传统疫苗----死疫苗

制备：选用抗原性强的病原微生物人工大量培养

采用理化方法杀死

制成免疫制剂（即死疫苗）

免疫原理：病原微生物失去了生长繁殖能力，但仍保留抗原性，进入机体后仍能刺激机体产生特异性抗体。

优点：易制备、易保存，并且保存的时间较长。

缺点：a.在体内不能繁殖，即抗原量不能增加，对机体刺激时间短，免疫力维持时间也短b.为维持血清抗体水平，常需多次接种c.有可能引起较重的局部和全身反应为了减少接种次数及降低副作用，常将几种死疫苗混合制成联合疫苗。

常用的死疫苗：伤寒、霍乱、百日咳、乙型脑炎、狂犬病毒、钩端螺旋体、流行性感冒病毒死疫苗(一)传统疫苗----死疫苗制备：选用抗原223.1传统疫苗----活疫苗定义：也称为减毒活疫苗，是选用无毒或充分减毒，但仍保留抗原性的活的病原微生物制成的免疫制剂。

免疫原理：接种入机体后有一定的繁殖力，产生特异性抗体，产生类似轻型感染或隐性感染优点：a.微生物有一定的繁殖力，使抗原量有一定增加b.接种量少，一般只需接种一次c.免疫效果较好且持续时间长（1～5年）缺点：a.制备和鉴定要求严格b.难于保存和运输c.有发生极为罕见的恢复突变的可能性用途：a.活疫苗的接种途径一般以自然感染途径为佳b.免疫缺陷者和孕妇一般不宜接种常用的活疫苗制剂：卡介苗、麻疹活疫苗、脊髓灰质炎糖丸疫苗、牛痘苗等3.1传统疫苗----活疫苗定义：也称为减毒活疫苗，是选用23死疫苗和活疫苗的比较死疫苗活疫苗微生物性状微生物已死亡活微生物（无毒或减毒）制备和鉴定较容易，要求不太严格难，要求严格保存及有效期易保存，4℃可保存1年左右不易保存，4℃保存约2～3个月接种量及接种次数较大，需多次反复接种较小，一般只需接种一次免疫效果较差，持续0.5～1年较好，持续1～5年使用方式可几种混合使用多单独使用死疫苗和活疫苗的比较死疫苗活疫苗微生物性状微生物已死亡243.1传统疫苗----类毒素定义：将细菌产生的外毒素经0.3％～0.4％的甲醛处理后，使其失去毒性仍保留抗原性而制成的免疫制剂。免疫原理：接种后，能诱导机体产生特异性抗毒素抗体，抗毒素可中和相应的外毒素的毒性，以预防相应的特异性疾病。常用的类毒素：百日咳、白喉、破伤风三联疫苗等。3.1传统疫苗----类毒素定义：将细菌产生的外毒素经0.253.2新型疫苗定义例子亚单位疫苗将病原微生物体内与抗原无关甚至有害的成分去除，保留有效的抗原成分制成的免疫制剂如：从乙型肝炎病毒表面抗原阳性者血浆中提取表面抗原制成的乙型肝炎亚单位疫苗、流感病毒亚单位疫苗等。结合疫苗将某种抗原成分和载体通过化学连接，使抗原成分得以更好的表达而制成的免疫制剂将细菌荚膜多糖抗原和白喉类毒素化学连接制成的结合疫苗，获得了良好的免疫效果。目前使用的结合疫苗有b型流感菌疫苗、脑膜炎球菌疫苗和肺炎球菌疫苗等。重组抗原疫苗利用DNA重组技术制备的只含抗原的纯化免疫制剂此类疫苗由于不含活的病原微生物，所以更加安全，并且成本低廉。目前使用的有乙型肝炎表面抗原重组疫苗、口蹄疫重组疫苗等。重组载体疫苗将病原微生物编码抗原的基因通过基因工程手段插入载体（减毒的病毒或细菌疫苗株）基因组中制成的疫苗。目前应用或研制的有以痘状病毒疫苗为载体的甲型和乙型肝炎、麻疹、单纯疱疹病毒载体疫苗；以脊髓灰质炎疫苗为载体的霍乱弧菌载体疫苗、痢疾杆菌载体疫苗等。3.2新型疫苗定义26第二节血清学试验

血清学试验：抗原、抗体在体外发生特异结合反应，用已知抗原检测未知抗体，或用已知抗体检测未知抗原。血清学试验可用于疾病的诊断和药品的检测等。

凝集反应：将颗粒性或细胞性抗原（细菌、红细胞）与相应抗体混合，在电解质作用下出现肉眼可见的凝集团块的反应直接凝集反应间接凝集反应沉淀反应：指将可溶性抗原（细菌浸出液、外毒素、血清等）与相应抗体混合，在电解质存在下出现肉眼可见的沉淀物的反应

环状沉淀法琼脂扩散法免疫标记技术：用荧光素、酶、放射性同位素等标记抗原或抗体，使抗原抗体反应后易于观察，敏感性和特异性明显提高，能较快速的测出少量抗原或抗体荧光素标记技术间接法免疫电泳常用血清学试验第二节血清学试验血清学试验：抗原、抗体在体外发生特异272.1凝集反应----直接凝集反应直接凝集反应：将颗粒性抗原与相应抗体直接混合，观察有无肉眼可见的凝集块的反应。

玻片凝集试验：定性法，适于用已知抗原（抗体）定性的鉴定未知抗体（抗原）。常用于鉴定血型和菌种等。如沙门菌的A－F多价反应。试管凝集实验：定量法，在试管内用已知抗原检测病人血清中相副伤寒的应的未知抗体及其含量。如用于诊断伤寒和肥达反应，诊断斑疹伤寒和恙虫热的外斐氏反应。凝集反应原理结果判断：形成凝集块－－抗原抗体结合，待检物中含有相应的抗原或抗体不形成凝集块－－抗原抗体未结合，待检物中不含有相应的抗原或抗体2.1凝集反应----直接凝集反应直接凝集反应：将颗28直接凝集反应示意图1.抗原（凝集原）2.抗体（凝集素）3.凝集现象凝集反应结果判断直接凝集反应示意图凝集反应结果判断29试分析玻片凝集试验结果抗A血清+被检者红细胞抗B血清+被检者红细胞被检者血型未凝集未凝集？未凝集未凝集？凝集未凝集？凝集凝集？未凝集凝集？试分析玻片凝集试验结果抗A血清+被检者红细胞抗B血清+被检30试管凝集实验结果判断凝集效价的确定：出现“++”判定结果的血清最高稀释度为该血清的凝集效价。血清稀释度应以加入抗原后的最后血清稀释度计算。如第1管1∶10稀释的血清0.5mL，加入抗原0.5mL，则最后的血清稀释度为1∶20。注意结果观察时，应有良好的光源和黑暗背景液体管底判定清晰透明较清晰，有轻度混浊中等混浊较混浊同对照管有棉絮状或颗粒状凝集块，轻摇可见大凝集块飘起凝集块较上稍小，轻摇可见大凝集块飘起凝集块较轻度混浊的小有少量小凝集块无凝集块，可能有少许细菌沉淀，轻摇即飘起++++++++++-试管凝集实验结果判断凝集效价的确定：出现“++”判定结果的血312.1凝集反应----间接凝集反应间接凝集反应：将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的载体颗粒（如聚苯乙烯乳胶颗粒，人O型红细胞）表面，成为致敏颗粒。致敏颗粒与相应抗体相遇，在电解质存在下即发生凝集现象。用途：主要用于测细菌抗体、病毒抗体、某些变态反应患者的抗体等。2.1凝集反应----间接凝集反应间接凝集反应：将可32凝集反应示意图凝集反应示意图332.2沉淀反应

沉淀反应：指将可溶性抗原（细菌浸出液、外毒素、血清等）与相应抗体混合，在电解质存在下出现肉眼可见的沉淀物的反应。反应中的抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等，做定量试验时，应稀释抗原，并以抗原的稀释度作为沉淀反应的效价。2.2沉淀反应沉淀反应：指将可溶性抗原（细菌浸出34常用的沉淀实验免疫电泳(可不讲)双向扩散：将抗原、抗体置于不同的琼脂孔内，同时向四周扩散，二者相遇时如果相对应即可形成白色沉淀线，为阳性反应。单向扩散可溶性抗原和抗体均在琼脂中扩散，如果两者互相对应且浓度合适，即可在相遇处形成白色沉淀，称为阳性反应，否者称为阴性反应.（二）琼脂扩散法

：原理：a.

操作：在小试管内加入适量高浓度已知抗体血清，然后将待检的等量可溶性抗原沿管壁缓慢叠加于抗体血清之上，使成为界限分明的两层，静置后，观察交界处有无乳白色沉淀环出现。b.结果判断：有者为阳性，否者为阴性。c.用途：主要用于检测及鉴定可溶性抗原，如法医鉴定血迹。（一）环状沉淀法：常用的沉淀实验免疫电泳双向扩散：将抗原、抗体置于不同的琼脂孔352、实验方法

（1）制备琼脂板将熔化并冷却到约50℃的1.2％的生理盐水琼脂3mL，浇注于载玻片上，使冷却制成琼脂厚约2mm的平板。制备时玻片要放平，使琼脂厚薄均匀。

（2）打孔按图所示在琼脂板上用打孔器打孔，吸净孔中琼脂，注意不能损坏孔的边缘。

（3）加注抗原、抗体在中心孔①内加羊抗兔抗体血清，第②孔加标准抗原（兔抗体）作为阳性对照，第③孔加生理盐水作为阴性对照，第④～⑦孔加被检者血清（兔血清）。注意加样高度应与孔的上缘相平，且不能溢出。

（4）将玻片置于湿盒内，于37℃培养箱内放置6～8h后，再在室温中放置18～24h，观察结果。

3、结果

（1）待检血清孔和中心孔之间出现白色沉淀线，并与阳性血清（第②孔）的沉淀线对照，相同者为阳性。

（2）96h后仍没有沉淀线，与生理盐水（第③孔）对照，相同者为阴性。①.抗体；②～⑦分别为抗原2、实验方法

（1）制备琼脂板将熔化并冷却到约50℃的1.362.3免疫标记技术----间接法采用两对抗原－抗体系统。如果测定组织内抗原，第一对是待检抗原与相应抗体（第一抗体）；第二对是第一抗体及相应荧光素标记的抗抗体。如果测定血清抗体效价，第一对是已知抗原及待检血清（第一抗体），第二对是待检血清及相应荧光标记抗抗体。实验时先将待测的抗原（抗体）与未标记的已知抗体（抗原）作用，经洗涤除去游离抗原（抗体）后，再滴加荧光标记的抗抗体，充分洗涤，除去未结合的荧光抗抗体，置荧光显微镜下观察，若见到荧光，表示有抗原抗体抗抗体复合物存在，即抗原抗体相对应。2.3免疫标记技术----间接法采用两对抗原－抗体系统。37荧光标记图荧光标记图38疫苗凝集反应课件39总结：

1、基础知识（疫苗、血清学试验、凝集反应、沉淀反应、变态反应的概念发生机制）2、死疫苗和活疫苗的区别3、常用的沉淀实验布置作业：1、解词：疫苗、凝集反应、沉淀反应、变态反应2、比较死疫苗和活疫苗的区别。7、试管凝集实验的结果如何判断？8、如何根据免疫荧光实验判断结果？总结：1、基础知识（疫苗、血清学试验、凝集反应、沉淀反应40

一、填空题（将合适的答案填在空格内）1、可检测抗原的凝集反应试验方法包括____________、______________和_______________。2、变态反应包括____________、______________和_______________、______________类型二、选择题（在下列备选答案中选取正确答案，将其序号填在括号里）1、活疫苗的优点不包括（）A．接种量小B．接种次数少C．易保存D．类似隐性感染E．免疫维持时间长2、Ⅰ型变态反应特点包括（）①反应发生快，消失也快；②反应过程有明显的组织损伤；③参与的抗体为IgE；④有补体、巨噬细胞及K细胞的参与

一、填空题（将合适的答案填在空格内）二、选择题（在下列备选41

3、血清中含量最高的抗体类型是()A.IgAB.IgGC.IgMD.IgDE.IgE4、再次应答时抗体产生的主要类别是()A.IgMB.IgGC.IgED.IgDE.IgA

5、属于I型超敏反应的疾病是()A.过敏性休克B.接触性皮炎C.类风湿性关节炎D.新生儿溶血症E.肾小球肾炎6、属于Ⅲ型超敏反应性疾病的是（）A．血清过敏性休克B．接触性皮炎C．类风湿性关节炎D．新生儿溶血症E．急性麻疹

3、血清中含量最高的抗体类型是()42疫苗凝集反应课件43药学微生物基础教案授课内容：

第九章常用血清学试验上课时间:200年月日授课人:汪穗福、卓家珍任教班级:200级班课时:课型:教学媒体:药学微生物基础教案授课内容：44教学目标：１、熟记变态反应、疫苗、凝集反应、沉淀反应等基本概念；２、理解并掌握四种变态反应的特点及防治；常用疫苗及其优缺点；３、熟练掌握凝集试验、沉淀反应、免疫标记技术等几种常用的血清学试验的理论知识及相关操作；4、了解各类变态发应、几种血清学试验与医药学的关系，在医学中的作用。教学重点、难点：1、免疫学相关定义概念、特点2、几个易混淆的知识点的比较：四种变态反应、死疫苗与活疫苗等。3、几种常用的血清学试验的原理4、相关知识和实验操作与医药学的联系教学目标：45内容概述第一节免疫基础知识

一.抗原与抗体

1.1抗原1.2抗体

二.变态反应

三.疫苗3.1传统疫苗3.2新型疫苗

第二节血清学试验

一.凝集试验二.沉淀试验三.免疫标记技术内容概述第一节免疫基础知识第二节血清学试验46二、变态反应

正常情况下机体对抗原产生的免疫反应起保护作用，可以帮助机体消灭病原微生物、防治癌症等。但是异常情况下的免疫应答也会对机体有害，其中最重要的是变态反应。

变态反应也称超敏反应，是机体受同一抗原或半抗原再次刺激后产生的一种异常的或病理性的，以组织损伤或生理功能紊乱为表现的免疫反应。变态反应与免疫反应一样，也具有特异性和记忆性。引起变态反应的抗原称为变应原或过敏原。它们可以是完全抗原，如异种动物血清、某些微生物、花粉等；也可以是半抗原，如青霉素、磺胺等药物。变态反应的发生与变应原的性质、剂量、进入机体的途径及机体的免疫机能状态等因素有关。二、变态反应正常情况下机体对抗原产生的免疫反应起保47根据变态反应的发生机理和临床特点，分为四个类型，称为为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型变态反应。（一）Ⅰ型变态反应Ⅰ型变态反应又称过敏反应，是临床上最常见的变态反应。（1）本型特点

①反应发生快，消失也快，一般在接触过敏原后数秒钟至数十秒钟内就出现反应，数十分钟至数小时内即可消失；②反应过程以生理功能紊乱为主，无明显的组织损伤；③参与的抗体为IgE；④有明显的个体差异，与遗传因素有关。根据变态反应的发生机理和临床特点，分为四个类型，称为为Ⅰ型48（2）变应原引起Ⅰ型变态反应的变应原很多，主要为蛋白质或与蛋白质结合的化学半抗原，如花粉、尘螨、霉菌、寄生虫、动物皮屑或羽毛、食物中的鱼、虾、蛋、奶、药物中的青霉素、链霉素、磺胺、麻醉药等均是重要的变应原。（3）常见疾病过敏性休克、呼吸道过敏反应、消化道过敏反应、皮肤过敏反应等均属于该型变态反应。发生机理

Ⅰ型变态反应的发生分为两个阶段，第一阶段称致敏阶段，是机体第一次接触变应原，使机体处于致敏状态，不表现出疾病。处在致敏状态的机体再次接触变应原后即进入第二阶段（发敏阶段），表现出过敏症状。（2）变应原引起Ⅰ型变态反应的变应原很多，主要为蛋白质或与49I型超敏反应的发生机理I型超敏反应的发生机理50Ig－E与肥大细胞脱题粒Ig－E与肥大细胞脱题粒51（二）Ⅱ型变态反应

Ⅱ型变态反应又称细胞溶解型或细胞毒型变态反应。（1）本型特点①参与反应的抗体为IgG和IgM；②有补体、巨噬细胞及K细胞的参与，表现出的疾病主要为细胞溶解或损伤。（2）变应原红细胞血型抗原，药物半抗原、微生物等吸附的靶细胞等。

（3）常见疾病物过敏性血细胞减少症、新生儿溶血症、输血反应、自身免疫性溶血性贫血、肺-肺综合症等。（二）Ⅱ型变态反应Ⅱ型变态反应又称细胞溶解型或细胞毒型52II型超敏反应的发生机理II型超敏反应的发生机理53II型超敏反应造成细胞损伤II型超敏反应造成细胞损伤54补体介导的溶菌反应补体溶菌杀菌作用抗体介导的调理作用补体介导的溶菌反应补体溶菌杀菌作用抗体介导的调理作用55（三）Ⅲ型变态反应

本型又称免疫复合物型或血管炎型变态反应。

（1）本型特点

①参与的抗体为IgG或IgM；②变应原与相应抗体形成中等大小的可溶性免疫性复合物，并沉积于血管基底膜等处；③有补体参与并导致组织损伤。

（2）变应原

某些细菌、病毒、寄生虫、异种动物血清及某些药物等均可成为该型变态反应的变应原。

（3）常见疾病

血清病、链球菌感染后的肾小球肾炎、类风湿性关节炎、人类局部免疫复合物病等。（三）Ⅲ型变态反应

本型又称免疫复合物型或血管炎型变态反56III型超敏反应的发生III型超敏反应的发生57（四）Ⅳ型变态反应

Ⅳ型变态反应又称迟发型变态反应或细胞介导型变态反应。（1）本型特点

①反应发生慢（一般发生于机体再次接触变应原48～72h后），消失也慢；②由致敏淋巴细胞引起，与抗体和补体无关；③病变部位以单个核细胞浸润和细胞坏死为主；④多数无个体差异。

（2）变应原引起Ⅳ型变态反应的变应原有胞内寄生菌（如结核杆菌、麻风杆菌和布氏杆菌等）、病毒、某些真菌、小分子半抗原（青霉素、磺胺、农药、染料、油漆、塑料等）以及异体组织器官等。（四）Ⅳ型变态反应

Ⅳ型变态反应又称迟发型变态反应或58Ⅳ型变态反应的发生Ⅳ型变态反应的发生59

（3）常见疾病：临床上所见的传染性变态反应（如分枝杆菌、原虫、真菌感染）、接触性皮炎（如接触化学药品、药物半抗原后引起的湿疹）、移植排斥反应、某些自身免疫病等均属于Ⅳ型变态反应。另外，结核菌素皮肤试验时，感染结核杆菌者的注射局部出现的红肿、硬结也属于Ⅳ型变态反应。接触性皮炎系统性红斑狼疮（3）常见疾病：临床上所见的传染性变态反应（如分枝杆菌、原60以上四种类型的变态反应是根据发生机制和参与的成分不同而划分的，临床实际情况却远较此复杂。某些变态反应疾病并非单一类型，可以是几型共存，而以某一类型为主。如肾小球肾炎，一般以Ⅲ型变态反应为主，又有Ⅱ、Ⅳ型超敏反应的机制参与。同一变应原在不同的机体可以引起不同类型的超敏反应，而且表现的轻重也差别很大，如青霉素在不同的机体或者因使用时间长短、剂量和途径等的不同可以引起Ⅰ～Ⅵ型变态反应。青霉素引起的荨麻疹、哮喘、过敏性休克属于Ⅰ型超敏反应；长期大剂量静脉注射青霉素引起的溶血性贫血属于Ⅱ型超敏反应；引起的关节炎属于Ⅲ型超敏反应；多次涂抹皮肤，引起的接触性皮炎又属于Ⅳ型超敏反应。以上四种类型的变态反应是根据发生机制和参与的成分不同而划分的61（五）变态反应的防治

1、预防方面

（1）避免接触变应原询问病人及家属的过敏史，查明变应原，尽量避免与其接触。

（2）皮肤过敏试验在使用青霉素、链霉素、普鲁卡因、抗毒素等易引起过敏反应的药物之前，除询问患者有无过敏史外，必须进行皮肤过敏试验。方法是将少量被试物质注入受试者皮内，在10～30min内观察局部有无红肿引起的硬结现象。（五）变态反应的防治1、预防方面

（1）避免接触变应原62

（3）脱敏疗法对已查明过敏原者，应尽量避免再接触变应原，对难以避免接触的患者，可用脱敏疗法。例如，抗毒素皮试阳性而又必须采用时，可将抗毒素血清分成小量，多次逐渐增量的方法注入体内，使患者逐渐脱去过敏性，暂时处于脱敏状态，这时注入大量抗毒素血清不会发生过敏。

2、治疗方面对已发生的过敏性疾病，临床上可根据疾病类型、病情轻重采用不同的药物结合其它途径治疗，常用的抗过敏药物有：色甘酸二钠、儿茶酚胺类、茶碱类、苯海拉明、异丙嗪、扑尔敏、肾上腺素、肾上腺皮质激素类、环磷酰胺等。它们分别适应于不同类型和不同症状的过敏反应。（3）脱敏疗法对已查明过敏原者，应尽量避免再接触变应原63三.疫苗目前疫苗应用广泛，不仅预防，而且已作为治疗制剂使用。概念：指用微生物制备而成的用于人工免疫的类生物制品(剂)（抗原物质）传统疫苗：传统用于抗感染的免疫制剂死疫苗活疫苗类毒素新型疫苗：近年来应用免疫学、生物化学和基因工程等新技术研制的更有效和安全的免疫制剂亚单位疫苗结合疫苗重组抗原疫苗重组载体疫苗合成肽疫苗DNA疫苗转基因植物疫苗国际上统称为疫苗菌苗：常将用细菌制备而成的制剂＋疫苗：用病毒、螺旋体、立克次体制成的制剂＋

类毒素国内所指三.疫苗目前疫苗应用广泛，不仅预防，而且已作为64(一)传统疫苗----死疫苗

制备：选用抗原性强的病原微生物人工大量培养

采用理化方法杀死

制成免疫制剂（即死疫苗）

免疫原理：病原微生物失去了生长繁殖能力，但仍保留抗原性，进入机体后仍能刺激机体产生特异性抗体。

优点：易制备、易保存，并且保存的时间较长。

缺点：a.在体内不能繁殖，即抗原量不能增加，对机体刺激时间短，免疫力维持时间也短b.为维持血清抗体水平，常需多次接种c.有可能引起较重的局部和全身反应为了减少接种次数及降低副作用，常将几种死疫苗混合制成联合疫苗。

常用的死疫苗：伤寒、霍乱、百日咳、乙型脑炎、狂犬病毒、钩端螺旋体、流行性感冒病毒死疫苗(一)传统疫苗----死疫苗制备：选用抗原653.1传统疫苗----活疫苗定义：也称为减毒活疫苗，是选用无毒或充分减毒，但仍保留抗原性的活的病原微生物制成的免疫制剂。

免疫原理：接种入机体后有一定的繁殖力，产生特异性抗体，产生类似轻型感染或隐性感染优点：a.微生物有一定的繁殖力，使抗原量有一定增加b.接种量少，一般只需接种一次c.免疫效果较好且持续时间长（1～5年）缺点：a.制备和鉴定要求严格b.难于保存和运输c.有发生极为罕见的恢复突变的可能性用途：a.活疫苗的接种途径一般以自然感染途径为佳b.免疫缺陷者和孕妇一般不宜接种常用的活疫苗制剂：卡介苗、麻疹活疫苗、脊髓灰质炎糖丸疫苗、牛痘苗等3.1传统疫苗----活疫苗定义：也称为减毒活疫苗，是选用66死疫苗和活疫苗的比较死疫苗活疫苗微生物性状微生物已死亡活微生物（无毒或减毒）制备和鉴定较容易，要求不太严格难，要求严格保存及有效期易保存，4℃可保存1年左右不易保存，4℃保存约2～3个月接种量及接种次数较大，需多次反复接种较小，一般只需接种一次免疫效果较差，持续0.5～1年较好，持续1～5年使用方式可几种混合使用多单独使用死疫苗和活疫苗的比较死疫苗活疫苗微生物性状微生物已死亡673.1传统疫苗----类毒素定义：将细菌产生的外毒素经0.3％～0.4％的甲醛处理后，使其失去毒性仍保留抗原性而制成的免疫制剂。免疫原理：接种后，能诱导机体产生特异性抗毒素抗体，抗毒素可中和相应的外毒素的毒性，以预防相应的特异性疾病。常用的类毒素：百日咳、白喉、破伤风三联疫苗等。3.1传统疫苗----类毒素定义：将细菌产生的外毒素经0.683.2新型疫苗定义例子亚单位疫苗将病原微生物体内与抗原无关甚至有害的成分去除，保留有效的抗原成分制成的免疫制剂如：从乙型肝炎病毒表面抗原阳性者血浆中提取表面抗原制成的乙型肝炎亚单位疫苗、流感病毒亚单位疫苗等。结合疫苗将某种抗原成分和载体通过化学连接，使抗原成分得以更好的表达而制成的免疫制剂将细菌荚膜多糖抗原和白喉类毒素化学连接制成的结合疫苗，获得了良好的免疫效果。目前使用的结合疫苗有b型流感菌疫苗、脑膜炎球菌疫苗和肺炎球菌疫苗等。重组抗原疫苗利用DNA重组技术制备的只含抗原的纯化免疫制剂此类疫苗由于不含活的病原微生物，所以更加安全，并且成本低廉。目前使用的有乙型肝炎表面抗原重组疫苗、口蹄疫重组疫苗等。重组载体疫苗将病原微生物编码抗原的基因通过基因工程手段插入载体（减毒的病毒或细菌疫苗株）基因组中制成的疫苗。目前应用或研制的有以痘状病毒疫苗为载体的甲型和乙型肝炎、麻疹、单纯疱疹病毒载体疫苗；以脊髓灰质炎疫苗为载体的霍乱弧菌载体疫苗、痢疾杆菌载体疫苗等。3.2新型疫苗定义69第二节血清学试验

血清学试验：抗原、抗体在体外发生特异结合反应，用已知抗原检测未知抗体，或用已知抗体检测未知抗原。血清学试验可用于疾病的诊断和药品的检测等。

凝集反应：将颗粒性或细胞性抗原（细菌、红细胞）与相应抗体混合，在电解质作用下出现肉眼可见的凝集团块的反应直接凝集反应间接凝集反应沉淀反应：指将可溶性抗原（细菌浸出液、外毒素、血清等）与相应抗体混合，在电解质存在下出现肉眼可见的沉淀物的反应

环状沉淀法琼脂扩散法免疫标记技术：用荧光素、酶、放射性同位素等标记抗原或抗体，使抗原抗体反应后易于观察，敏感性和特异性明显提高，能较快速的测出少量抗原或抗体荧光素标记技术间接法免疫电泳常用血清学试验第二节血清学试验血清学试验：抗原、抗体在体外发生特异702.1凝集反应----直接凝集反应直接凝集反应：将颗粒性抗原与相应抗体直接混合，观察有无肉眼可见的凝集块的反应。

玻片凝集试验：定性法，适于用已知抗原（抗体）定性的鉴定未知抗体（抗原）。常用于鉴定血型和菌种等。如沙门菌的A－F多价反应。试管凝集实验：定量法，在试管内用已知抗原检测病人血清中相副伤寒的应的未知抗体及其含量。如用于诊断伤寒和肥达反应，诊断斑疹伤寒和恙虫热的外斐氏反应。凝集反应原理结果判断：形成凝集块－－抗原抗体结合，待检物中含有相应的抗原或抗体不形成凝集块－－抗原抗体未结合，待检物中不含有相应的抗原或抗体2.1凝集反应----直接凝集反应直接凝集反应：将颗71直接凝集反应示意图1.抗原（凝集原）2.抗体（凝集素）3.凝集现象凝集反应结果判断直接凝集反应示意图凝集反应结果判断72试分析玻片凝集试验结果抗A血清+被检者红细胞抗B血清+被检者红细胞被检者血型未凝集未凝集？未凝集未凝集？凝集未凝集？凝集凝集？未凝集凝集？试分析玻片凝集试验结果抗A血清+被检者红细胞抗B血清+被检73试管凝集实验结果判断凝集效价的确定：出现“++”判定结果的血清最高稀释度为该血清的凝集效价。血清稀释度应以加入抗原后的最后血清稀释度计算。如第1管1∶10稀释的血清0.5mL，加入抗原0.5mL，则最后的血清稀释度为1∶20。注意结果观察时，应有良好的光源和黑暗背景液体管底判定清晰透明较清晰，有轻度混浊中等混浊较混浊同对照管有棉絮状或颗粒状凝集块，轻摇可见大凝集块飘起凝集块较上稍小，轻摇可见大凝集块飘起凝集块较轻度混浊的小有少量小凝集块无凝集块，可能有少许细菌沉淀，轻摇即飘起++++++++++-试管凝集实验结果判断凝集效价的确定：出现“++”判定结果的血742.1凝集反应----间接凝集反应间接凝集反应：将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的载体颗粒（如聚苯乙烯乳胶颗粒，人O型红细胞）表面，成为致敏颗粒。致敏颗粒与相应抗体相遇，在电解质存在下即发生凝集现象。用途：主要用于测细菌抗体、病毒抗体、某些变态反应患者的抗体等。2.1凝集反应----间接凝集反应间接凝集反应：将可75凝集反应示意图凝集反应示意图762.2沉淀反应

沉淀反应：指将可溶性抗原（细菌浸出液、外毒素、血清等）与相应抗体混合，在电解质存在下出现肉眼可见的沉淀物的反应。反应中的抗原称为沉淀原，抗体称为沉淀素。抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等，做定量试验时，应稀释抗原，并以抗原的稀释度作为沉淀反应的效价。2.2沉淀反应沉淀反应：指将可溶性抗原（细菌浸出77常用的沉淀实验免疫电泳(可不讲)双向扩散：将抗原、抗体置于不同的琼脂孔内，同时向四周扩散，二者相遇时如果相对应即可形成白色沉淀