221动物细胞培养和核移植技术课件

知识回顾植物细胞工程植物细胞工程技术植物细胞工程应用植物组织培养植物体细胞杂交植物繁殖的新途径作物新品种的培育细胞产物的工厂化生产知识回顾植物细胞工程植物细胞工程技术植物细胞工程应用植植植作1动物细胞工程动物细胞工程2动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、生产单克隆抗体技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养技术、动物细胞核3胰蛋白酶胶原蛋白酶.培养条件动物组织分散成

单个细胞细胞悬液培养胰蛋白酶胶原蛋白酶原理：细胞增殖（有丝分裂）结果：细胞群，细胞产物原代培养传代培养动物细胞培养过程胚胎的细胞或刚出生不久动物的组织胰蛋白酶.培养条件动物组织分散成

单个细胞细胞悬液培养胰蛋白4动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液原代培养细胞增殖部分细胞无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体传代培养动物细胞培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制5思考题1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？２、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗？３、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？４、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？５、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？没有是成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理胰蛋白酶水解蛋白质细胞间的成份是蛋白质思考题1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？２、动物6思考题６、细胞膜的主要成份是什么？７、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？８、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？９、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？１０、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？蛋白质和磷脂能注意时间的控制不能，因为两的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛思考题６、细胞膜的主要成份是什么？７、胰蛋白酶能将细胞消化掉7思考题11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？13、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？易于培养细胞贴壁，进行生长增殖当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。这样的过程叫做传代培养思考题11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？12、培养8思考题14、如何理解原代培养和传代培养？15、传代培养的细胞能一直传代下去吗？16、有些为何能一直传下去吗？17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？18、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养不都能发生突变，朝着癌细胞方向发展不是保存10代以内的细胞，因为10－50代部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展思考题14、如何理解原代培养和传代培养？15、传代培养的细胞9动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液原代培养动物细胞培养细胞增殖部分细胞无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体传代培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制10请总结出动物细胞培养的定义动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。请总结出动物细胞培养的定义动物细胞培养就是从动物机体内取出相11221动物细胞培养和核移植技术课件12相互接触接触抑制单层胰蛋白酶衰老或死亡不死性降低减少相互接触接触抑制单层胰蛋白酶衰老或死亡不死性降低减少13活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入细胞，故不染色。中低温新陈代谢酶抗原活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入细胞，故不染色。14思考题多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？思考题多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知151、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基）保证细胞顺利的生长增殖培养条件：1、无菌、无毒的环境保证细胞顺利的生长增殖培养条件：16动物细胞培养液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。与植物培养基相比其特点是：（1）液体培养基（2）含有血清、血浆动物体细胞大都生活在液体的环境培养条件：动物细胞培养液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐173、温度和pH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）培养条件：1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基）3、温度和pH培养条件：1、无菌、无毒的环境18思考题动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？主要成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。独特之处有：1、液体培养基2、成分中有血清、血浆等思考题动物细胞培养液的主要成分是什么？主要成分：独特之处有：19获得细胞或细胞产物细胞的全能性细胞数目增多一般为植物体培养结果快速繁殖、培育脱毒作物等培养目的葡萄糖、动物血清促生长因子蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较获得细胞或细胞产物细胞的全能性细胞数目增多一般20.动物细胞培养技术的实际应用1、大量生产细胞或产物。如：病毒疫苗干扰素

单克隆抗体胰岛素2、给基因工程提供受体细胞。3、检测有毒物质及毒性。4、用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据。.动物细胞培养技术的实际应用1、大量生产细胞或产物。21动物细胞培养核移植技术动物细胞培养22将动物的一个细胞的＿＿＿，移入一个已经去掉＿＿＿的＿＿细胞中，使其＿＿并发育成一个新的＿＿，这个新的胚胎最终发育为动物个体。分类

胚胎细胞核移植、体细胞核移植细胞核细胞核卵母重组胚胎核移植技术将动物的一个细胞的＿＿＿，移入一个已经去掉＿＿＿的＿＿细23母绵羊A乳腺细胞

（体细胞）

母绵羊B未受精的卵细胞

母绵羊C“多莉”新的卵细胞发育成早期胚胎去核卵细胞提取细胞核核移植胚胎移植体细胞核移植技术克隆羊母绵羊A乳腺细胞

（体细胞）母绵羊B未受精的卵细胞母绵24（MⅡ卵母细胞）减数第二次分裂中期2.结合P48图2-21，叙述克隆高产奶牛的培育过程。将供体细胞注入去核卵母细胞核移植胚胎移植供体细胞培养（MⅡ卵母细胞）减数第二次分裂中期2.结合P48图2-2125胚胎移植胚胎发育供体体细胞细胞培养体细胞群细胞融合细胞胚胎代孕母体生出克隆个体卵巢卵母细胞(减Ⅱ)去核无核卵母细胞体细胞核移植技术过程胚胎移植胚胎发育供体体细胞细胞培养体细胞群细胞融合细胞胚胎代26整个过程用了哪些技术？细胞培养、核移植、胚胎移植新生牛的性别、基因？与供体相同繁殖方式？无性繁殖原理？动物细胞核的全能性体细胞核移植技术整个过程用了哪些技术？体细胞核移植技术271、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？2、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明理由？MⅡ卵母细胞细胞质中含有的物质更易支持胚胎的全程发育，用它作受体更容易成功。将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像供体动物，操作也方便。思考与讨论：（1）多莉克隆过程中受体细胞是去核卵细胞，高产奶牛克隆过程中受体细胞是去核卵母细胞。（2）多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞，而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点28１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？为使核移植动物的核遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的细胞。２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，为什么？10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型，未发生突变。讨论：3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞。不是１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉29（三）体细胞核移植技术的应用前景阅读P49-501、畜牧业方面：2、医药卫生方面：可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群繁育。保护濒危物种，增加其存活数量生产医用蛋白质组织器官的移植3、其他领域了解胚胎发育及衰老过程更好追踪研究疾病的发展过程、治疗疾病（三）体细胞核移植技术的应用前景阅读P49-501、畜牧业方30（四）体细胞核移植技术存在的问题1、成功率低2、克隆动物存在健康问题（四）体细胞核移植技术存在的问题1、成功率低2、克隆动物存在31植物组织培养、动物细胞培养和核移植的比较植物组织培养、动物细胞培养和核移植的比较32植物组织培养动物细胞培养核移植结果关键环节与外植体完全相同的个体相同分化程度的细胞群与供体基本相同的个体细胞的脱分化、再分化、分化细胞分化、细胞癌变核融合、细胞分化植物组织培养动物细胞培养核移植结关与外植体完全相同的个体相同33【高考警示钟】1.植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程，但植物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞不分化只分裂。2.区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养。贴壁生长到一定程度需要用胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，原代培养结束，开始了传代培养。3.植物组织培养成的植株与提供外植体的植株完全相同，而动物细胞核移植形成的个体与供体大部分性状相同，也有部分性状与受体相同。【高考警示钟】34【典例训练1】人的血清白蛋白(HAS)在临床上需求量很大，通常从血液中提取。但由于艾滋病病毒等的威胁与日俱增，使人们对血液制品的使用顾虑重重。如果应用现代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。如图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据图示回答：【典例训练1】人的血清白蛋白(HAS)在临床上需求量很大，通35(1)以上过程涉及的现代生物技术中，属于细胞工程的有____________________________。(2)在基因工程中，我们称①为目的基因，请举出获取目的基因的主要方法：_____________________________(至少答两种)。在①进入③之前要构建基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有________________________，将①导入③的常用方法是_________________。(1)以上过程涉及的现代生物技术中，属于细胞工程的有____36(4)用④细胞进行培养发育成胚胎时，一般不超过_______代，原因是________________________，此培养过程与植物细胞培养所用的培养基有何不同？_________________________。(5)将⑤送入⑦的最佳时期是_____________期。(3)图中②一般经过____________处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞的去核处理一般选择在_______________期进行。(4)用④细胞进行培养发育成胚胎时，一般不超过_______37【解析】(1)图中形成④的过程为核移植，由重组细胞发育成⑤的过程需经动物细胞培养。(2)获取目的基因的方法主要有PCR扩增技术、人工合成法和从基因文库中提取法，获取的目的基因导入动物细胞常用显微注射法。(3)动物组织分散成单个细胞常用胰蛋白酶处理，对卵母细胞的去核处理一般选择在MⅡ时期。(4)动物细胞培养时，一般不超过10代，超过10代后细胞的核型可能会发生变化。(5)胚胎移植的最佳时期是桑椹胚或囊胚期。【解题指南】1.考查实质：动物细胞核移植过程、基因工程操作过程。2.解题关键：(1)明确①→③过程是将目的基因导入受体细胞，④的形成过程为核移植；(2)明确细胞培养在10代以内，细胞核型不会发生变化。【解析】(1)图中形成④的过程为核移植，由重组细胞发育成⑤的38答案：(1)核移植技术、动物细胞培养(2)基因文库中提取、PCR技术扩增、人工化学合成(两种即可)启动子、终止子、标记基因显微注射法(3)胰蛋白酶或胶原蛋白酶MⅡ(或减数第二次分裂中)(4)1010代以内的细胞，细胞核型不发生变化此培养基中加入动物血清、血浆等(5)桑椹胚或囊胚答案：(1)核移植技术、动物细胞培养39【变式】（2012·桐城模拟）某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处错误植物细胞工程动物细胞工程技术手段植物组织培养、植物体细胞杂交动物细胞培养和融合、单克隆抗体、核移植等特殊处理酶解法去除细胞壁胃蛋白酶处理制成细胞悬浮液融合方法物理方法、化学方法、生物方法物理方法、化学方法、生物方法典型应用无病毒植物的培育、人工种子等单克隆抗体的制备等培养基区别所用的糖必须为葡萄糖所用的糖为葡萄糖且动物血清不可缺少【变式】（2012·桐城模拟）某同学在学习“细胞工程”时，列40A．0B．1C．2D．3【解析】选D。动物的组织块剪碎后只能用胰蛋白酶处理，而不能用胃蛋白酶处理；植物的原生质体的促融方法可用物理法或化学法，而不用生物法；植物组织培养的培养基中的糖需用蔗糖，不用葡萄糖。A．0B．1C．2D．341１、动物的克隆与植物克隆一样吗？２、用动物体细胞进行克隆的过程,其实际操作过程是什么？动物克隆过程的实际是细胞核移植不思考题１、动物的克隆与植物克隆一样吗？２、用动物体细胞进行克隆的过42动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于[]A、培养基不同B、动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C、动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D、动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株巩固练习A动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于[]43动物细胞工程技术的基础是[]A、动物细胞融合B、胚胎移植C、动物细胞培养D、核移植巩固练习C动物细胞工程技术的基础是[]巩固练习C44下列不属于克隆的是[]A、生物体通过体细胞进行的无性繁殖B、将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系C、扦插和嫁接D、将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA中巩固练习D下列不属于克隆的是[]巩固练习D45植物体细胞杂交的结果是[]A、产生杂种植株B、产生杂交细胞C、原生质体的融合D、形成愈伤组织巩固练习A植物体细胞杂交的目的是[]A、产生杂种植株B、产生杂交细胞C、原生质体的融合D、形成愈伤组织A植物体细胞杂交的结果是[]巩固练习A植物体细46对比：动物细胞培养、植物组织培养..植物组织培养技术动物细胞培养技术原理培养基结果分散处理脱分化细胞全能性细胞有丝分裂固体,营养物质,激素液体,营养物质,血清等完整植株细胞群或细胞产物无有有无植物组织培养技术是植物细胞工程技术的基础。动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础。复习植物细胞工程和动物细胞工程的部分内容。对比：动物细胞培养、植物组织培养..植物组织培养技术动物细胞47知识回顾植物细胞工程植物细胞工程技术植物细胞工程应用植物组织培养植物体细胞杂交植物繁殖的新途径作物新品种的培育细胞产物的工厂化生产知识回顾植物细胞工程植物细胞工程技术植物细胞工程应用植植植作48动物细胞工程动物细胞工程49动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养技术、动物细胞核移植技术、动物细胞融合技术、生产单克隆抗体技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养技术、动物细胞核50胰蛋白酶胶原蛋白酶.培养条件动物组织分散成

单个细胞细胞悬液培养胰蛋白酶胶原蛋白酶原理：细胞增殖（有丝分裂）结果：细胞群，细胞产物原代培养传代培养动物细胞培养过程胚胎的细胞或刚出生不久动物的组织胰蛋白酶.培养条件动物组织分散成

单个细胞细胞悬液培养胰蛋白51动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液原代培养细胞增殖部分细胞无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体传代培养动物细胞培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制52思考题1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？２、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗？３、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？４、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？５、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？没有是成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理胰蛋白酶水解蛋白质细胞间的成份是蛋白质思考题1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？２、动物53思考题６、细胞膜的主要成份是什么？７、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？８、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？９、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？１０、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？蛋白质和磷脂能注意时间的控制不能，因为两的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛思考题６、细胞膜的主要成份是什么？７、胰蛋白酶能将细胞消化掉54思考题11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？13、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？易于培养细胞贴壁，进行生长增殖当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。这样的过程叫做传代培养思考题11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？12、培养55思考题14、如何理解原代培养和传代培养？15、传代培养的细胞能一直传代下去吗？16、有些为何能一直传下去吗？17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗？18、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？上述过程中，在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养不都能发生突变，朝着癌细胞方向发展不是保存10代以内的细胞，因为10－50代部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展思考题14、如何理解原代培养和传代培养？15、传代培养的细胞56动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液原代培养动物细胞培养细胞增殖部分细胞无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体传代培养动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制57请总结出动物细胞培养的定义动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。请总结出动物细胞培养的定义动物细胞培养就是从动物机体内取出相58221动物细胞培养和核移植技术课件59相互接触接触抑制单层胰蛋白酶衰老或死亡不死性降低减少相互接触接触抑制单层胰蛋白酶衰老或死亡不死性降低减少60活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入细胞，故不染色。中低温新陈代谢酶抗原活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入细胞，故不染色。61思考题多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？思考题多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知621、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基）保证细胞顺利的生长增殖培养条件：1、无菌、无毒的环境保证细胞顺利的生长增殖培养条件：63动物细胞培养液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。与植物培养基相比其特点是：（1）液体培养基（2）含有血清、血浆动物体细胞大都生活在液体的环境培养条件：动物细胞培养液的主要成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐643、温度和pH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、气体环境：O2和CO2（95%空气和5%CO2）培养条件：1、无菌、无毒的环境（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）2、营养（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。合成培养基）3、温度和pH培养条件：1、无菌、无毒的环境65思考题动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？主要成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、维生素、血清、血浆等。独特之处有：1、液体培养基2、成分中有血清、血浆等思考题动物细胞培养液的主要成分是什么？主要成分：独特之处有：66获得细胞或细胞产物细胞的全能性细胞数目增多一般为植物体培养结果快速繁殖、培育脱毒作物等培养目的葡萄糖、动物血清促生长因子蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较获得细胞或细胞产物细胞的全能性细胞数目增多一般67.动物细胞培养技术的实际应用1、大量生产细胞或产物。如：病毒疫苗干扰素

单克隆抗体胰岛素2、给基因工程提供受体细胞。3、检测有毒物质及毒性。4、用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据。.动物细胞培养技术的实际应用1、大量生产细胞或产物。68动物细胞培养核移植技术动物细胞培养69将动物的一个细胞的＿＿＿，移入一个已经去掉＿＿＿的＿＿细胞中，使其＿＿并发育成一个新的＿＿，这个新的胚胎最终发育为动物个体。分类

胚胎细胞核移植、体细胞核移植细胞核细胞核卵母重组胚胎核移植技术将动物的一个细胞的＿＿＿，移入一个已经去掉＿＿＿的＿＿细70母绵羊A乳腺细胞

（体细胞）

母绵羊B未受精的卵细胞

母绵羊C“多莉”新的卵细胞发育成早期胚胎去核卵细胞提取细胞核核移植胚胎移植体细胞核移植技术克隆羊母绵羊A乳腺细胞

（体细胞）母绵羊B未受精的卵细胞母绵71（MⅡ卵母细胞）减数第二次分裂中期2.结合P48图2-21，叙述克隆高产奶牛的培育过程。将供体细胞注入去核卵母细胞核移植胚胎移植供体细胞培养（MⅡ卵母细胞）减数第二次分裂中期2.结合P48图2-2172胚胎移植胚胎发育供体体细胞细胞培养体细胞群细胞融合细胞胚胎代孕母体生出克隆个体卵巢卵母细胞(减Ⅱ)去核无核卵母细胞体细胞核移植技术过程胚胎移植胚胎发育供体体细胞细胞培养体细胞群细胞融合细胞胚胎代73整个过程用了哪些技术？细胞培养、核移植、胚胎移植新生牛的性别、基因？与供体相同繁殖方式？无性繁殖原理？动物细胞核的全能性体细胞核移植技术整个过程用了哪些技术？体细胞核移植技术741、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？2、讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明理由？MⅡ卵母细胞细胞质中含有的物质更易支持胚胎的全程发育，用它作受体更容易成功。将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像供体动物，操作也方便。思考与讨论：（1）多莉克隆过程中受体细胞是去核卵细胞，高产奶牛克隆过程中受体细胞是去核卵母细胞。（2）多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞，而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。1、对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点75１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？为使核移植动物的核遗传物质全部来自有利用价值的动物提供的细胞。２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，为什么？10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型，未发生突变。讨论：3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA）来自受体卵母细胞。不是１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉76（三）体细胞核移植技术的应用前景阅读P49-501、畜牧业方面：2、医药卫生方面：可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群繁育。保护濒危物种，增加其存活数量生产医用蛋白质组织器官的移植3、其他领域了解胚胎发育及衰老过程更好追踪研究疾病的发展过程、治疗疾病（三）体细胞核移植技术的应用前景阅读P49-501、畜牧业方77（四）体细胞核移植技术存在的问题1、成功率低2、克隆动物存在健康问题（四）体细胞核移植技术存在的问题1、成功率低2、克隆动物存在78植物组织培养、动物细胞培养和核移植的比较植物组织培养、动物细胞培养和核移植的比较79植物组织培养动物细胞培养核移植结果关键环节与外植体完全相同的个体相同分化程度的细胞群与供体基本相同的个体细胞的脱分化、再分化、分化细胞分化、细胞癌变核融合、细胞分化植物组织培养动物细胞培养核移植结关与外植体完全相同的个体相同80【高考警示钟】1.植物组织培养和动物细胞培养过程都存在细胞的培养过程，但植物细胞可以先分裂再分化，而动物细胞不分化只分裂。2.区分原代培养和传代培养的关键是是否分瓶培养。贴壁生长到一定程度需要用胰蛋白酶处理，然后再分瓶培养，原代培养结束，开始了传代培养。3.植物组织培养成的植株与提供外植体的植株完全相同，而动物细胞核移植形成的个体与供体大部分性状相同，也有部分性状与受体相同。【高考警示钟】81【典例训练1】人的血清白蛋白(HAS)在临床上需求量很大，通常从血液中提取。但由于艾滋病病毒等的威胁与日俱增，使人们对血液制品的使用顾虑重重。如果应用现代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。如图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据图示回答：【典例训练1】人的血清白蛋白(HAS)在临床上需求量很大，通82(1)以上过程涉及的现代生物技术中，属于细胞工程的有____________________________。(2)在基因工程中，我们称①为目的基因，请举出获取目的基因的主要方法：_____________________________(至少答两种)。在①进入③之前要构建基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有________________________，将①导入③的常用方法是_________________。(1)以上过程涉及的现代生物技术中，属于细胞工程的有____83(4)用④细胞进行培养发育成胚胎时，一般不超过_______代，原因是________________________，此培养过程与植物细胞培养所用的培养基有何不同？_________________________。(5)将⑤送入⑦的最佳时期是_____________期。(3)图中②一般经过____________处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞的去核处理一般选择在_______________期进行。(4)用④细胞进行培养发育成胚胎时，一般不超过_______84【解析】(1)图中形成④的过程为核移植，由重组细胞发育成⑤的过程需经动物细胞培养。(2)获取目的基因的方法主要有PCR扩增技术、人工合成法和从基因文库中提取法，获取的目的基因导入动物细胞常用显微注射法。(3)动物组织分散成单个细胞常用胰蛋白酶处理，对卵母细胞的去核处理一般选择在MⅡ时期。(4)动物细胞培养时，一般不超过10代，超过10代后细胞的核型可能会发生变化。(5)胚胎移植的最佳时期是桑椹胚或囊胚期。【解题指南】1.考查实质：动物细胞核移植过程、基因工程操作过程。2.解题关键：(1)明确①→③过程是将目的基因导入受体细胞，④的形成过程为核移植；(2)明确细胞培养在10代以内，细胞核型不会发生变化。【解析】(1)图中形成④的过程为核移植，由重组细胞发育成⑤的85答案：(1)核移植技术、动物细胞培养(2)基因文库中提取、PCR技术扩增、人工化学合成(两种即可)启动子、终止子、标记基因