动物疫病监测诊断规范化工作程序

李春

四川省动物疫病预防控制中心2011年10月动物疫病监测诊断规范化程序

及兽医系统实验室考核准备工作

第一部分、动物疫病监测诊断规范化程序监测任务制定样品采集与送检实验室检测样品流转检测记录检测报告统计分析一、监测任务的制定国家、省、市、县逐级制定监测计划并组织实施《2011年四川省动物疫病监测计划》《2011年四川省口蹄疫等主要动物疫病流行病学调查方案》监测原则——“五结合”省级监测与地方监测相结合定点监测与全面监测相结合日常监测与集中监测相结合抗体监测与病原学监测相结合疫病监测与流行病学调查相结合监测模式——“四定”模式定点、定期、定量、定性二、样品采集与送检动物疫病采样技术规范DB51/T949—2009动物疫病实验室检验采样方法

NY/T541-2002采样原则：适时、典型、无菌、适量和生物统计根据不同的检测要求采集不同样品（血液、组织器官、内容物、分泌物、排泄物或其他材料）无法估计病因时，可进行系统全面的样品采集进行流调、抗体监测、健康评估或环境卫生检测时，样品数量应满足生物统计学的要求死亡畜禽，采集样品夏天不得超过6h，冬天不超过24h疑似炭疽，禁止解剖；一般采耳静脉或割耳尖

2.1样品的采集2.1.1血样的采集根据动物种类确定采血部位。选用真空管、无菌注射器、无菌采血瓶、毛细管的采血，采血量须满足试验需要若需抗凝血，则视实验要求选择抗凝剂。如需血清，则待血凝固后无菌分离血清并分装于灭菌瓶（管）中。3.8%柠檬酸钠溶10%EDTA溶液0.1%肝素钠动物采血部位动物采血部位猪耳静脉、前腔静脉鸡翅静脉、心脏牛耳静脉、颈静脉、尾静脉鸭鹅翅静脉、脚蹼静脉、心脏羊耳静脉、颈静脉兔耳静脉、心脏2.1样品的采集2.1.2家禽咽喉、泄殖腔拭子采集棉签插入后捻转2-3圈，两个拭子一并置入盛0.8mL左右的生理盐水或0.01MPBS（含双抗）的1.5mLEP管中。其它动物拭子采集类似。2.1.3实质脏器的采集肺脏、肝脏、脾脏、扁桃体、淋巴结、脊髓。无菌采集脏器组织块放入无菌容器内。每块组织应单独放在无菌容器中，注明采样动物名称、日期、组织。注意防止组织间互相污染。2.1样品的采集

2.1.4其它样品采集

皮肤、奶样、精液、胚胎、肠内容物、粪样、尿液、脑、脊髓等

2.1.5注意事项个人防护（炭疽等人畜共患病）采样后的无害化处理畜禽及其产品无害化处理采样废弃物无害化处理环境消毒采样器械消毒样品外包装消毒2.2样品包装

液体：离心管封口瓶有形病料：塑料自封袋，大袋套小袋，分病例包装《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》

2.3样品标识管上、瓶上、袋上都要标识清楚，用防脱色记号笔样品编号要与“采样单”对应，惟一性、可追溯性采样单一式三份（被采样单位、采样/送检单位、检测单位）采样单记录内容包括：动物场（厂）地址、动物种类、群体规模、发病日期、临床症状、治疗用药、样品编号、采样人、采样日期等。

2.4样品保存抗凝血：4-8℃冷藏，不超过1w。血清：短时间可4-8℃冷藏冷藏，否则须-20℃以下保存病毒检测样品：短时间可冷藏，否则须-20℃以下保存，无条件的可置灭菌50%甘油-PBS液中冷藏，不宜反复冻融。细菌检测病料：冷藏，不宜冷冻，可置灭菌液体石蜡或30%甘油-PBS液/盐水中冷藏。动物疫病检测测用样品一般般存放条件样品名称检测项目贮存温度保存时间其它事项血清血清学检测4℃5天血清解冻时，先放4℃冰箱解冻，再放室温。禁止反复冻融-20℃以下三个月奶样品血清学检测4℃5天细菌学检测4℃5天病毒学检测24h内送检分泌物、排泄物细菌学检测4℃5天病毒学检测4℃尽快送检粪便鼻咽拭子细菌学检测4℃5天病毒学检测-30℃以下24h内送检加含抗生素PBS病毒保存液组织样品病理组织学4℃或室温放入10％福尔马林溶液中固定细菌学检测4℃或0℃以下5天病毒学检测-30℃以下-70℃以下24h内送检-70℃下可长期保存可加30～50％甘油生理盐水或PBS病毒保存液2.6样品送检2.6.1样品运输密封、无泄漏漏、冷藏保存存运输，2.6.2样品送检“送检单”或“委托检测测书”一式两两份（送检单单位、检测单单位）要有详细的““采样单”《高致病性动物物病原微生物物菌（毒）种种或者样本运运输包装规范范》三、实验室检检测检测记录检测操作任务下达收样检测报告三、实验室检检测3.1.1样品的接收按送检方出具具的“抽样登登记表”或““检测委托书书”等送检凭凭证检查样品品状态，清点点数量，核实实无误后，办办理接收手续续,填写“送检样样品登记表””3.1.2样品的编号、、登记样品包装外贴贴XX-XXX编号，并注明明样品类别、、样品数、要要求检测项目目的总标签；；该样品编号号作为唯一性性标识，直至至检测工作结结束。3.1样品流转3.1样品流转3.1.3样品的发放按程序要求填填写检测任务务书，送相应应检测室检测测主检人员领取取样品，进行行样品交接签签字，再次对对样品进行核核实凡委托检测或或仲裁检测样样品应有备份份3.1样品流转3.1.4样品的检测检测方法选择择：1.国家或行业标标准规定的技技术方法2.行业主管部门门规定的技术术方法3.国际通用的技技术方法4.经确认可靠并并经用户认可可的新研究方方法5.有标准或合格格证书的诊断断试剂3.1样品流转3.1.5样品的保管应根据不同样样品的生物学学特性及检测测项目要求，，对样品妥善善保管。待检样品、在在检样品、己己检样品的存存放应有明确确标识。样品出入库清清楚，帐物相相符。3.1.6检测后样品的的处理检测室完成检检测工作后，，将已检样品品放回样品保保管室保存。。检完样品的保保存期为三个个月。超过保存期的的样品，由实实验室负责人人批准后作无无害化处理。。3.1样品流转3.2检测记录使用的实验室室记录要求规规范统一，符符合质量管理理要求原始记录所包包含的信息要要求完整，内内容真实实施检测、校校核二级签字字审核制度3.3检测报告检测报告应供供尽可能祥实实的信息(1)样品名称、数数量；(2)样品惟一性标标识；(3)样品送检时间间及来源；(4)检测方法和依依据；(5)出具报告兽医医实验室标识识；(6)出具报告日期期和时间；(7)出具报告单位位、地址、电电话；(8)清晰准确的检检测结果或结结论；(9)编制人、审核核人、批准人人签字3.3检测报告及时出具检测测报告报告要准确、、客观格式要规范符合质量管理理要求3.3检测报告严格实施批准准人、审核人人、制表人三三级审核制度度检测结论要加加盖检验专用用印章，并骑骑缝加盖检验验专用章四、统计分析析检测数据的统统计分析从所收集的众众多检测数据据中，选择合合理的统计学学指标，采用用相应的统计计分析方法，，从中得出有有价值的结论论。分析方法：主要包括：描描述性分析、、趋势性分析析、干预性分分析、统计推推断分析四、统计分析析结果上报及时性：周周报、月报准确性：按标标准核实、真真实报送信息息适用性：针对对不同对象提提供不同的信信息全面性：提供供适用、详尽尽的信息上报原则四、统计分析析上报的形式1.报表：月报、、季报、半年年报、年报2.专题报告：3.简报、通信、、专刊（辑））4.会议交流5.咨询通过“全国动动物疫病监测测与疫情信息息系统”月报报四、统计分析析存在的问题监测结果和疫疫情信息上报报不及时存在瞒报和漏漏报等现象检测测方方法法和和试试剂剂不不统统一一，，上上报报监监测测结结果果的的准准确确性性差差异异大大监测测结结果果统统计计分分析析不不够够，，未未能能实实际际指指导导防防疫疫工工作作。。建立立有有效效地地机机制制有有利利于于监监测测工工作作的的推推进进将监监测测工工作作开开展展的的真真实实性性、、及及时时性性以以及及监监测测工工作作的的质质量量纳纳入入目目标标考考核核加强强技技术术培培训训、、规规范范检检测测程程序序第二二部部分分、、兽兽医医系系统统实实验验室室考考核核准准备备工工作作四川川省省兽兽医医系系统统实实验验室室考考核核工工作作实实施施方方案案（川川畜畜食食函函【2010】】128号））省畜畜牧牧食食品品局局负负责责全全省省各各市市（（州州））级级和和县县（（市市、、区区））级级兽兽医医系系统统实实验验室室的的考考核核工工作作省动动物物疫疫病病预预防防控控制制中中心心具具体体承承担担考考核核工工作作指导导思思想想：：以以考考促促建建、、规规范范管管理理、、提提升升能能力力一、、考考核核工工作作目目标标实现现兽兽医医实实验验室室科学学化化建建设设制度度化化管管理理规范范化化运运行行安全全化化操操作作工作目标分级级实实施施、、全全面面推推进进原则则上上在在2011年底底前前通通过过考考核核、、延延期期考考核核需需提提交交申申请请。。二、、考考核核准准备备工工作作对照照考考核核细细则则和和建建设设标标准准完善善设设施施条条件件制定定管管理理制制度度加强强人人员员培培训训规范范检检测测活活动动准备备申申请请考考核核材材料料各级兽医实验室三、、考考核核的的主主要要内内容容实验验室室设设施施1仪器器设设备备2工作作人人员员3实验验室室管管理理4检测测工工作作5档案案管管理理6现场场检检测测操操作作7共现现场场考考核核84项市级级关关键键项项25个县级级关关键键项项22个四、、现现场场考考核核易易出出现现的的不不符符合合项项4.1实验验室室设设施施功能能室室的的设设置置和和布布局局（（7+2）功能能分分区区和和仪仪器器摆摆放放重要要实实验验室室设设洗洗眼眼设设施施、、自自动动水水开开关关、、空空调调门窗窗密密封封、、有有效效防防蚊蚊蝇蝇和和老老鼠鼠警示示标标识识常用用警警示示标标识识紧急急疏疏散散标标志志实验验室室入入口口处处贵重重精精密密仪仪器器有毒毒有有害害物物品品高温温高高速速设设备备菌毒毒种种保保存存处处标识识注意意安安全全4.2仪器器设设备备生物物安安全全柜柜（（不不能能用用超超净净工工作作台台））、、通通风风橱橱、、移移动动紫紫外外灯灯（（23+10）重要要仪仪器器设设备备专专人人管管理理（（文文件件任任命命））有的的仪仪器器处处于于工工作作状状态态重要要仪仪器器有有使使用用记记录录4.3工作作人人员员专业业技技术术人人员员比比例例80%培训训计计划划和和内内容容完完整整、、有有档档案案记记录录制定实验室所有人员培训计划制定运输和清洁员等人员培训计划严格执行培训计划包括对新员工的指导培训计划包括对有经验员工的周期性再培训培训计划主要内容4.4实验验室室管管理理质量量管管理理体体系系要要简简单单，，易易严严格格遵遵照照执执行行专人人进进行行标标准准查查新新和和查查新新记记录录专人人进进行行剧剧毒毒、、危危险险物物品品和和器器材材等等管管理理，，并并要要采采取取监监督督措措施施（（双双人人双双锁锁等等））对实实验验废废弃弃物物无无害害化化处处理理要要有有关关证证明明记记录录所有有需需要要专专人人管管理理的的都都需需要要文文件件任任命命4.5检测测工工作作样品品编编号号要要规规范范（（没没有有做做到到唯唯一一性性标标识识））对样样品品的的流流向向及及检检验验进进度度要要进进行行有有效效监监控控原始始记记录录信信息息要要完完整整，，记记录录规规范范原始始记记要要实实施施检检测测、、校校核核二二级级签签字字审审核核制制度度检测测报报告告要要严严格格实实施施批批准准人人、、审审核核人人、、制制表表人人三三级级审审