溶出研究课件

药物的溶出研究

杨硕

中国药科大学

溶出度的定义与作用

溶出度系指药物从片剂、胶囊剂或颗粒剂等固体制剂在规定条件下溶出的速率和程度。

溶出度检查是一种模拟口服固体制剂在胃肠道中的崩解和溶出的体外试验方法。

它是评价药物制剂质量的一个重要指标，可用于评价和筛选制剂处方与工艺。溶出度检查制订原则—需制订制剂当药物溶出影响其体内吸收时(如难溶性、多晶型药物)当血药浓度波动易引起临床不良反应(如治疗指数较小或治疗窗较窄的药物)。如盐酸地尔硫卓片和格列奇特片。主药剂量较小，药效强。用于预防和治疗严重疾病。用于急救的固体制剂、避孕药以及用于重点部位。用制剂学手段特殊处理（如微粉化、固体分散、CD包合、微囊化、脂质体、促吸收等）具有特殊释药要求（如速释、迟释、缓控释等）1、方法选择篮法(B)/浆法(P)，不提首选浆法或蓝法A非崩解型药物（B）B崩解型药物

制剂中含有难以溶解、扩散的成分（P）

主药或辅料为一定胶性物质（P）C悬浮的制剂（B）,如辅料易堵塞网孔(P,使用沉降篮)小杯法:≥500ml浓度过低,较灵敏的方法仍难以进行定量测定(不能使用沉降篮，测定不能再稀释测定)。2、溶出介质的选择水:不提以水为主（pH值无法控制，在试验过程中易发生改变，适合非pH依赖释药）人工胃液（0.01～0.1mol/L盐酸溶液,必要时可加胃蛋白酶）人工肠液（必要时可加胰蛋白酶）其他缓冲液（pH值一般不超过7.6）

三羟甲基氨基甲烷(Tris):缓冲范围pH7.0～9.5，低离子强度(二氟尼柳胶囊)其他:低浓度表面活性剂;醇溶液（一般＜5％）人体生理pH值在胃内为1～3.5,小肠内约为7,结肠内约为7.5。

常用不同pH介质表面活性剂尽量避免使用，种类和浓度需通过多个试验来验证。FDA溶出度指导原则：对于难溶性药物不提倡使用有机溶剂，推荐SDS，但必须证明表面活性剂的选择和用量的合理性。即应考察表面活性剂对药物的增溶量，以确定最少且最佳的使用浓度。USP:氯贝丁酯胶囊5%SDS,最高。灰黄霉素片4%SDS（Chp2005中0.54%SDS）。Chp2005中贝诺酯片1%SDS，最高。肿瘤细胞溶酶体pH为5.5，正常体液为7.4，因此对于生物碱类抗肿瘤药物的新型碳纳米管载药系统，若体外评价其缓控释效果，需选择5.5和7.4的介质。(6)根据实际需要，可在溶出介质中添加表面活性剂，但应对添加种类与浓度进行评价。浓度研究应从0.01％(w/v)起点、按照1、2、5级别逐步增加，不建议采用3.0%以上的浓度；且应注意不同来源的表面活性剂可能会对试验结果带来显著性差异的情况，尤其是使用十二烷基硫酸钠时，目前我国中检所已有相应标准的该试剂出售。(7)至于种类，日本倾向采用吐温-80的原因系为：一者药物较易与十二烷基硫酸钠相互作用，对试验结果带来影响，而吐温-80作用较少；二者系因其一般不会因为来源不同而对试验结果带来显著性影响。研究者可根据试验情况加以综合考虑。

3.介质的体积选择使药物符合漏槽条件

即所用介质的体积应达到被测物质在37℃时在此介质中达到饱和溶液浓度体积的3～10倍。此条件下，溶出到介质中的药物很快被介质稀释带走，药物的溶出不受溶出介质中药物浓度的影响，亦即浓度差不是药物溶出的限速步骤。本实验中碳纳米管负载共1.33mg喜树碱，而Hydrochloridetopotecan,solubleinwaterupto1mg/ml，介质体积200ml，符合漏槽条件。

制剂中辅料往往可以增大药物的溶解度，单测定原料的溶解度无意义，需结合辅料测定。4、转速的选择低于20r/min不符合流体力学要求;高于150r/min产生湍流，且转速过快造成与生物利用度不相关。常规：转篮100r/min≈桨法50r/min≈小杯35r/min(一般相当于正常胃肠道蠕动状态)。☆无特殊要求时，一般为25r/min的整倍数浆

法：50～75r/min;转篮法：50～100r/min;小杯法：35～50r/min;5溶出度指标制定基本原则：完全释药指标（如普通制剂1-2h内，释药>90%标示量），以防药物残留而降低药效。控制释药指标（如缓控释制剂初始释药、中间释药等），保证释药曲线特性—药效↑，不良反应↓。预防释药指标（如肠溶、结肠释药制剂在胃中的渗漏等），保证释药部位—药效↑,不良反应↓。

在选择的方法及溶出介质和预选的转速下测定不同时间的溶出量，建立溶出曲线，从图谱上来确定取样液时间，一般溶出曲线的拐点处后推10-15分钟；如果时间较长或太短，可适当提高或降低转速后重新测定溶出曲线，制定出合理可行的取样时间和释药量。速释制剂根据制剂设计思想制定合理取样点和释药量。如分散片可定在15min，>80%。6

溶出度均匀性试验（批内）在确定的条件下测定6片（粒）样品的溶出曲线，6条溶出曲线进行比较，应基本均匀一致。影响溶出度的因素药物性质的影响制剂方面的影响工艺方面的影响溶出试验条件的影响测定方法的影响溶出结果评价

生物药剂分类系统（BCS）

Ⅰ溶解性和渗透性均好——吸收好可不必考虑测定溶出度

Ⅱ溶解性好、渗透性差——吸收不佳一般采用促吸收手段，增加药物的胃肠道透过性

Ⅲ溶解性差、渗透性好——吸收易波动一般采用提高药物溶解性，控制药物溶出速率

Ⅳ溶解性和渗透性均差——吸收极差

不易改进且一般难成为有效口服药物体外溶出度的统计学评价分析模型依赖法：Weibull非模型依赖方法相似因子法(50≤f2≤100)相似等效限法(Chow’s法)溶出曲线与生物等效关系如果两个药品均满足溶出度要求且溶出曲线

相似，则基本上表现为生物等效，而少有反例。两个生物等效的制剂则可能会表现出不同的溶出特性。05版中国药典2部溶出度收载情况紫外-可见分光光度法测定注意事项 紫外可见分光光光度法操作简便直接，得到广泛的应用，但辅料干扰是主要的缺点

：特别是在短波长处，更应注意辅料的末端吸收。一般认为辅料的干扰应在2%以内，否则UV法不适用。

测定前，必须先进行紫外扫描，考察辅料是否存在干扰。方法为：分别取对照品溶液和供试品溶液(浓度最好与对照品溶液一致或略低)，进行紫外扫描。

观察供试品溶液图谱是否存在基线被抬升的现象，以及与对照品溶液图谱重合的情况。常用双波长吸收差值法与导数光谱法校正。实际操作中经常会发现溶出度明显高于含量的现象，尤其是胶囊剂.原因可能是目前国产辅料的质量参差不齐。此点应予重视。如中国药典中氟康唑胶囊溶出度的测定，分析人员在工作中曾多次遇到溶出度均值大于含量10～20％(均采用UV法测定)的情况。而日本橙皮书中该制剂则采用HPLC法测定。HPLC法易于将辅料与主成分分离，该法测定最为准确、可靠，只是工作量略显增加。综合考虑滤膜吸附和辅料的干扰，溶出度测方法采用：直接高速离心后，取上清液用HPLC法测定。针对本课题组的研究，不采用紫外可见分光光度法的原因是：碳纳米管所负载的原料药物纯度较低（喜树碱89%，羟基喜树碱95%），杂质、降解产物、中间体等有关物质会对紫外吸收造成较大影响，产生较大误差。宜将溶出液离心后取上清直接HPLC进样，因为实际操作中发现滤膜对药物存在一定的吸附。释放度测定取样点分析方法测定条件测定介质测定仪器AddYourText是否突释释药特性释药是否完全数学模型拟合：

零级方程一级方程

Higuchi方程针对本课题缓控释效果的特别要求

释放度测定仪的选择

缓、控释制剂，由于工艺及包衣材料不同，在测定仪器和方法选择上需要考虑其适应性。通常选用溶出度测定仪(浆法、篮法或采用沉降篮法)，因为仪器普及，新产品申报中免去很多困难。取样点和介质脱气情况也在一定程度上影响释放度。流室法(Flow-through)释放仪早已收载入USP，其优点是对难溶性药物可以定期更换释放介质，避免因溶出介质饱和而不再溶出，可以累积测定，但目前仪器尚不普遍，蠕动泵的仿制有一定难度。对于易降解的药物，其回收试验难于达到理想效果。转瓶式溶出仪：早在60年代已应用于缓、控式制剂，但未被中国药典收载，此仪器制作简单，使用方便，尤其适用于缓、控释颗粒和部分密度小的小丸和微丸，但取样量小，宜采用自动释放仪，释放度结果为相对释放速率。结合现有条件及药剂同学做脂质体药物溶出曲线的经验，选取类似于转篮法的摇床，介质模拟体液pH7.4，肿瘤溶酶体5.5，转速75r/min，模拟胃肠蠕动，恒温37℃，取样时长48h。转速和取样时间点的设置对于大部分制剂而言，不同转速下的释放行为会有不同，例如溶蚀型制剂，转速越大，释放越快，故应考察制剂在不同转速下的释放行为。转速过快,可能削弱对不同制剂释放行为的区分能力，所以不推荐首选过高转速。如确有需要，应进行充分的验证，证明在所用转速下能够区分不同产品质量。为了解产品的释放特性，通常应选取足够多的取样测试点，以绘制完整的释放曲线（包括上升曲线及达到平台的阶段）。前期取样点的间隔应比较短，后期取样点间隔可相对延长，直至90％以上的药物释放或达到平台期。释放度整体考察时间要根据制剂释放时间长短不同而异，一般不宜短于给药间隔。释放度限度应反映突释、释放平稳性、末端释放情况：第一点的取样时间为0.5－2小时，用于考察药物是否有突释；第二点的累计释放量约为50％左右，用于考察释药特性及药物是否平稳释放；最后取样点的累计释放量至少达80％，用于考察药物释放是否基本完全。根据具体制剂不同的释药时间和释药特性，可考虑适当增加释药测定点，以保证对产品的释药特性有比较全面的控制和反映。缓控释制剂的释放度体内外相关性药典相关指导原则对缓释、控释制剂的生物利用度和生物等效性试验以及体内-体外相关性均做了详细阐述。具体要求为：“系指体内吸收相的吸收曲线与体外释放曲线之间相应的各个时间点的回归，得到直线回归方程的相关系数符合要求”

为使体外释放曲线能预测体内情况可根据体内试验结果来调整体外试验方法条件和释放度范围，而释放度限度的最终确定则根据产品稳定性数据来进行调整。缓控释的现状我国的缓释控释的开发研究起步于80年代中后期，历经十几年取得很大的成绩。新辅料的研究和应用，促进了缓控释制剂的发展，新技术和新品种的开发增多，产品的质量也更加稳定。新设备的研制和引进也提高了国内缓控释制剂质量,如高速压片机、高效薄膜包衣机等。缓控释制剂的产业化是瓶颈。药物溶出度试验仪器的创新目前普遍使用的传统溶出度测试方法.存在几个问题：人工取样、过滤和稀释等操作比较繁杂，大批次试验强

度较大；存在取样误差和操作误差;一致性差异;检测间隔较长,不适合于快速制剂检测;不能全部反映药物溶出过程中的真实过程,比如突释。自动取样溶出度试验仪上世纪末，美、瑞士等国推出计算机控制蠕动泵或柱塞泵自动取样，UV或HPLC检测的自动溶出仪。我国天大天发公司也推出ADFC8自动溶出取样系统。系统组成：溶出度仪+自动取样装置（蠕动泵或柱塞泵）+检测器(UV或HPLC)工作原理：是由蠕动泵或柱塞泵将试液循环送入检测器，实现在线自动分析。虽然可以实现溶出度自动检测，但依然存在以下问题：1、依然采用取样分析模式；2、若要获取溶出曲线在溶出过程需进行多次取样分析，此时取样和补液次数的增加，会影响药物溶出的浓度，尤其对于小剂量药物，影响会更突出；3、取样间隔一般3-5分钟，测定快速释放药物

时突释点的信息有偏差;4、存在管道吸附、产生泡沫、洗涤困难等题。基于过程分析的光纤传感药物溶出度测定仪光纤药物溶出度原位测定技术是采用光纤传感技术的一种实时、在线、原位全自动分析测试仪器。