中山大学实验室生物与安全课件汇总

-/r/n.z./r/n"实验室与生物平安"/r/n(LaboratoryBiosafety)/r/n绪论/r/n"生物多样性公约"/r/n生物平安是"生物多样性公约"最重要的议题之一。/r/n生物平安问题/r/n狭义的生物平安问题/r/n可能对生物多样性、生态环境和人类安康产生潜在的不利影响。/r/n包括各类转基因活生物体释放到环境中，可能对生物多样性构成潜在威胁。/r/n广义的生物平安问题/r/n是国家平安问题的组成局部，是指与生物有关的各种因素对社会、经济、人类安康及生态环境所产生的危害或潜在风险。/r/n这些因素主要是：/r/n天然的生物因子如生物武器、生物恐惧、重大传染病的爆发流行，是最重要、最现实的生物平安问题。/r/n转基因生物/r/n生物技术滥用或对人类安康、生态环境以及社会、经济造成严重危害。/r/n5000/r/n个实验室/r/n累计感染总数：/r/n3921/r/n例/r/n与事故相关的/r/n<20%/r/n未确认的例数/r/n>80%/r/n〔气溶胶？〕/r/n最常报告的感染：/r/n乙型肝炎、肺结核、伤寒、委内瑞拉马脑炎、布鲁氏菌病/r/n-/r/n.z./r/n实验室生物平安之微生物/r/n中华人民共和国传染病防治法/r/n(/r/n1989年2月21/r/n日/r/n中华人民共和国/r/n第七届全国人民代表大会常务委员会第六次会议/r/n通过/r/n1989年2月21日/r/n中华人民共和国主席令第15号公布自/r/n1989年9月1日/r/n甲类传染病是指：鼠疫、霍乱。/r/n乙类传染病是指：病毒性肝炎、细菌性和阿米巴性痢疾、伤寒和副伤寒、艾滋病、淋病、梅毒、脊髓灰质炎、麻疹、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、流行性出血热、狂犬病、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹伤寒、流行性乙型脑炎、黑热病、疟疾、登革热。

丙类传染病是指：肺结核、血吸虫病、丝虫病、包虫病、麻风病、流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹、新生儿破伤风、急性出血性结膜炎、除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻病。/r/n国务院可以根据情况，增加或者减少甲类传染病病种，并予公布；/r/n国务院卫生行政部门/r/n可以根据情况，增加或者减少乙类、丙类传染病病种，并予公布。/r/n第十五条医疗保健机构、卫生防疫机构和从事致病性微生物实验的单位，必须严格执行国务院卫生行政部门规定的管理制度、操作规程，/r/n防止传染病的医源性感染、医院内感染、实验室感染和致病性微生物的扩散。/r/n第十六条/r/n传染病菌种、毒种的保藏、携带、运输/r/n，必须按照国务院卫生行政部门的规定严格管理。/r/n第十七条被/r/n甲类传染病/r/n病原体污染的污水、污物、粪便，有关单位和个人必须在卫生防疫机构的指导监视下进展严密/r/n消毒后处理/r/n；拒绝消毒处理的，当地政府可以采取强制措施。被乙类、丙类传染病病原体污染的污水、污物、粪便，有关单位和个人必须按照卫生防疫机构提出的卫生要求进展处理。/r/n第二十条对从事传染病预防、医疗、科研、教学的人员，现场处理疫情的人员，以及在生产、工作中接触传染病病原体的其他人员，有关单位应当根据国家规定，/r/n采取有效的防护措施和医疗保健措施/r/n。/r/n有关菌种保藏的规定/r/n由国和院行政部门指定的单位负责；/r/n一、二类菌〔毒〕种的供给由/r/n国务院卫生行政部门指定的保藏管理单位/r/n供给。/r/n三类菌〔毒〕种由/r/n设有专业实验室的单位/r/n或者国务院卫生行政部门指定的保藏管理单位供给；/r/n一类：实验室感染的时机多，感染后发病的可能性大，病症重并能危及生命，缺乏有效的预防方法，以及传染性强，对人群危害性大的烈性传染病，包括国内未发现或虽已发现，但无有效防治方法的烈性传染病菌种。如：鼠疫耶尔森氏菌、霍乱弧菌〔包括EL-tor弧菌〕；

天花病毒、黄热病毒〔野毒株〕、新疆出血热〔克里米亚刚果出血热〕病毒、东、西方马脑炎病毒、委内瑞拉马脑炎病毒、拉沙热〔Lassa〕病毒、马堡〔Marburg〕病毒、埃波拉〔Ebola〕病毒、猴疱疹病毒〔猴Ｂ病毒〕；

粗球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、杜波氏组织胞浆菌。

二类：实验室感染时机较多、感染后的病症较重及危及生命，发病后不易治疗及对人群危害较大的传染病菌种。如：

土拉弗郎西丝氏菌、布氏菌、炭疽芽胞菌、肉毒梭菌、鼻疽假单胞菌、类鼻疽假单胞菌、麻风分枝杆菌、结核分枝杆菌；

狂犬病病毒〔街毒〕、森林脑炎病毒、流行性出血热病毒、国内尚未发现病人在国外引起脑脊髓炎及出血热的其它虫媒病毒、登革热病毒、甲、乙型肝炎病毒；

各种立克次体〔包括斑疹伤寒、Q热〕；

鹦鹉热、鸟疫衣原体、淋巴肉芽肿衣原体；

马纳青霉、北美芽生菌、副球孢子菌、新型隐球菌、巴西芽生菌、烟曲霉、着色霉菌。

三类：仅具有一般危险性，能引起实验室感染的时机较少，一般的微生物学实验室采用一般实验技术能控制感染或有对之有效的免疫预防方法的菌种。如：

脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎双球菌、葡萄状球菌、链球菌、淋病奈瑟氏菌及其它致病性奈瑟氏菌、百日咳博德特氏菌、白喉棒杆菌及其它致病性棒杆菌、流感嗜血杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、致病性大肠埃希氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、空肠弯曲菌、酵米面黄杆菌、副溶血性弧菌、变形杆菌、李斯特氏菌、铜绿色假单孢菌、气肿疽梭菌、产气荚膜梭菌、破伤风梭菌及其它致病梭菌；

钩端螺旋体、梅毒螺旋体、雅司螺旋体；

乙型脑炎病毒、脑心肌炎病毒、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒以及未列入一、二类的其它虫媒病毒、新必斯〔Sindbis〕病毒、滤泡性口炎病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒、脊髓灰质炎病毒、腺病毒、柯萨奇〔A及B组〕病毒，艾柯〔ECHO〕病毒及其它肠道病毒、疱疹类病毒〔包括单纯疱疹、巨细胞、EB病毒水痘病毒〕、狂犬病固定毒、风疹病毒；

致病性支原体；

黄曲霉、杂色曲霉、梨孢镰刀菌、蛙类霉菌、放线菌属、奴卡氏菌属、石膏样毛癣菌〔粉型〕、孢子丝菌。

四类：生物制品、菌苗、疫苗生产用各种减毒、弱毒菌种及不属于上述一、二、三类的各种低致病性的微生物菌种。

/r/n有关菌种使用的规定/r/n使用一类菌〔毒〕种的单位，必须经/r/n国务院/r/n卫生行政部门批准；/r/n使用二类菌〔毒〕种的单位必须经/r/n省级/r/n政府卫生行政部门批准；/r/n使用三类菌〔毒〕种的单位，应当经/r/n县级/r/n政府卫生行政部门批准；/r/n有关菌种运输的规定/r/n一、二类菌〔毒〕种，应派专人向供诮单位领取，/r/n不得邮寄/r/n；/r/n三类菌〔毒〕种的邮寄单位的证明，并按照菌〔毒〕种出寄与装的有关规定办理。/r/n第六章法律责任/r/n第三十七条有本法第三十五条所列行为之一，引起甲类传染病传播或者有传播严重危险的，比照刑法/r/n第一百七十八条/r/n的规定追究刑事责任。/r/n第三十八条从事实验、保藏、携带、运输传染病菌种、毒种的人员，违反国务院卫生行政部门的有关规定，造成传染病菌种、毒种扩散，后果严重的，依照刑法/r/n第一百一十五条/r/n的规定追究刑事责任；情节轻微的，给予行政处分。/r/n新刑法－传染病菌种扩散罪/r/n第三百三十一条：从事实验、保藏、携带、运输传染病菌种、毒种的人员，违反国务院卫生行政部门的有关规定，造成传染病菌种、毒种扩散，后果严重的，处/r/n三年以下有期徒刑或者拘役/r/n；后果特别严重的，/r/n处三年以上七年以下有期徒刑/r/n。/r/n-/r/n.z./r/n消毒与灭菌/r/n灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法，包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微生物/r/n消毒：杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽孢的细菌或非病原微生物/r/n防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法/r/n无菌：不存在活菌的意思/r/n(6-1)干热灭菌法/r/nA燃烧：/r/nB烧灼：/r/nC/r/n干烤/r/n：160/r/n°/r/n～/r/n180/r/n℃/r/nD红外线灭菌：/r/n(6-2)湿热灭菌法/r/n高压蒸汽灭菌法：121/r/n℃/r/n加热20～30分钟，杀灭所有微生物及芽孢。/r/n(6-3)紫外线消毒空气与物体外表/r/n(6-4)化学消毒剂/r/n1酚类：/r/n浓度：/r/n石炭酸为3%-5%、来苏儿为2%/r/n用途：地面、器具外表和皮肤的消毒/r/n2醇类：/r/n浓度：乙醇70%-75%/r/n用途：用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡/r/n3重金属盐类：/r/n〔1〕/r/n2%/r/n红汞：皮肤、粘膜和小创伤/r/n〔2〕0.05-0.01%升汞：非金属器皿/r/n4氧化剂：/r/n〔1〕0.1%高锰酸钾：皮肤、尿道、水果/r/n〔2〕3%过氧化氢：创伤、皮肤粘膜/r/n〔3〕2%-2.5%碘酒：皮肤消毒/r/n〔4〕0.2ppm-0.5ppm氯：饮水和游泳池/r/n〔5〕10%-20%漂白粉：地面、厕所等/r/n5外表活性剂：/r/n0.05%-0.1%新洁尔灭：皮肤粘膜、手术器械/r/n6烷化剂：/r/n10%甲醛：物品外表、空气/r/n(6-5)消毒剂在实验室的应用/r/n1皮肤：2.5%碘酒、70%酒精、2%红汞/r/n2粘膜：1%硝酸银、3%过氧化氢、0.1%高锰酸钾等/r/n3被污染的空气：甲醛熏蒸/r/n4手：2%来苏儿、2%碘酊、70%酒精/r/n病原微生物与实验室分级/r/n国家对病原微生物按照其对人类和动物以及环境的危害程度实行/r/n分类管理/r/n，对实验室根据其对病原微生物的防护水平实行/r/n分级管理/r/n。/r/n病原微生物的分类和管理/r/n第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人或者动物疾病的微生物。/r/n第三类病原微生物，是指能够引起人或者动物疾病，发生实验室暴露可能引起感染，但不会引起严重危害，且能够有效实施预防和治疗的微生物。/r/n第二类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严重疾病，但不易在人或者动物间传播，且能够有效实施预防和治疗的微生物。/r/n第一类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严重疾病，容易在人或者动物间传播，或者没有有效的预防和治疗措施的微生物。/r/n第一类、第二类病原微生物统称为/r/n高致病性病原微生物/r/n。/r/n国家实行统一的实验室生物平安标准/r/n〔/r/n中华人民共和国国家标准GB19489-2004/r/n实验室生物平安通用要求〕。国家根据实验室防护水平，将实验室分为一级、二级、三级、四级。/r/n一级生物平安防护实验室，简称BSL1或P1/r/n二级生物平安防护实验室，简称BSL2或P2/r/n三级生物平安防护实验室，简称BSL3或P3/r/n四级生物平安防护实验室，简称BSL4或P4/r/n一级生物平安防护实验室/r/n实验室构造和设施、平安操作规程、平安设备适用于对安康成年人/r/n无致病作用的微生物/r/n，如工程细菌、工程真菌等。/r/n大肠杆菌啤酒酵母/r/n根底实验室/r/n从事根底教学与研究，接触1级生物危害微生物，即接触不引起人或动物疾病的细菌、真菌、病毒等生物因子，如枯草杆菌、犬肝炎病毒等。/r/n只需/r/n开放式长形工作台/r/n和好的/r/n微生物操作技术/r/n。/r/n本学院分子生物、基因工程等生物医学、生物药学实验室按一级生物平安防护标准执行。其中生物材料的使用：/r/n菌株：大肠杆菌工程菌株、枯草杆菌工程菌株、/r/n啤酒酵母工程菌株以及其他工程菌株。/r/n载体：克隆及表达质粒〔不包括哺乳病毒载体〕/r/n细胞：不含平安性不明的致病性病毒的原代及传/r/n代细胞/r/n核酸：DNA、RNA、PCR扩增产物等/r/n二级生物平安防护实验室/r/n实验室构造和设施、平安操作规程、平安设备适用于对人或环境具有/r/n中等潜在危害/r/n的微生物。如：病原微生物别离培养、药物实验及病毒的血清学实验/r/n根底实验室/r/n从事实验安康效劳、诊断、研究、接触2级生物危害微生物，即引起人动物发病但不会引起严重危害的病原体。实验室感染后不导致严重疾病，具有有效的治疗和预防方法，传播风险有限，如/r/n乙型肝炎病毒、沙门菌、弓形体/r/n等。/r/n除了开放式长形工作台还应配置/r/n生物平安柜/r/n。实验室应有/r/n生物危害标记。/r/n操作人员应/r/n身着防护服/r/n，有好的微生物操作技术，/r/n本学院涉及以下实验的实验室按二级生物平安防护标准执行。其中生物材料的使用：/r/n菌株：病原微生物的分类和管理法中对应的第三/r/n类微生物。如：/r/nMRSA菌株/r/n载体：哺乳病毒载体，尤其是生物平安性不明的/r/n逆转录病毒、慢病毒载体。/r/n细胞：含致病性哺乳动物病毒或生物平安性不明/r/n的原代及传代细胞。如/r/nEB病毒。/r/n基因工程病毒载体〔一〕腺病毒载体〔二〕腺相关病毒(AAV)载体/r/n〔三〕逆病毒转录载体、慢病毒载体/r/n三级生物平安防护实验室/r/n实验室构造和设施、平安操作规程、平安设备适用于主要/r/n通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素/r/n，通常已有预防传染的疫苗。如：艾滋病毒的研究应在三级生物平安防护实验室中进展。/r/n遏制实验室/r/n从事特殊诊断与效劳，接触3级生物危害微生物，即引起人或动物严重疾病但通常不因偶然在个体间传播，有治疗方法的病原体，如/r/n结核分枝杆菌、真菌、圣路易斯脑炎病毒/r/n等。/r/n需要生物平安柜和其他操作所需的根本装置，实验室应有生物危害标记。/r/n操作人员身着/r/n特殊/r/n防护服，有好的微生物操作技术。/r/n人员进入受限，实验室内有/r/n定向气流/r/n。/r/nHIV/r/n实验室生物平安级别/r/n艾滋病血清学检测/r/n艾滋病血清学检测〔包括筛查和确认实验室〕、免疫学和核酸检测应在符合/r/nⅡ/r/n级生物平安实验室〔BSL-2〕要求的艾滋病检测实验室中进展。/r/nHIV别离、研究/r/nHIV别离、细胞培养及研究工作应在/r/nⅢ/r/n级生物平安实验室〔BSL-3〕中进展。/r/n四级生物平安防护实验室/r/n实验室构造和设施、平安操作规程、平安设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素/r/nSARS/r/n爱博拉病毒/r/n严格遏制实验室/r/n从事危险病原体操作。接触4级生物危害微生物，即引起人类或动物非常严重的疾病，能在人与人、人与动物之间造成传播，尚无有效治疗和预防方法的病原体。/r/n应有配套的生物平安柜，人员身着带/r/n正压的连衣裤/r/n，实验室空气经过滤，配备/r/n带双门的高压灭菌器/r/n。/r/n除了三级防护措施外，人员进入实验室时，应经过/r/n密封的过渡舱/r/n，离开时应经/r/n风淋/r/n，生物废弃物应/r/n经特殊处理/r/n。/r/n我国的P4实验室/r/n我国唯一的一个生物平安四级〔P4〕实验室，于05年底兴建，地址：武汉市/r/nP4实验室工程以现有中科院武汉病毒所为依托建立，投资1.2亿元/r/n由法国科学家协助建立/r/n本学院无三级及四级防护实验室。/r/n严禁/r/n传染病防治法中甲类、乙类传染病中涵盖病原微生物菌株的使用、保存及操作。/r/n严禁/r/n病原微生物的分类和管理法中对应的第一、二类高致病性微生物菌株的使用、保存及操作。/r/n实验中所涉及到的此类病原微生物必须在相应的三级及四级防护实验室进展。/r/n本校的P3实验室/r/n中山大学北校区微生物楼/r/n进入P3实验室实验按规定进展申请和培训/r/n概要及法规/r/n〔一〕生物平安实验室的开展概况/r/n1993年由美国疾病预防控制中心/国立卫生研究院〔CDC/NIH〕发布了"BiosafetyintheMi/r/ncrobiologicalandBiomedicalLaboratoriesManual,3theditionCDC/NIH"/r/n1999年发布了第四版，目前已被国际公认为/r/n"/r/n金标准/r/n〞/r/n。/r/n国内2002年公布了/r/n"微生物和生物医学实验室生物平安通用准则"/r/n〔WS233－2002〕，这是一个开创性工作。/r/n2003年5月6日/r/n科技部、卫生部、国家食品药品监视管理局和国家环境保护总局联合发布了关于印发"传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理方法"的通知。其内容包括"传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理方法"和"传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和感染动物模型的暂行管理方法"。/r/n2003年8月开场起草，/r/n"实验室生物平安通用要求"/r/nGB19489-2004。2004年5月中华人民共和国质量监视检验检疫总局和中华人民共和国标准化管理委员会正式公布了该标准。/r/n2004年11月12日/r/n，由温家宝总理签发中华人民共和国国务院令/r/n(第424号)公布施行/r/n"病原微生物实验室生物平安管理条例"〔简称"条例"〕/r/n。/r/n〔二〕生物平安实验室的法规/r/n〔1〕病原微生物实验室生物平安管理条例/r/n2004年11月12日/r/n，国务院发布第424号国务院令，公布/r/n"病原微生物实验室生物平安管理条例"/r/n。该条例公布后，农业部和卫生部相继出台了配套文件。/r/n农业部文件包括/r/n"动物病原微生物分类名录"、"高致病性动物病原微生物菌〔毒〕种或者样本运输包装标准"和"高致病性动物病原微生物实验室生物平安管理审批方法"/r/n。/r/n卫生部文件包括/r/n"人间传染的病原微生物名录"和"可感染人类的高致病性病原微生物菌〔毒〕种或样本运输管理规定"/r/n。/r/n〔2〕医疗废物管理条例及配套文件/r/n"医疗废物管理条例"〔第380号国务院令〕已于2003年6月公布,施行。/r/n根据"医疗废物管理条例"，卫生部和国家环境保护总局制定了"医疗废物分类目录"、"医疗废物管理行政处分方法"。卫生部公布实施了"医疗卫生机构医疗废物管理方法"〔2003年8月通过〕。/r/n国家环保总局公布实施了"医疗废物专用包装物、容器标准和警示标识规定"(环发[2003]188号)和"医疗废物集中处置技术标准"〔试行〕〔环发[2003]206号〕。/r/n〔3〕实验室生物平安通用要求/r/n国家标准/r/n"实验室生物平安通用要求"/r/n〔GB19489/r/n—/r/n2004〕已于2004年５月公布，施行。/r/n标准规定了/r/n实验室建立/r/n和实验室/r/n生物平安管理/r/n的原则，内容包括：危害程度和生物平安分级；实验室设施和设备的配置要求；个人防护和实验室平安行为；动物实验室的生物平安等；对实验室的管理〔如操作规程、水电、消防等〕也作了特别要求。/r/n本标准不仅适用于医学实验室，而且适用于进展各个级别的生物因子操作的/r/n各类实验室/r/n。/r/n〔4〕生物平安实验室建筑技术标准/r/n建立部/r/n2004年8月3日/r/n发布公告，"生物平安实验室建筑技术标准"〔GB50346－2004〕自/r/n2004年9月1日/r/n起开场实施。该标准的实施改变了长期以来我国在生物平安实验室建立、建筑技术方面缺乏统一标准的局面。/r/n5、兽医实验室生物平安管理标准/r/n为加强兽医实验室生物平安工作，防止动物病原微生物扩散，确保动物疫病的控制和扑灭工作以及畜牧业生产平安，农业部根据"中华人民共和国动物防疫法"和"动物防疫条件审核管理方法"的有关规定，参照国际有关对实验室生物平安的要求，制定了"兽医实验室生物平安管理标准"。并于2003年10月15日公布施行。/r/n6、传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理方法/r/n科技部/r/n组织制定了/r/n"传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理方法"/r/n，于2003年5月公布施行。/r/n该方法对从事传染性非典型肺炎病毒研究的实验室实行/r/n分级/r/n管理。/r/n实验室分为：传染性非典型肺炎/r/n病毒实验室/r/n、传染性非典型肺炎病毒感染/r/n小动物实验室/r/n、传染性非典型肺炎病毒感染/r/n大动物实验室/r/n。/r/n该方法明确规定了实验室的组织管理、规章制度和安康医疗监视等管理要求。/r/n7、生物平安柜行业标准/r/n目前国内有关生物平安柜的行业标准有两部，分别是国家食品药品监视局(SFDA)制定的YY0569-2005〔2005年7月18日公布，2006年6月1日实施〕以及建立部公布的JG170/r/n—/r/n2005(2005年3月25日公布，2005年6月1日实施)。/r/n8、微生物和生物医学实验室生物平安通用准则/r/n2002年12月，卫生部发布了卫生行业标准"微生物和生物医学实验室生物平安通用准则〔WS233-2002〕"，该准则于2003年８月实施。但鉴于医疗机构微生物和生物医学实验室的实际状况以及生物平安要求的特殊性，卫生部于/r/n2003年8月19日/r/n发布通告〔卫通[2003]14号〕，宣布医疗机构推迟两年执行该准则。在此期间，卫生部将组织有关专家，针对医疗机构微生物和生物平安实验室的特点对该准则进展适当的补充完善，另行下发。/r/n9、国际标准标准/r/n世界卫生组织〔WHO〕一直非常重视实验室生物平安问题，早在1983年就出版了"实验室生物平安手册"，2003年４月第二版(修订版)以电子版形式在ＷＨＯ网页上问世。美国在实验室的生物平安管理方面更是走在了世界的前面，/r/nNIH/CDC/r/n联合出版的/r/n"微生物学及生物医学实验室生物平安准则"/r/n现已推出了第四版。很多国家在制定本国的生物平安准则时，主要参考上述两个标准。/r/n〔三〕病原微生物实验室的有关概念/r/n〔2〕生物性危害预防/r/n1感染途径/r/n‧/r/n吸入悬浮空气中的病原体或带有病原体的/r/n飞沫/r/n‧/r/n手部先接触病原体而其后再接触自己的眼、口或鼻，病原体可透过这些器官的/r/n黏膜/r/n而进入体内/r/n‧/r/n病原体经皮肤的/r/n伤口/r/n或针刺进入体内/r/n‧/r/n进食遭病原体污染的/r/n食物/r/n或饮料/r/n‧/r/n遭动物虫鼠/r/n咬伤/r/n或抓伤/r/n‧/r/n遭蚊/r/n叮/r/n而染上登革热或日本脑炎等病/r/n〔/r/n2/r/n〕生物威胁概念/r/n目前，常见的可被用作武器的病菌有：/r/n埃博拉(Ebola)、天花(Smallpo*)、炭疽热(Anthra*)/r/n等。/r/n从1972年开场，世界上有143个国家签署了/r/n"制止生物武器公约"/r/n，要求制止开展、生产、储存和使用攻击性生物武器。要求制止的生物战剂有：埃博拉、结核、天花、霍乱、炭疽、危马、/r/n甲肝、乙肝、森林脑炎、卡介/r/n等38种对人、动物、植物有攻击性的微生物。/r/n生物战剂-炭疽〔Anthra*〕/r/n在生物平安管制标准〔BSL〕上属于/r/n第三级/r/n，为致死性生物战剂，也是最方便制备，最容易运输，造价最低廉的生物战剂/r/n皮肤型炭疽死亡率约为20%。/r/n呼吸道型炭疽：此型的死亡率几乎为100%/r/n消化道型炭疽:死亡率约为25-60%。/r/n拥有国家：世界大多数国家/r/n生物战剂-天花〔Smallpo*〕/r/n在生物平安管制标准〔BSL〕上属于/r/n第四级/r/n，是世界上最危险的微生物之一/r/n能够透过空气大规模传播，潜伏期长，初期的症狀很像感冒，很容易让人无视，引发大规模疫情，发病率60-90％，死亡率30-50％/r/n1980年，WHO宣布已在全球消灭了天花。世界各国都于20世纪80年代初停顿接种牛痘疫苗。/r/n而天花病毒的免疫期只有10年。30岁以下人群为该武器攻击对象/r/n。/r/n拥有国家：埃及、日本、朝鮮、俄罗斯、美国。/r/n生物战剂-森林脑炎〔forestencephalitis〕/r/n由森林脑炎病毒经蜱所致的急性中枢神经系统传染病/r/n多数国家曾企图将它开发成武器，美苏的生物军火库中就有森林脑炎病毒。/r/n生物战剂-Ebola出血热/r/nEbolavirus在BSL上为/r/n第四级/r/nEbola多出现在非洲偏僻地区，苏联在快解体前差点拥有武器化的Ebola，后来俄国人开发出Ebola的姐妹病毒－马尔堡病毒武器;日本奥姆真理教曾深入扎伊尔寻找Ebola病毒，打算用来进展恐惧活动;以伊Ebola的性质而言，它较适合用在恐惧手段，不适合用在军事行动中，除非是消灭性的攻击。/r/n一般潜伏期为三周，感染者的死亡率高达90％;发病的初期病症容易被误认为是普通的发烧或麻疹，/r/n拥有国家朝鲜、俄罗斯、美国、伊拉克。/r/n外来病(e*oticdisease)：/r/n国外存在和流行的，国内尚未证实存在或已被消灭的传染病。/r/n突发公共卫生事件/r/n(emergenteventsofhealth)：〔简称突发事件〕，是指突然发生，造成或者可能造成社会公众安康严重损害的重大传染病疫情、群体性不明原因疾病、重大食物和职业中毒以及其他严重影响公众安康的事件。突发公共卫生事件的危害性和破坏性是多方面的，不仅危害公众身体安康和生命平安、造成公众心理恐惧，甚至导致社会混乱、经济衰退，威胁国家平安。/r/n不同标准微生物危害等级划分与标准/r/n"病原微生物实验室生物平安管理条例"/r/n"实验室生物平安通用要求"/r/nWHO/r/n"/r/n生物平安手册"/r/n四类/r/n在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。/r/nⅠ/r/n级/r/n〔低个体危害，低群体危害〕不会导致安康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。/r/nⅠ/r/n级/r/n〔无或极低的个体和群体危险〕不太可能引起人或动物致病的微生物。/r/n三类/r/n能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。/r/n

/r/nⅡ/r/n级/r/n(中等个体危害，有限群体危害)能引起人或动物发病，但一般情况下对安康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原微生物。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。/r/nⅡ/r/n级/r/n〔个体危险中等，群体危险低〕病原微生物能够对人或动物致病，但对实验室工作人员、社区、牲畜或环境不易导致严重危害。实验室暴露也许会引起严重感染，但对感染有有效的预防和治疗措施，并且疾病传播的危险有限。/r/n二类/r/n能够引起人类或者动物严重疾病，/r/n比拟容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播/r/n的微生物。/r/nⅢ/r/n级/r/n〔高个体危害，低群体危害〕能引起人类或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能使用抗生素、抗寄生虫药治疗的病原微生物。/r/nⅢ/r/n级/r/n〔个体危险高，群体危险低〕/r/n病原微生物通常能引起人或动物的严重疾病，但一般不会发生感染个体向其他个体的传播，并且对感染有有效的预防和治疗措施。/r/n一类/r/n能够引起人类或者动物非常/r/n严重疾病/r/n的微生物，/r/n以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物/r/n。/r/nⅣ/r/n级/r/n(高个体危害，高群体危害)能引起人类或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，/r/n容易直接或间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物间传播/r/n的病原微生物。/r/nⅣ/r/n级/r/n〔个体和群体的危险均高〕/r/n病原微生物通常能引起人或动物的严重疾病，并且很/r/n容易发生个体之间的直接或间接传播/r/n，对感染一般没有有效的预防和治疗措施。/r/n〔五〕生物平安防护相关概念/r/n1．生物平安防护(bio-safetycontainment)：是指防止生物危险因子，特别是偶然的和有意利用的生物因子，对生物体包括实验室工作者在内的伤害和对环境的污染的意识和措施。实验室生物平安防护分为/r/n一级防护〔屏障〕(primarybarriers)/r/n二级防护〔屏障〕(secondarybarriers)/r/n2．一级防护：包括两方面内容：〔1〕/r/n生物平安柜/r/n(biologicalsafetycabinet,BSC)和类似的设备等，分成三个级别；〔2〕/r/n个人防护装备/r/n(personalprotectiveequipment,PPE)，也分成三个级别。/r/n3.二级防护:是指实验室屏障设施，其建立有4种不同的构造。/r/n各种一级防护和二级防护的组合构成不同防护水平级别的实验室〔BSL-1/r/n〜/r/n4〕。/r/n生物平安防护实验室(biosafetycontainmentforlaboratories):指能够防止或控制被操作的有害生物因子危险的实验室。/r/n措施：通过标准的实验室设计和精心施工、正确的实验设备的配置、适合的个人防护装备的使用、严格管理、翔实的操作规程〔SOP)实现其功能。/r/n建造具有BSL-1和BSL-2的实验室称为/r/n根底实验室/r/n；具有BSL-3防护水平的实验室被称为/r/n生物平安防护实验室/r/n；到达BSL-4水平的称为/r/n高度生物防护实验室/r/n。/r/n5．生物平安柜(bio-safetycabinet,BSCs)：是直接操作危险性微生物时所用的箱形平安设备，是生物平安实验室必备的装备，保护使用者和环境，保护样品。/r/n按防护水平生物平安柜分为I级、II级、III级,II级的又分为4种类型(ClassIIA1、ClassIIA2、ClassIIB1和ClassIIB2)。/r/n6．平安罩(safetyhood)：即覆盖在生物医学实验室工作台或仪器设备上的内部空气压力低于环境压力的经HEPA滤器过滤的排风罩，以减少对实验室工作者和环境的危害。/r/n7．围场操作〔enclose〕：是指操作有害生物因子时，用物理防护设备把病原微生物局限在一定的空间内，防止生物因子对人体的暴露和污染环境。/r/n8．气锁〔airlock〕和缓冲间〔bufferroom〕：气锁是设置在气压不同的邻近二区之间的气压可调节的密闭小室，作为二区的过渡通道。/r/n缓冲间是设在生物平安实验室的清洁区与半污染区之间，或半污染区与污染区之间的类似于气锁的密闭小室，小室的两门互锁。/r/n9．个人防护装备：用于防止人员受到化学和生物等有害因子伤害的器材和装备。其根本目的是屏蔽生物因子,不与人体发生直接接触。我国在传染病和微生物实验室把个人防护分为三级。/r/n10．实验室分区(laboratoryarea)：我国把BSL-3和BSL-4实验室平面布局明确分为：/r/n"/r/n三区二缓/r/n〞/r/n的构造。/r/n"/r/n三区/r/n〞/r/n是指把实验室分成污染(C)、潜在(半)污染(B)、清洁(A)三个功能区。/r/n〔1〕清洁区：是指在正常情况下/r/n不可能有实验因子的污染的区域。/r/n〔2〕半污染区：是指在正常情况下/r/n只有轻微污染可能的区域。此区的功能是大量的准备工作,例如培养基、细胞、制剂的配制、低温冰箱的放置等。在此工作的人员要做好个人防护,如穿上一层防护服、戴口罩和手套等。/r/n〔3〕污染区：是指操作实验因子的地方(BSL-3中心实验室),在操作过程中一定会有污染的区域,有潜在严重污染的可能。/r/n〔4〕缓冲间：是指在A和B之间,B和C之间的区域〔小室〕。缓冲间有送、排风进展净化换气,以保证在人员出入时污染空气不会直接向清洁区扩散或分割到清洁区。其功能包括空气隔离、更衣换鞋、去污染消毒淋浴。/r/n〔5〕传递窗：在BSL-3的A和B,B和C之间各设一个物流通道,以便传递实验物资。它也是2门连锁,并可进展消毒。/r/n生物平安设备分类/r/n1.超净台/r/n2.抽风橱/r/n3.CLASSI一级生物平安柜/r/n4.CLASSII二级生物平安柜/r/n5.CALSSIII三级生物平安柜〔又称手套柜〕/r/n1、超净台/r/n正压柜/r/n气流从顶部或底部经过过滤器后从操作区正面流向工作台面，被样品污染的气流排出柜外，没有循环气流。/r/n超净台保护样品不受污染，适用于普通实验室或1级生物平安水平中/r/n对人员和环境无保护要求/r/n的实验。/r/n2、CLASSI一级生物平安柜/r/n负压柜/r/n气流经操作人员向内进入工作台面，被污染的气流通过HEPA(高效微粒过滤装置)过滤器外排出柜外，没有循环气流。/r/nCLASSI级BSC保护操作人员和环境不受污染，适用于生物平安水平中/r/n对实验样品无保护要求/r/n的实验。/r/n3、CLASSII二级生物平安柜/r/n层流负压柜/r/n它们可以平安的保护样品、人员和环境。/r/nII级生物平安柜分为A型〔30%排在室内〕和B型/r/nB型中又分为B1〔70%接收道外排〕/r/nB2〔100%接收道外排〕/r/nB3〔30%接收道外排〕/r/nCLASSIIA生物平安柜/r/n〔1〕进入气流最低流速平均为0.38米/秒)/r/n〔2〕30%气流经HEPA过滤后外排在室内；/r/n〔3〕被污染的管道和气流通道为正压状态/r/nCLASSIIB1生物平安柜/r/n〔1〕进入的气流最低流速平均为0.5米/秒；/r/n〔2〕70%气流通过专用的管道经HEPA过滤后接收道外排至室外；/r/n〔3〕所有受生物污染的管道和气流通道均在负压状态下或被负压的管道或气流通道包围。/r/nCLASSIIB2生物平安柜/r/n〔1〕进入气流最低流速平均为0.5米/秒；/r/n〔2〕所有向内进入的气流和向下的气流均通过HEPA过滤后排到室外而不在柜内循环，也不能排入实验室；100%接收道外排。/r/n〔3〕所有的被污染的管道和气流通道都在负压状态下或被直接外排的负压管道或气流管道所包围。/r/nCLASSIIB3生物平安柜/r/n〔1〕进入的气流最低流速为0.5米/秒；/r/n〔2〕外排到室外的气流〔30%〕经过HEPA高效过滤；/r/n〔3〕所有经生物污染的管道和气流通道均为负压状态；/r/n〔4〕/r/n与CLASSIIA型气流方向一样，但与CLASSA型不同的是，它30%外排气是接收道排到室外的/r/n4.CLASSIII生物平安柜〔手套柜〕/r/n全封闭的、气密构造的通风柜/r/n通过橡胶手套进展操作；/r/n柜内保持至少120Pa的负压；/r/n供气通过HEPA抽入内；/r/n外排的气流经过双层HEPA过滤或经HEPA后再经燃烧处理。/r/nCLASSIII型BSC适用于/r/nBSL3、BSL4/r/n的生物实验/r/n生物平安装置异同/r/nⅠ/r/n级、/r/nⅡ/r/n级和/r/nⅢ/r/n级生物平安柜的区别/r/n根据保护类型的需要选择适宜的生物平安柜/r/n对各级生物平安水平实验室的要求/r/n技术标准/r/n对不明原因的实验室感染的研究说明，大多数可能是病原微生物形成的/r/n感染性气溶胶/r/n在空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病的。/r/n飞沫核气溶胶粉尘气溶胶/r/n两类微生物气溶胶都具有严重的危害性，其程度取决于微生物本身的毒力、气溶胶的浓度、气溶胶粒子大小、以及当时实验室内的微小气候条件。/r/n粒径/r/n>100/r/n/r/nm/r/n的飞沫沉降很快，而粒径<50/r/n/r/nm的飞沫在0.4s内就扩散开了；粒径<5/r/n/r/nm的飞沫核被人吸入后，可以到达肺深部的肺泡处；粒径>5/r/n/r/nm的飞沫核能够被呼吸道的粘膜捕获。/r/n生物平安实验室的运行标准/r/n〔1〕一级生物平安防护水平〔BSL－1〕/r/nBSL－1不需要特殊的一级和二级屏障、除需要洗手池外，依靠标准的微生物操作即可获得根本的防护水平。/r/n对高压灭菌器、离心机平安罩没有要求；/r/n生物平安柜要求/r/nⅠ/r/n型生物平安柜/r/n防护服/r/n实验室外套/r/n手套/r/n另外,个人防护设备可能也需要/r/n面部防护/r/n眼睛防护/r/n〔2〕二级生物平安防护水平〔BSL－2〕/r/n接触这些致病微生物的工作人员的主要危害是/r/n与感染性材料的偶然的皮肤或粘膜破损/r/n、或吞食感染性食物。必须强调对污染的针头或利器的使用要非常慎重。对未知是通过气溶胶途径传播的微生物、具有可以增加工作人员暴露的可能气溶胶或高度飞溅物的程序，二级生/r/n物平安防护水平微生物操作必需在一级生物平安防护水平的根底之上，/r/n增加生物平安柜、高压灭菌器、平安离心机罩帽、防溅罩或面罩/r/n等。/r/n高压灭菌器/r/n高压灭菌器应选择/r/n立式或台式不排气/r/n〔产生的蒸汽被回收〕的，放置在BSL－2实验室内，或门外。/r/n离心机平安罩/r/n不需要/r/n离心机平安罩。/r/n洗眼器/r/n应根据实验室的实验活动内容，确定是否需要安装洗眼器。如果需要洗眼器，则应安装在BSL－2实验室内靠近出口的地方。/r/n生物平安柜/r/n各实验室根据实际情况选用适宜的/r/nⅡ/r/n级A1型或B1/r/n型生物平安柜。生物平安柜应安装在BSL－2实验室内气流流动小，人员走动少，离门和中央空调送风口较远的地方。生物平安柜的周围应有一定的空间，与墙壁至少保持/r/n30cm/r/n的距离，便于清洁环境卫生。/r/n〔2-1〕BSL-1和BSL-2实验室的进入/r/n未经批准，任何人不得进入实验室工作区域。儿童不得进入实验室工作区域。可能增加获得性感染的危险性或感染后可能引起严重后果的人员不允许进入实验室或动物房。/r/nBSL-2实验室门上应标有国际通用的生物危害警告标志/r/n，包括通用的生物危险性标志，标明传染因子、实验室负责人或其他人姓名、、以及进入实验室的特殊要求。/r/n实验室的门应保持关闭。/r/n工作人员进入动物房应当经过特别批准。/r/n与实验室工作无关的动物不得带入实验室。/r/n〔2-2〕BSL-1和BSL-2防护要求/r/n在实验室工作时，必须穿着适宜的工作服或防护服。/r/n在进展可能接触到血液、体液以及其他具有潜在感染性的材料或感染性动物的操作时，应戴上适宜的手套。手套用完后，应/r/n先消毒再摘除/r/n，随后必须洗手。/r/n在处理完感染性实验材料和动物后，以及在离开实验室工作区域前，都必须/r/n洗手/r/n。/r/n为了防止眼睛或面部受到喷溅物的污染、碰撞或人工紫外线辐射的伤害，/r/n必须戴适宜的平安眼镜/r/n、面罩〔面具〕或其他防护设备。/r/n严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。/r/n不得在实验室内穿露脚趾的鞋。/r/n制止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化装和处理隐形眼镜。/r/n制止在实验室工作区域储存食品和饮料。/r/n在实验室内用过的防护服不得和日常服装放在同一柜子内。/r/n〔2-3〕BSL-1和BSL-2有关操作的指导原则/r/n应/r/n限制使用注射针头和注射器/r/n。除了进展肠道外注射或抽取实验动物体液外，注射针头和注射器不能用于移液或用作其他用途。/r/n污染的液体在排放到生活污水管道以前必须/r/n去除污染/r/n〔采用化学或物理学方法〕。根据所处理的微生物因子的危险度评估结果准备专门的污水处理系统。/r/n只有保证在实验室内没有受到污染的文件纸张才能带出实验室/r/n应当制订/r/n节肢动物和啮齿动物/r/n的控制方案。/r/n〔2-6〕BSL-2平安设备和个体防护/r/n可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出/r/n的操作均应在生物平安柜(/r/nⅡ/r/n级生物平安柜为宜)或其他物理抑制设备中进展，并使用个体防护设备。/r/n处理高浓度或大容量感染性材料/r/n均必须在生物平安柜(/r/nⅡ/r/n级生物平安柜为宜)或其他物理抑制设备中进展，并使用个体防护设备。

上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或平安离心杯，且它们只在生物平安柜中开闭和装载感染性材料，则可在实验室中进展。/r/n当微生物的操作不可能在生物平安柜内进展而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，/r/n必须使用面部保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)/r/n。/r/n4.在实验室中应/r/n穿着工作服或罩衫等防护服/r/n。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出，更不能携带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。/r/n5.当手可能接触感染材料、污染的外表或设备时应戴/r/n手套/r/n。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全完毕前方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。/r/n(2-7)BSL-2实验室设计和建造的特殊要求/r/n每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。/r/n实验室围护构造内外表应易于清洁。地面应防滑、无缝隙。/r/n实验台外表应不透水，耐腐蚀、耐热。/r/n实验室中的家具应结实。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。/r/n实验室应有可开启的窗户，应设置纱窗。/r/n在实验室所在的建筑内应高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。/r/n应设置洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。/r/n实验室门宜带锁、可自动关闭，门有可视窗。/r/n实验室出口应有在黑暗中可明确辨识的标识。/r/n应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。/r/n(2-8)BSL-2实验室操作要点/r/n实验室人口须贴上生物危险标志/r/n，注明危险因子、生物平安级别、负责人姓名和、进人实验室的特殊要求及离开实验室的程序；/r/n所有培养物、废弃物在运出实验室之前/r/n必须进展灭活如高压灭活/r/n。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭防漏的容器内储存、运输及消毒灭菌/r/n如有条件工作人员应承受必要的免疫接种(如卡介苗等)/r/n平安管理制度/r/n实验室内务管理制度/r/n锋利器具平安使用制度/r/n实验室消毒防护制度/r/n标本采集运输制度/r/n废弃物处理制度/r/n工作人员防护制度/r/n过失事故处理制度/r/n锋利器具平安使用制度/r/n除特殊情况外，制止在实验室使用针、注射器及其他利器。尽可能使用塑料器材代替玻璃器材。/r/n尽可能应用一次性注射器，用过的针头制止折弯、剪断、折断、/r/n重新盖帽/r/n、从注射器取下，制止用手直接操作。用过的针头必须直接放入防穿透的容器中。非一次性利器必须放入/r/n厚壁容器中/r/n并运送到特定区域消毒，最好进展高压消毒。/r/n尽可能使用无针注射器和其他平安装置。/r/n制止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须消毒。/r/n完整的注射器应装在防刺透利器盒里，并且不能装满，当装至容积的/r/n四分之三/r/n时就应放入/r/n"/r/n感染性材料/r/n〞/r/n容器里拿去燃烧。/r/n3．/r/n利器盒不许混入垃圾里/r/n。/r/n4．一次性注射器应该放入容器里燃烧，必要时要先高压后燃烧。/r/n废弃物处理/r/n国务院"医疗废物管理条例"/r/n卫生部令"医疗卫生机构医疗废物管理方法"/r/n卫生部文件"医疗废物分类目录"/r/n〔一〕感染性生物材料/r/n实验室应有盛装废弃物的容器，里面盛装适宜的消毒液。废弃物应保持和消毒液直接接触并根据所使用的消毒剂选择浸泡时间，然后把消毒液及废弃物倒入一个容器里以备/r/n高压或燃烧/r/n。盛装废弃物的罐子在再次使用前应高压并洗净。/r/n所有感染性材料都应该在防渗漏的容器里/r/n高压/r/n灭菌，在处理以前，感染性材料装入可高压的黄色塑料袋。高压后，这些材料可放到运输容器里以备运输至燃烧炉。可重复使用的运输容器应防渗漏，并且有密闭的盖子，这些运输容器在送回实验室重新使用前要消毒并清洗干净。/r/n燃烧/r/n是处理污染物〔包括宰杀后的实验动物〕的终末最后步骤，污染物的燃烧必须取得公共卫生机构和环卫部门的批准，也要得到实验室生物平安员的批准。/r/n〔二〕非感染性生物材料/r/n1．单克隆抗体、质粒、细胞等非感染性生物材料集中放置在所里指定的位置，以备/r/n高压蒸汽灭菌/r/n后废弃；/r/n2．用来盛放的容器应用消毒液浸泡；/r/n3．严格与感染性生物材料区分，防止二者混放；/r/n4．过期的生物性试剂材料应废弃，制止使用。/r/n(3)三级生物平安防护水平〔BSL－3〕/r/n三级生物平安防护水平是指实验室的操作、平安设备、和设施适用于操作/r/n我国第二类〔个别第一类〕/r/n病原微生物。这些致病微生物对工作人员的主要危害是/r/n与自身接种(自伤)、吞服、和暴露于感染性气溶胶/r/n。/r/n三级生物平安防护水平有严格的一级防护屏障和二级防护屏障的要求，以防止相邻区域的工作人员、社会和环境暴露于可能的感染性气溶胶。例如，所有实验室操作应该在生物平安柜或其它密闭容器中操作，诸如气密型气溶胶发生柜。这一水平的二级屏障包括/r/n实验室的控制入口/r/n和/r/n为减小感染性气溶胶从实验室释放的特殊通风系统/r/n。/r/nBSL－3实验室平安设备的要求/r/n生物平安柜:BSL－3实验室必须安装和使用生物平安柜，应根据病原微生物试验活动的内容的不同，选择不同型别的生物平安柜。/r/nⅡ/r/n级A2型、B1型生物平安柜，B2型/r/n生物平安柜也可以使用，但因换气量太大，对实验室负压和气流的影响比拟大，/r/n一般不需要使用/r/nⅡ/r/n级B2生物平安柜/r/n；少数特殊操作〔如感染的中型和大型动物解剖〕可以使用/r/nⅡ/r/n级B2生物平安柜。/r/nBSL－3平安设备(一级屏障)/r/n在BSL-1and2平安设备的根底上，加:呼吸道保护/r/n高压灭菌器:在BSL－3实验室的/r/n半污染区和清洁区/r/n之间，宜安装双扉生物平安型高压灭菌器，即高压灭菌器跨墙安装，双门互锁构造，且对高压产生的蒸汽具有回收再高压的性能。高压灭菌器的安装，必须确保高压灭菌器与墙体之间的密封，不能够有一点泄漏。污染区内应设置不排蒸汽的高压蒸汽灭菌器或其他消毒装置。/r/n离心机平安罩:是否需要离心机平安罩，取决于离心机的类型。如果是传统型的离心机，最好安装离心机平安罩；如果离心机是新式生物平安型的，即负压离心机或有离心杯帽的离心机，则不需要离心机平安罩。离心机和平安罩宜靠近排风口。/r/n(4)四级生物平安防护水平〔BSL－4〕/r/n四级生物平安防护水平的微生物对工作人员的主要危害是/r/n呼吸道暴露/r/n于感染性气溶胶、粘膜暴露于感染性飞沫、和自身接种。所有操作可能具有感染性的诊断材料、别离培养物、以及自然或实验感染的动物时，实验室工作人员、社会和环境均可造成高度危险的感染。/r/n配套的生物平安柜，人员身着带/r/n正压的连衣裤/r/n，实验室/r/n空气经过滤/r/n，配备带双门的高压灭菌器，除了三级防护措施外，人员进入实验室时，应经过密封的过渡舱，离开时应经/r/n风淋/r/n，生物废弃物应经特殊处理./r/n四级生物平安防护水平设施一般是独立建筑物或具有复杂的、特殊的通风系统和防止活的微生物释放到环境中的污物处理系统与其它建筑完全隔离。/r/n生物平安柜/r/nBSL－4实验室必须安装和使用生物平安柜，应根据病原微生物试验活动的内容的不同，可以选择/r/nⅡ/r/n级B型和/r/nⅢ/r/n级/r/n两种不同型别的生物平安柜。/r/n在正压防护服型BSL－4实验室内，可以选择/r/nⅡ/r/n级生物平安柜；在生物平安柜型BSL－4实验室中，选择/r/nⅢ/r/n级生物平安柜；在混合型BSL－4实验室中，/r/n应选择/r/nⅢ/r/n级生物平安柜/r/n。/r/n感染性物质运输包装标准/r/n感染性及潜在感染性物质的运输应使用三层包装系统 /r/n内层容器中层包装外层包装/r/n-将样品采用防水、防漏的内层容器包装并贴上指示内容物的标签后装入中层容器/r/n-内层容器和中层容器间应放置足量的吸水性材料，以便内层容器打破或泄漏时能吸收溢出的所有液体。/r/n-然后将中层容器固定在硬质外层容器中以免中层容器在运输过程中受到物理性损坏。/r/n必须标注生物危险标识/r/n"/r/n高致病性动物病原微生物，非专业人员严禁拆开！/r/n〞的警告语。/r/n临床实验室生物平安/r/n我国将病原微生物分为四类/r/n病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度/r/n第一类病原微生物:人类或者动物非常严重疾病，我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物/r/n第二类病原微生物:人类或者动物严重疾病，比拟容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物之间传播的微生物/r/n第三类病原微生物:是人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物/r/n第四类病原微生物:是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物/r/n实验室分区:/r/n"/r/n清洁/r/n〞/r/n和/r/n"/r/n非清洁/r/n〞/r/n工作区，在清洁区和非清洁区之间设/r/n"/r/n缓冲室/r/n〞/r/n"/r/n清洁/r/n〞/r/n区：采取预防措施，防止区内物品的污染－－/r/n保物/r/n"/r/n非清洁/r/n〞/r/n区：戴手套操作－－/r/n保人/r/n清洁区：包括办公室、休息室、培养基室等/r/n半污染区：包括缓冲间、更衣室和卫生通道等/r/n污染区：包括样本收集区、处理区、培养区和废弃物处理区等/r/n灭火/r/n学会使用灭火器〔一拔、二握、三瞄、四扫〕/r/n易燃固体、易燃气体、易燃液体和带电物体着火时，可用干粉灭火器灭火/r/n导线或电器着火时，应先断电，再用干粉灭火器灭火/r/n切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电/r/n衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动，切忌外跑/r/n灭火器/r/nA类/r/n灭火器适用于固体可燃物(如纸、木材、塑料)引起的火灾－－消防水栓/r/nB类/r/n灭火器适用于汽油和溶剂引起的火灾－－二氧化碳或化学干粉，如碳酸氢钠/r/nC类/r/n灭火器适用于电气引起的火灾/r/n压缩气体的平安准则/r/n平安：气瓶内的气体不可用尽/r/n/r/n一般实验室内存放气瓶量不得超过两瓶。/r/n/r/n氢气瓶和氧气瓶不能同存一处/r/n临床实验室生物平安防护：/r/n1./r/n平安设备/r/n2./r/n个体防护装置和措施/r/n(/r/n一级防护/r/n)/r/n3./r/n实验室的特殊设计和建立要求/r/n(/r/n二级防护/r/n)/r/n4./r/n严格的管理制度和标准化的操作及规程/r/n危害评估/r/n按照国际通行的原则,危害评估一般分四个步骤：/r/n危险度评估、暴露评估、剂量---效应评估、危害综合评估/r/n危险度评估/r/n生物平安工作的核心是危险度评估，最重要的是专业判断。/r/n微生物危险度评估最有用的工具之一就是列出微生物的危险度等级/r/n影响危险度评估的因素:/r/n确定危险度等级的同时考虑以下因素：/r/n①/r/n微生物的致病性和感染数量；/r/n②/r/n暴露的潜在后果；/r/n③/r/n自然感染途径/r/n④/r/n微生物在环境中的稳定性/r/n⑤/r/n所操作微生物的浓度和浓缩标本的容量/r/n⑥/r/n适宜宿主〔人或动物〕的存在/r/n⑦/r/n从动物研究和实验室感染报告或临床报告中得到的信息/r/n⑧/r/n方案进展的实验室操作〔如超声处理、气溶胶化、离心等〕/r/n⑨/r/n基因技术/r/n⑩/r/n当地是否能进展有效的预防或治疗干预/r/n病原微生物危险度分级/r/nWHO&通用要求:危险度1~4级(渐高)/r/n条例要求:危险度一~四类〔渐低〕/r/n危险度1级无或极低的个体和群体危险/r/n危险度2级个体危险中等，群体危险低/r/n危险度3级个体危险高，群体危险低/r/n危险度4级个体和群体危险均高/r/n临床实验室危险度/r/n在对相对信息了解较少时进展危险度评估时，应慎重地采取一些较为保守的标本处理方法。在临床实验室，标本取自患者，处理此类标本时/r/n最低需要二级生物平安水平/r/n实验室生物平安防护水平/r/n科研人员进入四级生物平安防护〔BSL-4〕实验室，必须换上特制的正压防护服。进入到实验室核心区，先后得穿4层防护服、戴两层口罩、眼罩、防护鞋、手套等/r/n有时手套要戴6层。如室内的病原微生物可通过空气传播，还得戴上面具。光穿防护设施至少得花30分钟/r/n锐器所致事故性划伤或擦伤/r/n①/r/n肥皂液和流动水清洗伤口，在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液/r/n再用肥皂液和流动水进展冲洗，制止进展伤口的局部挤压/r/n②/r/n受伤部位的伤口冲洗后，75%酒精或0.5%碘伏进展消毒，并包扎伤口/r/n③/r/n随即向有关负责人报告/r/n实验动物的生物平安/r/n国家或地方实验动物主要法规、标准/r/n"实验动物许可证管理方法〔试行〕"〔国家：2001、广东省：2002〕/r/n实验动物及其设施的等级/r/n实验动物分为四级/r/n：一级为普通级；二级为清洁级；三级为无特定病原体〔SPF〕级；四级为无菌级〔包括悉生动物〕。目前比格犬、恒河猴、小型猪等大动物多为普通级，大、小鼠均为清洁级以上，豚鼠、家兔等既有普通级，又有清洁级、SPF级。/r/n实验动物设施/r/n分为三级：一级为普通环境；二级为屏障环境；三级为隔离环境。/r/n隔离环境/r/n是以隔离器为主体及其附属装置组成的饲养系统。用作饲养/r/nSPF/r/n、无菌动物和菌动物。/r/n屏障环境/r/n是清洁级、/r/nSPF/r/n级动物生产或实验的设施。人、实验动物、饲料、饮水、垫料、空气及其它物品均需进展严格的微生物控制。/r/n普通环境/r/n只能进展普通级实验动物的生产与实验。/r/n实验动物生产的生物平安：/r/n实验动物生产过程中，对实验动物可能造成的各种风险和危害的防范和控制。/r/n实验动物生产，包括实验动物的/r/n引种、保种、繁育、运输、进出口/r/n等过程。/r/n定期进展严格的微生物指标监测。/r/n实验动物及其动物实验的操作/r/n不同品种、不同等级和互有干扰的动物实验，/r/n不得在同一实验间进展饲养/r/n，同一来源、一样品种、品系而/r/n用于不同实验目的动物实验饲养，/r/n也不得在同一实验间进展/r/n。/r/n不得将普通级动物带进屏障环境中进展实验，/r/n如将实验动物带离屏障环境进展实验，/r/n不得再带回屏障环境中进展饲养、实验。/r/n实验动物误伤的处理/r/n实验动物咬伤救治在伤口上方扎止血带，然后用高猛酸钾或双氧水冲洗伤口，并用5％石炭酸或硝酸烧灼腐蚀伤处。/r/n如被实验犬咬伤，/r/n首先要把污血挤出，别让血存在伤口里，否则容易引起感染。如果伤口小，则可以先用肥皂水清洗伤口，然后用清水冲干净，最后涂上一些碘酒。伤口假设比拟大或自己不好处理，最好去医院处理。同时24小时内注射疫苗，在防疫站注射。/r/n〔一〕流行性出血热〔肾综合征出血热HFRS〕/r/n1/r/n、病原体：汉坦病毒。/r/n传染源/r/n——/r/n带病毒黑线姬鼠和褐家鼠，实验大鼠也偶尔传播。/r/n2/r/n、传播途径/r/n——/r/n污染尘埃飞扬形成气溶胶吸入感染。带病毒的血、尿污染人皮肤破损处，也使人患病。/r/n3/r/n、易感者/r/n——/r/n人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔。/r/n4/r/n、病症/r/n——/r/n潜伏期/r/n14/r/n天；动物无明显病症；人感染后出现高热、出血、休克、肾功能受损和循环衰竭，严重者死亡。/r/n〔二〕/r/n淋巴细胞性脉络丛脑膜炎/r/n1/r/n、传染源/r/n——/r/n淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒。带病毒野小鼠或实验小鼠为传染源。/r/n2/r/n、传播途径/r/n——/r/n带病毒小鼠的分泌物、排泄物污染，吸血昆虫传播，胎盘垂直传播。/r/n3/r/n、易感者/r/n——/r/n人，小鼠、猴、豚鼠、大鼠、地鼠、兔、狗、鸡等。/r/n4/r/n、病症/r/n——/r/n人感染后表现类似流感样病症，有三种表现：大脑型、内脏型、迟发型。/r/n实验动物福利/r/n善待实验动物，/r/n推行3R/r/n方案，即/r/nReplacement〔/r/n替代〕/r/n、/r/nReduction〔/r/n减少〕/r/n和/r/nRefinement〔/r/n优化〕。/r/n替代：在实验动物替代方面，利用离体培养的器官、组织和细胞代替整体动物，在单克隆抗体产生、病毒疫苗制备、效力和平安试验、细胞膜研究等工程中已广泛使用。还有用低等动物代替高等动物，用物理、化学和信息技术方法代替动物实验，这些替代方法的研究和应用，都减少了实验动物用量。/r/n减少：在减少动物用量方面的措施还有：合并使用动物，如利用死亡的动物进展外科手术实验，利用病理解剖实验摘取动物的器官等；改进统计学设计，以少量动物获得大量统计学资料；使用高质量的实验动物，同样可以起到以质量代替数量的作用等。/r/n优化：在动物实验的优化方面，通过改进仪器设备，减少动物的痛苦；改善实验室条件，减少对动物的刺激，防止应激反响；优化实验方法，尽量减少实验动物用量，给予动物人道处死、施行安死术。/r/n基因工程生物平安/r/n基因工程生物的平安性问题/r/n环境平安性/r/n(/r/ndamagetothenaturalenvironment/r/n)/r/n转基因植物演变成农田杂草的可能性/r/n基因漂流到近缘野生种的可能性/r/n对非目标生物的影响/r/n现代农业生产平安性/r/n(/r/ndisruptionofcurrentpracticesoffarming/r/n)/r/n作物－作物间的基因漂流/r/n转基因食品平安性/r/n(/r/ndamagetohuman/r/nhealth)/r/n过敏性/r/n抗生素抗性的水平转移/r/n外源/r/nDNA/r/n的食用/r/n营养水平的改变/r/n基因工程工作平安等级/r/n基因工程工作分/r/n4/r/n个平安等级。与研究对象、采用的载体系统、转化方法等相关。/r/nⅠ/r/n级：不存在危险/r/nⅡ/r/n级：低度危险/r/nⅢ/r/n级：中度危险/r/nⅣ/r/n级：高度危险/r/n生物实验室分为/r/n4/r/n个级别：/r/nBSL1/r/n、/r/nBSL2/r/n、/r/nBSL3/r/n、/r/nBSL4/r/n。/r/nBSL1/r/n或/r/nBSL2/r/n级：不需过滤空气，台面防酸碱、耐热，有通风柜等/r/nBSL3/r/n或/r/nBSL4/r/n级：特殊空气双过滤系统和排放液体的消毒系统。/r/n根据基因操作对受体生物平安性的影响确定基因操作对平安性的影响类型/r/nI/r/n、/r/nII/r/n、/r/nIII/r/n。/r/n〔/r/nP137/r/n〕/r/n影响类型I/r/n：增加受体生物的平安性。/r/n影响类型II/r/n：对受体生物的平安性没有影响。/r/n影响类型III/r/n：受体生物的平安性降低。/r/n基因工程药物审批的一般程序〔/r/n5~9/r/n年〕/r/n实验研究：在实验室的工作，为以后大规模生产提供理论依据。/r/n小量试制：临床前的平安性和有效性试验，制定制造与检测的根本要求。/r/n中间试制：动物实验，/r/nⅠ/r/n期、/r/nⅡ/r/n期、/r/nⅢ/r/n期和/r/nⅣ/r/n期临床试验。/r/n试生产和正式生产。/r/n辐射生物平安/r/n辐射生物效应分类/r/n随机性效应〔/r/nstochasticeffect/r/n〕：发生机率〔而非其严重程度〕与剂量的大小有关的效应。这种效应被认为不存在剂量的阈值，如辐射致癌效应、遗传效应/r/n可能不等于一定；/r/n可能性的大小与剂量大小成正比；/r/n不存在平安剂量，危险总是存在。/r/n非随机性效应〔/r/nnon-stochasticeffect)/r/n或确定性效应〕：发生机率、效应的严重程度随剂量而变化的生物效应。这种效应存在剂量的阈值。如眼晶体的白内障、造血功能障碍、皮肤的良性损伤等/r/n剂量大于阈值时，才会出现随机效应；/r/n剂量越大，所产生的临床效应越严重；/r/n对于不同的组织，产生临床效应的阈值不同/r/n辐射防护的根本原则/r/n实践的正当化〔/r/nlegtimacy/r/n〕/r/n防护的最优化〔/r/noptimization/r/n〕/r/n个人剂量限值〔/r/nindividualdosagelimit/r/n〕/r/n实践的正当化

/r/n实践活动时，首先必须权衡利弊，除了作为一项实践认为是正当以外，还要考虑对每一次操作的正当性/r/n防护的最优化/r/n最优化就是在考虑到经济和社会因素之后，使任何辐射照射保持在可以合理做到的尽可能低的水平，即/r/nALARA/r/n原则。

/r/naslowasreasonablyachievable/r/n个人剂量限值/r/n个人剂量限值是指放射性职业人员和广阔居民个人所受的当量剂量的国家标准限值。/r/n个人剂量限值是个人在1年期间受到总剂量(外照射＋内照射〕/r/n对职业人员/r/n：将辐射照射对职业人员所产生的危险度降低到/r/n与从事其他职业的危险度相当。/r/n对公众个人/r/n：将辐射照射对周围公众个人所产生的危险度降/r/n低到与人类在日常生活中可能遭遇的危险度相当。/r/nICRP/r/n新建议：/r/n确定以有效剂量表示的职业照射的剂量限值是：在限定的/r/n5/r/n年期间内平均每年/r/n20mSv/r/n，任何单独/r/n1/r/n年不得超过/r/n50mSv/r/n。/r/n新建议把职业照射年剂量从50mSv/r/n降到/r/n20mSv(5/r/n年平均/r/n)/r/n。/r/n教学中照射的防护要求/r/n放射学专业学生/r/n:/r/n划分为职业放射职业人员/r/n非放射专业学生：限值为全身/r/n0.5mSV/a/r/n单个器官/r/n5mSV/a/r/n医疗照射对非患者受照的约束/r/n非患者/r/n公共成员在候诊室/r/n医学研究中的志愿者做*些辐射研究对照组/r/n有特殊人员的护理和搀扶/r/n亲朋好友的探视及慰问等/r/n此类