病毒感染与免疫分析课件

2022/12/151第一节病毒的致病作用

一、病毒感染传播方式二、病毒感染致病机制

三、病毒感染的类型

四、病毒感染与肿瘤

2022/12/141第一节病毒的致病作用一、病毒感染2022/12/152传播途径同细菌；吸入是最常见的病毒感染途径；多数病毒以一种方式进入宿主机体，也可见以多途径感染的方式感染机体的病毒。2022/12/142传播途径同细菌；2022/12/153

人类病毒的感染途径主要感染途径传播方式及途径病毒种类呼吸道空气、飞沫或皮屑流感病毒、鼻病毒等消化道污染水或食品脊髓灰质炎病毒、其他肠道病毒等输血、注射或器官移植污染血或血制品污染注射器HIV、乙型肝炎病毒等眼或泌尿生殖道接触、游泳池、性交HIV、疱疹病毒1、2型等经胎盘、围产期宫内、分娩产道、哺乳等乙肝病毒、HIV等破损皮肤昆虫叮咬、狂犬、鼠类脑炎病毒、出血热病毒等2022/12/143人类病毒的感染途径主要感染途径传播方2022/12/154病毒的传播方式水平传播：病毒在人群中个体间的传播通过呼吸道、消化道、皮肤粘膜病毒侵入机体的三大重要门户2022/12/144病毒的传播方式水平传播：病毒在人群中个2022/12/155

垂直传播：通过胎盘、产道、乳汁，病毒由亲代传播给子代的方式。胎盘、产道

乳汁2022/12/145

垂直传播：通过胎盘、产道、乳汁，病毒2022/12/156

产前

胎盘

风疹、巨细胞病毒、梅

毒螺旋体、弓形体、淋

病奈瑟菌

围产期

已感染的产道

衣原体产后

哺乳

直接接触巨细胞病毒、乙

型肝炎病毒

生殖细胞人基因组含病毒DNA多种反转录病毒垂直传播方式及常见微生物性疾病类型

途径

微生物性疾病2022/12/146产前胎二、病毒的致病机制病毒感染对宿主细胞的致病作用（细胞水平）病毒感染的免疫病理作用（整体水平）二、病毒的致病机制病毒感染对宿主细胞的致病作用（细胞水平2022/12/158（一）对宿主细胞的致病作用杀细胞效应

稳定状态感染

包涵体形成

细胞凋亡

基因整合与细胞转化2022/12/148（一）对宿主细胞的致病作用杀细胞效应2022/12/159杀细胞效应病毒在宿主细胞内增殖导致细胞裂解死亡，多见于无包膜，毒性强的病毒2022/12/149杀细胞效应病毒在宿主细胞内增殖导致细胞2022/12/1510病毒释放、细胞裂解溶细胞型释放细胞裂解破坏！2022/12/1410病毒释放、细胞裂解溶细胞型释放细胞裂2022/12/1511细胞病变作用（cytopathiceffect,CPE）：

病毒大量复制过程中可损伤细胞核、细胞膜、内质网、线粒体，导致细胞裂解死亡。在体外实验中，通过细胞培养和接种杀细胞性病毒后，可用显微镜观察到细胞变圆、坏死，从瓶壁脱落等现象。

杀细胞效应在体外实验中通过细胞的病理改变（CPE）来反映2022/12/1411细胞病变作用（cytopathic体外实验：作为病毒增殖指标（细胞病变cytopathiceffect,CPE)正常细胞体外实验：作为病毒增殖指标（细胞病变cytopathic感染病毒后细胞病变（CPE）如发生在体内，后果？感染病毒后细胞病变（CPE）如发生在体内，后果？2.稳定状态感染：

steadystateinfection

有包膜病毒感染病毒以出芽方式释放病毒在细胞内增殖细胞仍分裂繁殖。2.稳定状态感染：有包膜病毒释放方式

稳定型释放—出芽

不破坏细胞，但可使细胞表面出现病毒抗原---靶细胞有包膜病毒释放方式

稳定型释放—出芽

不破坏细胞，但可使细胞细胞无明显病变，但有重要病理意义细胞膜上出现新抗原感染细胞易受免疫系统攻击靶细胞细胞融合形成多核巨细胞诊断意义细胞无明显病变，但有重要病理意义细胞膜上出现新抗原感染细胞易供分离病毒、检出核酸及抗原的标本：2、潜伏感染latentinfection毒螺旋体、弓形体、淋潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹病毒侵入机体的三大重要门户（二）、常规分离与鉴定某些病毒感染后可潜伏于细胞内，与机体处于平衡状态，无临床症状。非中和抗体---近期感染指标，ADCC作用、清除病毒感染靶细胞一、病毒感染的检查方法有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。针对病毒某些表面抗原的抗体，能与细胞外游离病毒结合，阻止病毒吸附易感细胞，消除病毒感染性有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。IgG、IgM、SIgAIFN的诱生和作用示意图类型途径微生物性疾病核酸探针（probe）是指能与特定核酸序列发生特异性互补的已知核酸片段，可检测待检样品中特定的基因顺序。感染细胞的培养液中有许多游离病毒存在，具有凝集红细胞的作用病毒材料采集与检验结果的关系脊髓灰质炎病毒、其他肠道病毒等3、细胞内形成包涵体包涵体（inclusionbody）病毒感染的细胞浆内/核内，出现的光镜下可见的圆形或椭圆形斑块，可作为病毒感染的依据。狂犬病毒包涵体---内基小体巨细胞病毒包涵体供分离病毒、检出核酸及抗原的标本：3、细胞内形成包涵体包涵体4.细胞凋亡（apoptosis)：

基因控制的程序性死亡，是正常的生物学现象。病毒感染可启动细胞凋亡基因，导致细胞凋亡。如HIV感染导致免疫细胞凋亡，引起免疫细胞破坏，出现病理损伤。4.细胞凋亡（apoptosis)：2022/12/15195.基因整合与细胞转化

某些DNA病毒和逆转录病毒在感染中可将基因整合于宿主细胞基因组中，导致细胞转化，增殖变快，失去细胞间接触抑制，细胞转化也可由病毒蛋白诱导发生。基因整合或其他机制引起的细胞转化与肿瘤形成密切相关。2022/12/14195.基因整合与细胞转化免疫损伤在病毒性疾病中起重要作用1.抗体介导的免疫病理作用

Ⅱ型(细胞溶解型）超敏反应

Ⅲ型（免疫复合物型）超敏反应2.细胞介导的免疫病理作用

Ⅳ型（迟发型）超敏反应3.细胞因子的病理作用

过量细胞因子释放可致严重病理反应4.免疫抑制作用病毒感染后抑制免疫功能-AIDS（二）病毒感染的免疫病理作用免疫损伤在病毒性疾病中起重要作用1.抗体介导的免疫病理作用（2022/12/1521（三）病毒的免疫逃逸病毒通过逃逸免疫监视，防止免疫激活或阻止免疫反应发生等逃避免疫应答。编码特异性抑制免疫反应蛋白质逃避免疫形成合胞体使病毒在细胞间传播逃避抗体作用2022/12/1421（三）病毒的免疫逃逸病毒通过逃逸免疫三、病毒感染的类型

根据有无临床症状：隐性感染和显性感染根据病毒在体内感染的过程、滞留的时间

：

急性病毒感染和持续性病毒感染

急性病毒感染（病原消灭型感染）持续性病毒感染

潜伏感染

慢性感染

慢发病毒感染

急性病毒感染的迟发并发症

三、病毒感染的类型根据有无临床症状：隐性感染和显性感染（三）持续性病毒感染类型1、慢性感染chronicinfection2、潜伏感染latentinfection3、慢发病毒感染slowvirusinfection4、急性病毒感染的迟发并发症delayedcomplicationafteracuteviralinfection（三）持续性病毒感染类型慢性感染(chronicinfection)急性感染后病毒未完全消除，病毒持续性存在于体内并排出，可有/无临床症状并反复发作。（慢性肝炎）潜伏感染（latentinfection

）某些病毒感染后可潜伏于细胞内，与机体处于平衡状态，无临床症状。但在一定条件下，病毒被激活，出现临床症状并排出病毒。（疱疹病毒）持续性病毒感染慢性感染(chronicinfection)潜伏感染（2022/12/1525潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹2022/12/1425潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹2022/12/1526潜伏性病毒感染：带状疱疹2022/12/1426潜伏性病毒感染：带状疱疹病毒侵入机体的三大重要门户增强或抑制抗体形成及细胞免疫（依剂量和反应条件不同）病毒在宿主细胞内增殖导致细胞裂解死亡，多见于无包膜，毒性强的病毒中和抗体---清除血清中游离病毒，阻止尽早采取：发病初期、采取急性期病毒以出芽方式释放病毒感染的免疫病理作用（整体水平）有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。产后哺乳直接接触巨细胞病毒、乙病毒在细胞内增殖有些病毒能形成包涵体。甲醛可破坏对病毒的感染性而对抗原性影响不大潜伏感染（latentinfection）增强或抑制抗体形成及细胞免疫（依剂量和反应条件不同）第三节病毒感染的检查方法与防治原则病毒在宿主细胞内增殖导致细胞裂解死亡，多见于无包膜，毒性强的病毒有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。2、潜伏感染latentinfection产后哺乳直接接触巨细胞病毒、乙2022/12/1527慢发病毒感染（slowvirusinfection）为一种慢性发展并进行性加重的病毒感染。病毒感染后潜伏期较长，可达数月、数年或数十年。一旦发病，呈进行性加重，最终死亡。（HIV感染导致AIDS、库鲁病、克-雅病等）

持续性病毒感染病毒侵入机体的三大重要门户2022/12/1427慢发病毒感急性病毒感染的迟发并发症（delayedcomplicationafteracuteviralinfection）急性感染后，病毒潜伏于机体内，待数年后发生致死性中枢神经系统疾病（SSPE，亚急性硬化性全脑炎）持续性病毒感染急性病毒感染的迟发并发症（delayedcomplicat2022/12/1529第二节抗病毒免疫

非特异性免疫

干扰素

NK细胞特异性免疫

体液免疫

病毒中和抗体

血凝抑制抗体

补体结合抗体

细胞免疫

细胞毒性T细胞

CD4+Th12022/12/1429第二节抗病毒免疫非特异性免疫

2022/12/1530干扰素interferon,IFN概念：由病毒或其他干扰素诱生剂刺激人或动物细胞所产生的具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等多种活性作用的糖蛋白

诱生剂：病毒、细菌内毒素、polyI:C等性质：小分子糖蛋白，56℃30min灭活，

pH2-10稳定有一定抗原性2022/12/1430干扰素interferon,2022/12/1531分型T淋巴细胞成纤维细胞白细胞产生细胞弱强抗病毒强弱抗肿瘤强γⅡ

(免疫干扰素)β弱αⅠ免疫调节抗原类别型别2022/12/1431分型T淋巴细胞成纤维细胞白细胞产生细2022/12/1532INF抗病毒活性：

不直接灭活病毒，通过诱导细胞合成抗病毒蛋白（antiviralprotein,AVP）发挥效应作用迅速，感染后数小时即产生

AVP是酶类，故作用无特异性2022/12/1432INF抗病毒活性：2022/12/1533IFN的诱生和作用示意图2022/12/1433IFN的诱生和作用示意图2022/12/1534AVP种类及作用：

①腺嘌呤核苷合成酶（2’-5’A合成酶）：激活细胞内核酸酶，降解病毒mRNA②蛋白激酶（PKR）：使病毒蛋白转释超始因子磷酸化，阻止病毒蛋白质合成2022/12/1434AVP种类及作用：2022/12/1535干扰素抑制病毒蛋白翻译的两种途径示意图激活核酸酶2022/12/1435干扰素抑制病毒蛋白翻译的两种途径示意2022/12/1536间接性、广谱性（非特异性）、种属特异性、早期中断病毒复制，阻止感染扩散抗病毒作用特点抗病毒作用意义抗病毒免疫2022/12/1436间接性、广谱性（非特异性）、种属特异2.体外实验：作为病毒增殖指标（细胞病变cytopathiceffect,CPE)按种类：IgGIgMIgA过量细胞因子释放可致严重病理反应（HIV感染导致AIDS、库鲁病、克-雅病等）病毒感染后抑制免疫功能-AIDS②酶联免疫吸附试验（ELISA）病毒感染后抑制免疫功能-AIDS作用迅速，感染后数小时即产生根据有无临床症状：隐性感染和显性感染部位适宜：由感染部位采取处于悬浮状态产前胎盘风疹、巨细胞病毒、梅潜伏性病毒感染：带状疱疹生殖细胞人基因组含病毒DNA多种反转录病毒围产期已感染的产道衣原体改变病毒表面构型，阻止病毒吸附、侵入易感细胞病毒感染的免疫病理作用（整体水平）有包膜病毒感染改变病毒表面构型，阻止病毒吸附、侵入易感细胞2022/12/1537抗肿瘤抑制肿瘤细胞的DNA合成和有丝分裂去除组织相容性抗原的表达，使肿瘤细胞向正常细胞转化免疫调节增强或抑制抗体形成及细胞免疫（依剂量和反应条件不同）增强Mφ、NK、CTL功能，促进IL分泌干扰素的其它作用（INF-γ）2.2022/12/1437抗肿瘤免疫调节干扰素的其它作用（2022/12/1538

NK作用特点：

非MHC限制性、非特异性ADCC作用、清除病毒感染靶细胞INF-γ可激活NK细胞活性抗病毒免疫

NK细胞2022/12/1438NK作用特点：

非MHC限制性、非2022/12/1539二、特异性免疫按种类：IgGIgMIgA体液免疫：按功能：中和抗体、血凝抑制抗体、补体结合抗体---内部抗原抗体抗病毒免疫外部抗原抗体2022/12/1439二、特异性免疫按种类：IgGI2022/12/1540外部抗原内部抗原2022/12/1440外部抗原内部抗原2022/12/1541血凝素2022/12/1441血凝素2022/12/1542中和抗体：针对病毒某些表面抗原的抗体，能与细胞外游离病毒结合，阻止病毒吸附易感细胞，消除病毒感染性IgG、IgM、SIgA作用机制：直接封闭与细胞受体结合的病毒抗原表位改变病毒表面构型，阻止病毒吸附、侵入易感细胞2022/12/1442中和抗体：针对病毒某些表面抗原的抗体2022/12/1543血凝抑制抗体：针对病毒包膜上血凝素刺突的抗体，可消除病毒感染性

补体结合抗体----非中和抗体病毒内部抗原刺激机体产生的抗体，一般不能中和病毒、清除感染；但可作为血清学诊断的标准2022/12/1443血凝抑制抗体：针对病毒包膜上血凝素2022/12/1544体液免疫在抗病毒感染中作用：

中和抗体---清除血清中游离病毒，阻止感染发生，防止感染扩散预防疾病、阻止扩散非中和抗体---近期感染指标，病毒感染诊断2022/12/1444体液免疫在抗病毒感染中作用：

中和抗2022/12/1545细胞免疫：抗病毒感染中起重要作用

CD8+T细胞（细胞毒性T细胞CTL）

特异性直接杀伤感染病毒的靶细胞CD4+T细胞（Th1）释放多种细胞因子，发挥细胞免疫效应2022/12/1445细胞免疫：抗病毒感染中起重要作用C2022/12/15462022/12/1446急性感染后病毒未完全消除，病毒持续性存在于体内并排出，可有/无临床症状并反复发作。不直接灭活病毒，通过诱导细胞合成抗病毒蛋白（antiviralprotein,AVP）发挥效应感染细胞具有吸附红细胞的能力清除感染病毒的靶细胞，垂直传播方式及常见微生物性疾病增强Mφ、NK、CTL功能，促进IL分泌急性病毒感染（病原消灭型感染）毒螺旋体、弓形体、淋尽早采取：发病初期、采取急性期潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹病毒在细胞内增殖IFN的诱生和作用示意图甲醛可破坏对病毒的感染性而对抗原性影响不大污染血或血制品污染注射器CD4+T细胞（Th1）（二）、常规分离与鉴定补体结合抗体---内部抗原抗体②酶联免疫吸附试验（ELISA）围产期已感染的产道衣原体针对病毒某些表面抗原的抗体，能与细胞外游离病毒结合，阻止病毒吸附易感细胞，消除病毒感染性2022/12/1547免疫应答的类型和过程示意图急性感染后病毒未完全消除，病毒持续性存在于体内并排出，可有/2022/12/1548免疫病理损害:

迟发型超敏反应,自身免疫病;病毒为细胞内感染的微生物清除感染病毒的靶细胞，彻底清除病毒感染，主要依靠细胞免疫抗病毒免疫2022/12/1448免疫病理损害:病毒为细胞内感染的微2022/12/1549第三节病毒感染的检查方法与防治原则一、病毒感染的检查方法（一）、标本采集与送检：供分离病毒、检出核酸及抗原的标本：血清学诊断的标本：

原则：1.尽早采取：发病初期、采取急性期

2.部位适宜：由感染部位采取

3.冷藏速送：装有冰块或干冰的容器内防止病毒灭活双份血清，4-20℃保存2022/12/1449第三节病毒感染的检查方法与防治原则2022/12/1550病毒材料采集与检验结果的关系采取标本的时期检查病毒及其成分测定抗体潜伏期及前驱期刚发病或急性期恢复期及康复期较难查见最多查见很难查见未增多未增多或增多不明显明显增多（常超过4倍）2022/12/1450病毒材料采集与检验结果的关系采取标本2022/12/1551理化因素对病毒的影响温度：病毒在pH5.0以下或pH9.0以上迅速灭活射线：大多大多病毒耐冷不耐热，但有例外的，如HBV等pH：γ射线，χ射线，紫外线多能使病毒灭活2022/12/1451理化因素对病毒的影响温度：病毒在pH2022/12/1552化学因素：氧化剂，卤素及其他化合物有灭活病毒的功能脂溶剂可破坏有包膜的病毒酚类可除去病毒衣壳蛋白甲醛可破坏对病毒的感染性而对抗原性影响不大2022/12/1452化学因素：氧化剂，卤素及其他化合物有2022/12/1553（二）、常规分离与鉴定动物接种-动物模型鸡胚接种组织培养器官培养移植培养

细胞培养

原代细胞培养二倍体细胞培养传代细胞培养三大培养方法2022/12/1453（二）、常规分离与鉴定动物接种-动物2022/12/1554病毒分离是诊断病毒感染的金标准，一旦阳性，即可确诊。不适用于快速诊断，操作复杂，实验成本高，阳性检出率低等有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。2022/12/1454病毒分离是诊断病毒感染的金标准，一旦2022/12/15551、病毒分离标本采集杀灭杂菌（青链霉素）接种鉴定病毒种型易感动物出现病状鸡胚病变或死亡细胞培养细胞病变三大方法2022/12/14551、病毒分离标本采集杀灭杂菌接种鉴定2022/12/15562、病毒鉴定（1）.形态学鉴定观察CPE。常见的细胞形态学变化为细胞变圆、坏死、溶解、脱落或形成合胞体。有些病毒能形成包涵体。正常细胞病变细胞2022/12/14562、病毒鉴定（1）.形态学鉴定观察病毒通过逃逸免疫监视，防止免疫激活或阻止免疫反应发生等逃避免疫应答。多见于以出芽方式释放的病毒。代传播给子代的方式。供分离病毒、检出核酸及抗原的标本：按种类：IgGIgMIgA通过呼吸道、消化道、皮肤粘膜但在一定条件下，病毒被激活，出现临床症状并排出病毒。缺点：敏感性低，要求病毒量在107以上；（HIV感染导致AIDS、库鲁病、克-雅病等）产前胎盘风疹、巨细胞病毒、梅甲醛可破坏对病毒的感染性而对抗原性影响不大间接性、广谱性（非特异性）、种属特异性、病毒在宿主细胞内增殖导致细胞裂解死亡，多见于无包膜，毒性强的病毒特异性免疫

体液免疫

病毒中和抗体

血凝抑制抗体

补体结合抗体

细胞免疫

细胞毒性T细胞

CD4+Th1尽早采取：发病初期、采取急性期病毒通过逃逸免疫监视，防止免疫激活或阻止免疫反应发生等逃避免疫应答。病毒感染后潜伏期较长，可达数月、数年或数十年。具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节尽早采取：发病初期、采取急性期不破坏细胞，但可使细胞表面出现病毒抗原---靶细胞2022/12/1557感染细胞具有吸附红细胞的能力感染细胞的培养液中有许多游离病毒存在，具有凝集红细胞的作用（2）.血吸附和血凝作用多见于以出芽方式释放的病毒。病毒通过逃逸免疫监视，防止免疫激活或阻止免疫反应发生等逃避免2022/12/1558红细胞吸附正常细胞①血吸附作用吸附试验可通过特异抗血清抑制来达到鉴定具有吸附特性的病毒2022/12/1458红细胞吸附正常细胞①血吸附作用吸附2022/12/1559②血凝作用血凝试验血凝抑制试验2022/12/1459②血凝作用血凝试验血凝抑制试验2022/12/1560（3）病毒成分的直接检测

用免疫学或分子生物学技术直接检查感染细胞或其上清液中病毒抗原（或核酸）。2022/12/1460（3）病毒成分的直接检测用免疫2022/12/1561病毒的快速诊断光镜-----包涵体电镜免疫荧光ELISA分子生物学技术杂交SouthernblotPCRNorthernblot2022/12/1461病毒的快速诊断光镜-----包涵体电2022/12/1562①

电子显微镜检查

病毒的很多特征如大小、形态、结构等必须借助电子显微镜进行检查。对于目前尚难培养而形态又非常典型的病毒，可直接从感染组织或分泌液，或者接种病料的鸡胚和细胞培养收获的材料作电子显微镜检查，直接观察病毒粒子。正染法：超薄切片法优点：可观察病毒形态和形态发生过程缺点：操作复杂，费时，但标本可长时间保存优点：快速简易（10-20min）；分辨率高；图象清晰缺点：敏感性低，要求病毒量在107以上；所有样品应处于悬浮状态负染技术2022/12/1462①电子显微镜检查2022/12/1563②酶联免疫吸附试验（ELISA）

将已知的抗体或抗原结合在某种固相裁体上，并保持其免疫活性。测定时，将待检标本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应。然后加入酶的作用底物催化显色，进行定性或定量测定。2022/12/1463②酶联免疫吸附试验（ELIS2022/12/1564间接ELISA2022/12/1464间接ELISA2022/12/1565夹心ELISA2022/12/1465夹心ELISA2022/12/15663′3′5′5′3′3′3′3′3′3′5′5′5′5′5′5′3′3′5′5′3′3′5′5′模板DNA双链形成新的双链DNA退火变性③聚合酶链反应（PCR）2022/12/14663′3′5′5′3′3′3′3′3′2022/12/1567④核酸杂交技术核酸探针（probe）是指能与特定核酸序列发生特异性互补的已知核酸片段，可检测待检样品中特定的基因顺序。2022/12/1467④核酸杂交技术核酸探针（pro2022/12/1568

二、病毒的血清学诊断中和试验补体结合试验血凝抑制试验免疫扩散等2022/12/1468二、病毒的血清学诊断中和试验补体结合2022/12/1569virus1、中和反应

观察特异性抗体能否保护易感的试验动物死亡，能否抑制病毒的细胞病变效应。凡能与病毒结合，使其失去感染力的抗体又称中和抗体。2022/12/1469virus1、中和反应观察特异2022/12/15702、免疫扩散

2022/12/14702、免疫扩散2022/12/1571三、病毒感染的防治免疫预防人工主动免疫灭活疫苗：乙脑疫苗狂犬疫苗流感灭活疫苗HAV等减毒活疫苗：脊髓灰质炎疫苗麻疹疫苗腮腺炎疫苗风疹疫苗HAV疫苗

其他疫苗：基因工程疫苗，核酸疫苗，亚单位疫苗等2022/12/1471三、病毒感染的防治免疫预防人工主动免2022/12/1572药物防治金刚烷胺-------抑制病毒脱壳-----预防感冒

核苷类药物病毒蛋白酶的抑制物----indinavir其他-----干扰素及干扰素诱生剂，中草药抗病毒基因治疗----asODN，asON，核酶------疱疹净，阿昔洛韦，AZT抗病毒药物特异性抗体治疗性疫苗免疫制剂2022/12/1472药物防治金刚烷胺-------抑制病2022/12/1573第一节病毒的致病作用

一、病毒感染传播方式二、病毒感染致病机制

三、病毒感染的类型

四、病毒感染与肿瘤

2022/12/1473第一节病毒的致病作用一、病毒感2022/12/1574

产前

胎盘

风疹、巨细胞病毒、梅

毒螺旋体、弓形体、淋

病奈瑟菌

围产期

已感染的产道

衣原体产后

哺乳

直接接触巨细胞病毒、乙

型肝炎病毒

生殖细胞人基因组含病毒DNA多种反转录病毒垂直传播方式及常见微生物性疾病类型

途径

微生物性疾病2022/12/1474产前三、病毒感染的类型

根据有无临床症状：隐性感染和显性感染根据病毒在体内感染的过程、滞留的时间

：

急性病毒感染和持续性病毒感染

急性病毒感染（病原消灭型感染）持续性病毒感染

潜伏感染

慢性感染

慢发病毒感染

急性病毒感染的迟发并发症

三、病毒感染的类型根据有无临床症状：隐性感染和显性感染2022/12/1576二、特异性免疫按种类：IgGIgMIgA体液免疫：按功能：中和抗体、血凝抑制抗体、补体结合抗体---内部抗原抗体抗病毒免疫外部抗原抗体2022/12/1476二、特异性免疫按种类：IgGI急性感染后病毒未完全消除，病毒持续性存在于体内并排出，可有/无临床症状并反复发作。抑制肿瘤细胞的DNA合成和有丝分裂类型途径微生物性疾病部位适宜：由感染部位采取②酶联免疫吸附试验（ELISA）IgG、IgM、SIgA病毒为细胞内感染的微生物脑炎病毒、出血热病毒等补体结合抗体---内部抗原抗体按种类：IgGIgMIgA病奈瑟菌（二）、常规分离与鉴定产前胎盘风疹、巨细胞病毒、梅为一种慢性发展并进行性加重的病毒感染。2、潜伏感染latentinfection有些病毒能形成包涵体。IFN的诱生和作用示意图病毒侵入机体的三大重要门户四、病毒感染与肿瘤产前胎盘风疹、巨细胞病毒、梅2022/12/1577中和抗体：针对病毒某些表面抗原的抗体，能与细胞外游离病毒结合，阻止病毒吸附易感细胞，消除病毒感染性IgG、IgM、SIgA作用机制：直接封闭与细胞受体结合的病毒抗原表位改变病毒表面构型，阻止病毒吸附、侵入易感细胞急性感染后病毒未完全消除，病毒持续性存在于体内并排出，可有/2022/12/1578细胞免疫：抗病毒感染中起重要作用

CD8+T细胞（细胞毒性T细胞CTL）

特异性直接杀伤感染病毒的靶细胞CD4+T细胞（Th1）释放多种细胞因子，发挥细胞免疫效应2022/12/1478细胞免疫：抗病毒感染中起重要作用C2022/12/1579第三节病毒感染的检查方法与防治原则一、病毒感染的检查方法（一）、标本采集与送检：供分离病毒、检出核酸及抗原的标本：血清学诊断的标本：

原则：1.尽早采取：发病初期、采取急性期

2.部位适宜：由感染部位采取

3.冷藏速送：装有冰块或干冰的容器内防止病毒灭活双份血清，4-20℃保存2022/12/1479第三节病毒感染的检查方法与防治原则2022/12/1580（二）、常规分离与鉴定动物接种-动物模型鸡胚接种组织培养器官培养移植培养

细胞培养

原代细胞培养二倍体细胞培养传代细胞培养三大培养方法2022/12/1480（二）、常规分离与鉴定动物接种-动物2022/12/1581第一节病毒的致病作用

一、病毒感染传播方式二、病毒感染致病机制

三、病毒感染的类型

四、病毒感染与肿瘤

2022/12/141第一节病毒的致病作用一、病毒感染2022/12/1582传播途径同细菌；吸入是最常见的病毒感染途径；多数病毒以一种方式进入宿主机体，也可见以多途径感染的方式感染机体的病毒。2022/12/142传播途径同细菌；2022/12/1583

人类病毒的感染途径主要感染途径传播方式及途径病毒种类呼吸道空气、飞沫或皮屑流感病毒、鼻病毒等消化道污染水或食品脊髓灰质炎病毒、其他肠道病毒等输血、注射或器官移植污染血或血制品污染注射器HIV、乙型肝炎病毒等眼或泌尿生殖道接触、游泳池、性交HIV、疱疹病毒1、2型等经胎盘、围产期宫内、分娩产道、哺乳等乙肝病毒、HIV等破损皮肤昆虫叮咬、狂犬、鼠类脑炎病毒、出血热病毒等2022/12/143人类病毒的感染途径主要感染途径传播方2022/12/1584病毒的传播方式水平传播：病毒在人群中个体间的传播通过呼吸道、消化道、皮肤粘膜病毒侵入机体的三大重要门户2022/12/144病毒的传播方式水平传播：病毒在人群中个2022/12/1585

垂直传播：通过胎盘、产道、乳汁，病毒由亲代传播给子代的方式。胎盘、产道

乳汁2022/12/145

垂直传播：通过胎盘、产道、乳汁，病毒2022/12/1586

产前

胎盘

风疹、巨细胞病毒、梅

毒螺旋体、弓形体、淋

病奈瑟菌

围产期

已感染的产道

衣原体产后

哺乳

直接接触巨细胞病毒、乙

型肝炎病毒

生殖细胞人基因组含病毒DNA多种反转录病毒垂直传播方式及常见微生物性疾病类型

途径

微生物性疾病2022/12/146产前胎二、病毒的致病机制病毒感染对宿主细胞的致病作用（细胞水平）病毒感染的免疫病理作用（整体水平）二、病毒的致病机制病毒感染对宿主细胞的致病作用（细胞水平2022/12/1588（一）对宿主细胞的致病作用杀细胞效应

稳定状态感染

包涵体形成

细胞凋亡

基因整合与细胞转化2022/12/148（一）对宿主细胞的致病作用杀细胞效应2022/12/1589杀细胞效应病毒在宿主细胞内增殖导致细胞裂解死亡，多见于无包膜，毒性强的病毒2022/12/149杀细胞效应病毒在宿主细胞内增殖导致细胞2022/12/1590病毒释放、细胞裂解溶细胞型释放细胞裂解破坏！2022/12/1410病毒释放、细胞裂解溶细胞型释放细胞裂2022/12/1591细胞病变作用（cytopathiceffect,CPE）：

病毒大量复制过程中可损伤细胞核、细胞膜、内质网、线粒体，导致细胞裂解死亡。在体外实验中，通过细胞培养和接种杀细胞性病毒后，可用显微镜观察到细胞变圆、坏死，从瓶壁脱落等现象。

杀细胞效应在体外实验中通过细胞的病理改变（CPE）来反映2022/12/1411细胞病变作用（cytopathic体外实验：作为病毒增殖指标（细胞病变cytopathiceffect,CPE)正常细胞体外实验：作为病毒增殖指标（细胞病变cytopathic感染病毒后细胞病变（CPE）如发生在体内，后果？感染病毒后细胞病变（CPE）如发生在体内，后果？2.稳定状态感染：

steadystateinfection

有包膜病毒感染病毒以出芽方式释放病毒在细胞内增殖细胞仍分裂繁殖。2.稳定状态感染：有包膜病毒释放方式

稳定型释放—出芽

不破坏细胞，但可使细胞表面出现病毒抗原---靶细胞有包膜病毒释放方式

稳定型释放—出芽

不破坏细胞，但可使细胞细胞无明显病变，但有重要病理意义细胞膜上出现新抗原感染细胞易受免疫系统攻击靶细胞细胞融合形成多核巨细胞诊断意义细胞无明显病变，但有重要病理意义细胞膜上出现新抗原感染细胞易供分离病毒、检出核酸及抗原的标本：2、潜伏感染latentinfection毒螺旋体、弓形体、淋潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹病毒侵入机体的三大重要门户（二）、常规分离与鉴定某些病毒感染后可潜伏于细胞内，与机体处于平衡状态，无临床症状。非中和抗体---近期感染指标，ADCC作用、清除病毒感染靶细胞一、病毒感染的检查方法有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。针对病毒某些表面抗原的抗体，能与细胞外游离病毒结合，阻止病毒吸附易感细胞，消除病毒感染性有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。IgG、IgM、SIgAIFN的诱生和作用示意图类型途径微生物性疾病核酸探针（probe）是指能与特定核酸序列发生特异性互补的已知核酸片段，可检测待检样品中特定的基因顺序。感染细胞的培养液中有许多游离病毒存在，具有凝集红细胞的作用病毒材料采集与检验结果的关系脊髓灰质炎病毒、其他肠道病毒等3、细胞内形成包涵体包涵体（inclusionbody）病毒感染的细胞浆内/核内，出现的光镜下可见的圆形或椭圆形斑块，可作为病毒感染的依据。狂犬病毒包涵体---内基小体巨细胞病毒包涵体供分离病毒、检出核酸及抗原的标本：3、细胞内形成包涵体包涵体4.细胞凋亡（apoptosis)：

基因控制的程序性死亡，是正常的生物学现象。病毒感染可启动细胞凋亡基因，导致细胞凋亡。如HIV感染导致免疫细胞凋亡，引起免疫细胞破坏，出现病理损伤。4.细胞凋亡（apoptosis)：2022/12/15995.基因整合与细胞转化

某些DNA病毒和逆转录病毒在感染中可将基因整合于宿主细胞基因组中，导致细胞转化，增殖变快，失去细胞间接触抑制，细胞转化也可由病毒蛋白诱导发生。基因整合或其他机制引起的细胞转化与肿瘤形成密切相关。2022/12/14195.基因整合与细胞转化免疫损伤在病毒性疾病中起重要作用1.抗体介导的免疫病理作用

Ⅱ型(细胞溶解型）超敏反应

Ⅲ型（免疫复合物型）超敏反应2.细胞介导的免疫病理作用

Ⅳ型（迟发型）超敏反应3.细胞因子的病理作用

过量细胞因子释放可致严重病理反应4.免疫抑制作用病毒感染后抑制免疫功能-AIDS（二）病毒感染的免疫病理作用免疫损伤在病毒性疾病中起重要作用1.抗体介导的免疫病理作用（2022/12/15101（三）病毒的免疫逃逸病毒通过逃逸免疫监视，防止免疫激活或阻止免疫反应发生等逃避免疫应答。编码特异性抑制免疫反应蛋白质逃避免疫形成合胞体使病毒在细胞间传播逃避抗体作用2022/12/1421（三）病毒的免疫逃逸病毒通过逃逸免疫三、病毒感染的类型

根据有无临床症状：隐性感染和显性感染根据病毒在体内感染的过程、滞留的时间

：

急性病毒感染和持续性病毒感染

急性病毒感染（病原消灭型感染）持续性病毒感染

潜伏感染

慢性感染

慢发病毒感染

急性病毒感染的迟发并发症

三、病毒感染的类型根据有无临床症状：隐性感染和显性感染（三）持续性病毒感染类型1、慢性感染chronicinfection2、潜伏感染latentinfection3、慢发病毒感染slowvirusinfection4、急性病毒感染的迟发并发症delayedcomplicationafteracuteviralinfection（三）持续性病毒感染类型慢性感染(chronicinfection)急性感染后病毒未完全消除，病毒持续性存在于体内并排出，可有/无临床症状并反复发作。（慢性肝炎）潜伏感染（latentinfection

）某些病毒感染后可潜伏于细胞内，与机体处于平衡状态，无临床症状。但在一定条件下，病毒被激活，出现临床症状并排出病毒。（疱疹病毒）持续性病毒感染慢性感染(chronicinfection)潜伏感染（2022/12/15105潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹2022/12/1425潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹2022/12/15106潜伏性病毒感染：带状疱疹2022/12/1426潜伏性病毒感染：带状疱疹病毒侵入机体的三大重要门户增强或抑制抗体形成及细胞免疫（依剂量和反应条件不同）病毒在宿主细胞内增殖导致细胞裂解死亡，多见于无包膜，毒性强的病毒中和抗体---清除血清中游离病毒，阻止尽早采取：发病初期、采取急性期病毒以出芽方式释放病毒感染的免疫病理作用（整体水平）有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。产后哺乳直接接触巨细胞病毒、乙病毒在细胞内增殖有些病毒能形成包涵体。甲醛可破坏对病毒的感染性而对抗原性影响不大潜伏感染（latentinfection）增强或抑制抗体形成及细胞免疫（依剂量和反应条件不同）第三节病毒感染的检查方法与防治原则病毒在宿主细胞内增殖导致细胞裂解死亡，多见于无包膜，毒性强的病毒有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。2、潜伏感染latentinfection产后哺乳直接接触巨细胞病毒、乙2022/12/15107慢发病毒感染（slowvirusinfection）为一种慢性发展并进行性加重的病毒感染。病毒感染后潜伏期较长，可达数月、数年或数十年。一旦发病，呈进行性加重，最终死亡。（HIV感染导致AIDS、库鲁病、克-雅病等）

持续性病毒感染病毒侵入机体的三大重要门户2022/12/1427慢发病毒感急性病毒感染的迟发并发症（delayedcomplicationafteracuteviralinfection）急性感染后，病毒潜伏于机体内，待数年后发生致死性中枢神经系统疾病（SSPE，亚急性硬化性全脑炎）持续性病毒感染急性病毒感染的迟发并发症（delayedcomplicat2022/12/15109第二节抗病毒免疫

非特异性免疫

干扰素

NK细胞特异性免疫

体液免疫

病毒中和抗体

血凝抑制抗体

补体结合抗体

细胞免疫

细胞毒性T细胞

CD4+Th12022/12/1429第二节抗病毒免疫非特异性免疫

2022/12/15110干扰素interferon,IFN概念：由病毒或其他干扰素诱生剂刺激人或动物细胞所产生的具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等多种活性作用的糖蛋白

诱生剂：病毒、细菌内毒素、polyI:C等性质：小分子糖蛋白，56℃30min灭活，

pH2-10稳定有一定抗原性2022/12/1430干扰素interferon,2022/12/15111分型T淋巴细胞成纤维细胞白细胞产生细胞弱强抗病毒强弱抗肿瘤强γⅡ

(免疫干扰素)β弱αⅠ免疫调节抗原类别型别2022/12/1431分型T淋巴细胞成纤维细胞白细胞产生细2022/12/15112INF抗病毒活性：

不直接灭活病毒，通过诱导细胞合成抗病毒蛋白（antiviralprotein,AVP）发挥效应作用迅速，感染后数小时即产生

AVP是酶类，故作用无特异性2022/12/1432INF抗病毒活性：2022/12/15113IFN的诱生和作用示意图2022/12/1433IFN的诱生和作用示意图2022/12/15114AVP种类及作用：

①腺嘌呤核苷合成酶（2’-5’A合成酶）：激活细胞内核酸酶，降解病毒mRNA②蛋白激酶（PKR）：使病毒蛋白转释超始因子磷酸化，阻止病毒蛋白质合成2022/12/1434AVP种类及作用：2022/12/15115干扰素抑制病毒蛋白翻译的两种途径示意图激活核酸酶2022/12/1435干扰素抑制病毒蛋白翻译的两种途径示意2022/12/15116间接性、广谱性（非特异性）、种属特异性、早期中断病毒复制，阻止感染扩散抗病毒作用特点抗病毒作用意义抗病毒免疫2022/12/1436间接性、广谱性（非特异性）、种属特异2.体外实验：作为病毒增殖指标（细胞病变cytopathiceffect,CPE)按种类：IgGIgMIgA过量细胞因子释放可致严重病理反应（HIV感染导致AIDS、库鲁病、克-雅病等）病毒感染后抑制免疫功能-AIDS②酶联免疫吸附试验（ELISA）病毒感染后抑制免疫功能-AIDS作用迅速，感染后数小时即产生根据有无临床症状：隐性感染和显性感染部位适宜：由感染部位采取处于悬浮状态产前胎盘风疹、巨细胞病毒、梅潜伏性病毒感染：带状疱疹生殖细胞人基因组含病毒DNA多种反转录病毒围产期已感染的产道衣原体改变病毒表面构型，阻止病毒吸附、侵入易感细胞病毒感染的免疫病理作用（整体水平）有包膜病毒感染改变病毒表面构型，阻止病毒吸附、侵入易感细胞2022/12/15117抗肿瘤抑制肿瘤细胞的DNA合成和有丝分裂去除组织相容性抗原的表达，使肿瘤细胞向正常细胞转化免疫调节增强或抑制抗体形成及细胞免疫（依剂量和反应条件不同）增强Mφ、NK、CTL功能，促进IL分泌干扰素的其它作用（INF-γ）2.2022/12/1437抗肿瘤免疫调节干扰素的其它作用（2022/12/15118

NK作用特点：

非MHC限制性、非特异性ADCC作用、清除病毒感染靶细胞INF-γ可激活NK细胞活性抗病毒免疫

NK细胞2022/12/1438NK作用特点：

非MHC限制性、非2022/12/15119二、特异性免疫按种类：IgGIgMIgA体液免疫：按功能：中和抗体、血凝抑制抗体、补体结合抗体---内部抗原抗体抗病毒免疫外部抗原抗体2022/12/1439二、特异性免疫按种类：IgGI2022/12/15120外部抗原内部抗原2022/12/1440外部抗原内部抗原2022/12/15121血凝素2022/12/1441血凝素2022/12/15122中和抗体：针对病毒某些表面抗原的抗体，能与细胞外游离病毒结合，阻止病毒吸附易感细胞，消除病毒感染性IgG、IgM、SIgA作用机制：直接封闭与细胞受体结合的病毒抗原表位改变病毒表面构型，阻止病毒吸附、侵入易感细胞2022/12/1442中和抗体：针对病毒某些表面抗原的抗体2022/12/15123血凝抑制抗体：针对病毒包膜上血凝素刺突的抗体，可消除病毒感染性

补体结合抗体----非中和抗体病毒内部抗原刺激机体产生的抗体，一般不能中和病毒、清除感染；但可作为血清学诊断的标准2022/12/1443血凝抑制抗体：针对病毒包膜上血凝素2022/12/15124体液免疫在抗病毒感染中作用：

中和抗体---清除血清中游离病毒，阻止感染发生，防止感染扩散预防疾病、阻止扩散非中和抗体---近期感染指标，病毒感染诊断2022/12/1444体液免疫在抗病毒感染中作用：

中和抗2022/12/15125细胞免疫：抗病毒感染中起重要作用

CD8+T细胞（细胞毒性T细胞CTL）

特异性直接杀伤感染病毒的靶细胞CD4+T细胞（Th1）释放多种细胞因子，发挥细胞免疫效应2022/12/1445细胞免疫：抗病毒感染中起重要作用C2022/12/151262022/12/1446急性感染后病毒未完全消除，病毒持续性存在于体内并排出，可有/无临床症状并反复发作。不直接灭活病毒，通过诱导细胞合成抗病毒蛋白（antiviralprotein,AVP）发挥效应感染细胞具有吸附红细胞的能力清除感染病毒的靶细胞，垂直传播方式及常见微生物性疾病增强Mφ、NK、CTL功能，促进IL分泌急性病毒感染（病原消灭型感染）毒螺旋体、弓形体、淋尽早采取：发病初期、采取急性期潜伏感染：单纯疱疹病毒引发唇疱疹病毒在细胞内增殖IFN的诱生和作用示意图甲醛可破坏对病毒的感染性而对抗原性影响不大污染血或血制品污染注射器CD4+T细胞（Th1）（二）、常规分离与鉴定补体结合抗体---内部抗原抗体②酶联免疫吸附试验（ELISA）围产期已感染的产道衣原体针对病毒某些表面抗原的抗体，能与细胞外游离病毒结合，阻止病毒吸附易感细胞，消除病毒感染性2022/12/15127免疫应答的类型和过程示意图急性感染后病毒未完全消除，病毒持续性存在于体内并排出，可有/2022/12/15128免疫病理损害:

迟发型超敏反应,自身免疫病;病毒为细胞内感染的微生物清除感染病毒的靶细胞，彻底清除病毒感染，主要依靠细胞免疫抗病毒免疫2022/12/1448免疫病理损害:病毒为细胞内感染的微2022/12/15129第三节病毒感染的检查方法与防治原则一、病毒感染的检查方法（一）、标本采集与送检：供分离病毒、检出核酸及抗原的标本：血清学诊断的标本：

原则：1.尽早采取：发病初期、采取急性期

2.部位适宜：由感染部位采取

3.冷藏速送：装有冰块或干冰的容器内防止病毒灭活双份血清，4-20℃保存2022/12/1449第三节病毒感染的检查方法与防治原则2022/12/15130病毒材料采集与检验结果的关系采取标本的时期检查病毒及其成分测定抗体潜伏期及前驱期刚发病或急性期恢复期及康复期较难查见最多查见很难查见未增多未增多或增多不明显明显增多（常超过4倍）2022/12/1450病毒材料采集与检验结果的关系采取标本2022/12/15131理化因素对病毒的影响温度：病毒在pH5.0以下或pH9.0以上迅速灭活射线：大多大多病毒耐冷不耐热，但有例外的，如HBV等pH：γ射线，χ射线，紫外线多能使病毒灭活2022/12/1451理化因素对病毒的影响温度：病毒在pH2022/12/15132化学因素：氧化剂，卤素及其他化合物有灭活病毒的功能脂溶剂可破坏有包膜的病毒酚类可除去病毒衣壳蛋白甲醛可破坏对病毒的感染性而对抗原性影响不大2022/12/1452化学因素：氧化剂，卤素及其他化合物有2022/12/15133（二）、常规分离与鉴定动物接种-动物模型鸡胚接种组织培养器官培养移植培养

细胞培养

原代细胞培养二倍体细胞培养传代细胞培养三大培养方法2022/12/1453（二）、常规分离与鉴定动物接种-动物2022/12/15134病毒分离是诊断病毒感染的金标准，一旦阳性，即可确诊。不适用于快速诊断，操作复杂，实验成本高，阳性检出率低等有时不得不分离病毒，例如发现了一种新的病毒病，必须分离病毒进行研究，或者分离株的鉴定对流行病学有很大作用（如流感病毒），或者需要培育疫苗，或者希望获得天然弱毒株等。2022/12/1454病毒分离是诊断病毒感染的金标准，一旦2022/12/151351、病毒分离标本采集杀灭杂菌（青链霉素）接种鉴定病毒种型易感动物出现病状鸡胚病变或死亡细胞培养细胞病变三大方法2022/12/14551、病毒分离标本采集杀灭杂菌接种鉴定2022/12/151362、病毒鉴定（1）.形态学鉴定观察CPE。常见的细胞形态学变化为细胞变圆、坏死、溶解、脱落或形成合胞体。有些病毒能形成包涵体。正常细胞病变细胞2022/12/14562、病毒鉴定（1）.形态学鉴定观察病毒通过逃逸免疫监视，防止免疫激活或阻止免疫反应发生等逃避免疫应答。多见于以出芽方式释放的病毒。代传播给子代的方式。供分离病毒、检出核酸及抗原的标本：按种类：IgGIgMIgA通过呼吸道、消化道、皮肤粘膜但在一定条件下，病毒被激活，出现临床症状并排出病毒。缺点：敏感性低，要求病毒量在107以上；（HIV感染导致AIDS、库鲁病、克-雅病等）产前胎盘风疹、巨细胞病毒、梅甲醛可破坏对病毒的感染性而对抗原性影响不大间接性、广谱性（非特异性）、种属特异性、病毒在宿主细胞内增殖导致细胞裂解死亡，多见于无包膜，毒性强的病毒特异性免疫

体液免疫

病毒中和抗体

血凝抑制抗体

补体结合抗体

细胞免疫

细胞毒性T细胞

CD4+Th1尽早采取：发病初期、采取急性期病毒通过逃逸免疫监视，防止免疫激活或阻止免疫反应发生等逃避免疫应答。病毒感染后潜伏期较长，可达数月、数年或数十年。具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节尽早采取：发病初期、采取急性期不破坏细胞，但可使细胞表面出现病毒抗原---靶细胞2022/12/15137感染细胞具有吸附红细胞的能力感染细胞的培养液中有许多游离病毒存在，具有凝集红细胞的作用（2）.血吸附和血凝作用多见于以出芽方式释放的病毒。病毒通过逃逸免疫监视，防止免疫激活或阻止免疫反应发生等逃避免2022/12/15138红细胞吸附正常细胞①血吸附作用吸附试验可通过特异抗血清抑制来达到鉴定具有吸附特性的病毒2022/12/1458红细胞吸附正常细胞①血吸附作用吸附2022/12/15139②血凝作用血凝试验血凝抑制试验2022/12/1459②血凝作用血凝试验血凝抑制试验2022/12/15140（3）病毒成分的直接检测

用免疫学或分子生物学技术直接检查感染细胞或其上清液中病毒抗原（或核酸）。2022/12/1460（3）病毒成分的直接检测用免疫2022/12/15141病毒的快速诊断光镜-----包涵体电镜免疫荧光ELISA分子生物学技术杂交SouthernblotPCRNorthernblot2022/12/1461病毒的快速诊断光镜-----包涵体电2022/12/15142①

电子显微镜检查

病毒的很多特征如大小、形态、结构等必须借助电子显微镜进行检查。对于目前尚难培养而形态又非常典型的病毒，可直接从感染组织或分泌液，或者接种病料的鸡胚和细胞培养收获的材料作电子显微镜检查，直接观察病毒粒子。正染法：超薄切片法优点：可观察病毒形态和形态发生过程缺点：操作复杂，费时，但标本可长时间保存优点：快速简易（10-20min）；分辨率高；图象清晰缺点：敏感性低，要求病毒量在107以上；所有样品应处于悬浮状态负染技术2022/12/1462①电子显微镜检查2022/12/15143②酶联免疫吸附试验（ELISA）

将已知的抗体或抗原结合在某种固相裁体上，并保持其免疫活性。测定时，将待检标本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应。然后加入酶的作用底物催化显色，进行定性或定量测定。2022/12/1463②酶联免疫吸附试验（ELIS2022/12/15144间接ELISA2022/12/1464间接ELISA2022/12/15145夹心ELISA2022/12/1465夹心ELISA2022/12/151463′3′5′5′