2023年广西名校高三下学期第六次检测生物试卷（含答案解析）

2023学年高考生物模拟试卷考生须知：1．全卷分选择题和非选择题两部分，全部在答题纸上作答。选择题必须用2B铅笔填涂；非选择题的答案必须用黑色字迹的钢笔或答字笔写在“答题纸”相应位置上。2．请用黑色字迹的钢笔或答字笔在“答题纸”上先填写姓名和准考证号。3．保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破、弄皱，在草稿纸、试题卷上答题无效。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．叶绿体起源的内共生假说认为，蓝藻被真核细胞吞噬后，在共同生存繁衍的过程中，蓝藻进化为宿主细胞内专门进行光合作用的细胞器——叶绿体。下列说法不支持该假说的是（）A．叶绿体内的核糖体与蓝藻的类似，而与植物细胞质的核糖体不同B．叶绿体外膜成分与植物细胞膜相似，内膜成分与蓝藻细胞膜相似C．叶绿体通过二分裂方式增殖，遗传物质为裸露环状DNAD．叶绿体中含有叶绿素和类胡萝卜素，蓝藻含有藻蓝素和叶绿素2．关于二倍体生物在自然状态下进行有丝分裂和减数分裂异同点的叙述，正确的是（）A．纺锤丝牵引着移动到同一极的染色体都是非同源染色体B．减数分裂过程中核基因数目与染色体组数的加倍减半都是同步的C．有丝分裂产生的不同子细胞中核基因组成都是相同的D．等位基因的分离可发生在有丝分裂后期、减数第二次分裂后期3．线粒体是一种存在于大多数细胞中的由两层膜包被的细胞器，是细胞中进行能量转换的结构，是细胞进行有氧呼吸的主要场所，被称为“powerhouse”。下图为线粒体中相关物质的生物合成示意图，下列分析错误的是（）A．线粒体中有核糖体以及RNA聚合酶、解旋酶等物质B．仅靠线粒体内基因的表达产物，线粒体不能完成全部的代谢C．图中遗传信息的流动过程中碱基互补配对方式完全相同D．与核DNA表达相比，线粒体DNA的表达没有空间上的障碍4．研究人员调查了两个不同类型的陆地自然生态系统Ⅰ和Ⅱ中各营养级的生物量，结果如下图，已知流经两个生态系统的总能量、两个生态系统中分解者的数量相同，下列相关叙述正确的是（）A．生态系统的抵抗力稳定性Ⅰ小于ⅡB．储存在生物体有机物中的能量，生态系统Ⅰ小于ⅡC．生态系统Ⅰ中只有一条含三个营养级的食物链D．生态系统Ⅱ中，单位时间内各营养级所得到的能量不能形成金字塔图形5．植物细胞有丝分裂过程中，一对姐妹染色单体（a、b）的切面变化及运行如图所示，①→②→③表示a、b位置的依次变化路径，下列有关叙述正确的是（）A．a、b上的基因总是完全相同B．①时，最便于观察和研究染色体C．②→③，染色体数目加倍，这是纺锤丝牵拉的结果D．②时的染色体大小与①时不相同6．关于图中曲线所示内容，下列说法错误的是（）A．若横坐标代表时间，纵坐标代表原生质层与细胞壁之间的距离，则OP段植物细胞的吸水能力不断增强B．若横坐标代表物质浓度，纵坐标代表物质运输速率，则葡萄糖进入红细胞可用该曲线表示C．若横坐标代表酶促反应的时间，纵坐标代表生成物的量，则P点时增加酶量可使曲线上升D．若横坐标代表光照强度，纵坐标代表光合速率，则降低环境中的CO2浓度可使P点向左下方移动二、综合题：本大题共4小题7．（9分）宫颈癌是由人乳头瘤病毒（HPV）感染引起的，某实验小组为了检测牛痘重组病毒疫苗ta-HPV对宫颈癌的预防效果，将未感染HPV的多只生理状况相同的健康雌性小鼠随机均分为甲、乙、丙三组，实验过程及结果如下图所示。请回答下列问题：（1）向小鼠体内注射ta-HPV后，进入机体的ta-HPV首先被_________摄取和处理并传给T细胞，受抗原刺激的T细胞产生淋巴因子。淋巴因子具有_________的功能。（2）15天后同时向甲、乙两组小鼠注射HPV后，甲组小鼠体内的抗体浓度峰值大于乙组的，峰值出现时间也早于乙组小鼠，原因是___________________________。（3）实验小组将已免疫甲组小鼠的血浆注射到丙组小鼠体内后再注射HPV，培养30天后小鼠未被检测到患宫颈癌，其原因是___________________________。（4）给小鼠注射HPV会诱发小鼠患宫颈癌等恶性肿瘤，主要是机体免疫系统的_________功能下降甚至丧失导致的。8．（10分）人们可以采用许多恢复生态学技术来治理退化的生态系统，例如分步骤在盐碱化草原种植不同植物，以改造盐碱化草原，并采用生态工程的办法进行生态恢复。请回答：（1）恢复生态学主要利用的是_____理论，并人为增加_____的投入，从而尽快使生态系统的____恢复到（或接近）受干扰前的正常健康状态。（2）恢复后的草原动植物种类和数量，土壤中有机物含量均有明显增加。土壤有机物的来源有_____。（3）采用恢复生态学技术改造盐碱化草原的生态学意义是____。9．（10分）图甲表示A、B两个品种大豆的光合速率受光照强度影响的变化曲线；图乙表示将长势相同、数量相等的A、B两个品种的大豆幼苗分别置于两个相同的密闭透明玻璃罩内，在光照强度、温度相同的条件下培养相同时间，定时测定玻璃罩内的CO2含量所绘的曲线，请据图回答：（1）据图甲分析，a点时，B品种大豆叶肉细胞中能产生ATP的细胞器是______________；在较长时间连续阴雨的环境中，生长受影响更显著的大豆品种是______（填字母）。（2）据图乙分析，30-45min期间两个玻璃罩内CO2含量相对稳定的原因是______________。（3）有同学分析以后判定乙图中曲线②代表大豆A品种，曲线①代表大豆B品种，该判断是否合理？______（填“合理”或“不合理”），理由是______________________________。（4）若将A品种大豆的某一叶片在25℃条件下暗处理1小时，该叶片质量（以葡萄糖衡量）减少了2mg，之后光照1小时，经称重，光照后比暗处理前质量增加了5mg，该叶片光照1小时合成葡萄糖的质量为_______mg。10．（10分）癌细胞表面蛋白“PDL-1”与T细胞表面蛋白“PD-1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细胞发生免疫“逃逸”。研究者对“PD-1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：α链：5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β链：5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'图1（1）首先提取细胞中的mRNA反转录生成____________________作为模板；设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物，通过____________________技术扩增目的基因。（2）选用图1中的两种名称分别为____________________的限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外，还必须具有____________________等。（3）而后一定温度下，与经过处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____________培养基中，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。（4）将扩增后的“pIRES2-EGFP载体/PD-1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有____________________。为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与____________________发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2-EGFP载体”转入293T细胞，其目的是_________________________。11．（15分）回答下列问题：（1）早期的地球生态系统是两极生态系统，只有生产者和分解者。后来出现了第三极_____，一方面使生态系统更加稳定，另一方面对植物的进化产生了重要的影响，这是因为第三极具有的作用有_________________________________________________________________。（2）种群增长的“J型曲线模型建立的前提是食物充足、______________这样的种群就没有环境阻力和自然选择。如果再加上种群足够大、个体间随机交配，并且没有迁入迁出和基因突变，那么这个种群将__________________________。（3）塞罕坝生态系统的重建是恢复生态学的典例。恢复生态学的理论依据是___________。

2023学年模拟测试卷参考答案（含详细解析）一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、D【答案解析】

叶绿体是细胞中具有双层膜的一种细胞器，其内部含有DNA、RNA和核糖体，可以进行复制、转录和翻译，是一种半自主性的细胞器。在内部分布有光合色素和有关的酶，可以进行光合作用产生有机物。内共生假说假定叶绿体来自于一个独立的蓝藻。【题目详解】A、叶绿体内部含有核糖体，其与蓝藻这种原核生物的核糖体相似，而与植物细胞的核糖体不同，可作为叶绿体来源于蓝藻的依据，A正确；B、内共生假说假定叶肉细胞把蓝藻细胞胞吞进细胞内，则在蓝藻细胞外形成一层囊泡，这层囊泡来自于植物细胞膜，后续演变为叶绿体的外膜，而叶绿体的内膜为原来蓝藻细胞的细胞膜，B正确；C、叶绿体的分列方式类似于原核生物的二分裂，且内部的遗传物质储存形式也类似于原核生物的拟核，为裸露的DNA，C正确；D、叶绿体和蓝藻中含有的光合色素有区别，因此不能证明内共生假说的正确性，D错误；故选D。【答案点睛】该题的突破点为通过题干中对内共生假说的介绍，有目的寻找叶绿体这种真核生物中的细胞器和原核生物蓝藻的共同点作为假说成立的依据即可。2、D【答案解析】

1、有丝分裂不同时期的特点：（1）间期：进行DNA的复制和有关蛋白质的合成；（2）前期：核膜、核仁逐渐解体消失，出现纺锤体和染色体；（3）中期：染色体形态固定、数目清晰；（4）后期：着丝点分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，并均匀地移向两极；（5）末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。2、减数分裂过程：（1）减数第一次分裂间期：染色体的复制。（2）减数第一次分裂：①前期：联会，同源染色体上的非姐妹染色单体交叉互换；②中期：同源染色体成对的排列在赤道板上；③后期：同源染色体分离，非同源染色体自由组合；④末期：细胞质分裂。（3）减数第二次分裂过程：①前期：核膜、核仁逐渐解体消失，出现纺锤体和染色体；②中期：染色体形态固定、数目清晰；③后期：着丝点分裂，姐妹染色单体分开成为染色体，并均匀地移向两极；④末期：核膜、核仁重建、纺锤体和染色体消失。【题目详解】A、有丝分裂后期，纺锤丝牵引移到同一极的染色体有同源染色体，也有非同源染色体。减数第一次分裂后期，同源染色体分离，非同源染色体自由组合，因此移向同一极的染色体是非同源染色体。减数第二次分裂后期，移向同一极的也是非同源染色体，A错误；B、减数分裂过程中，核基因数目在减数第一次分裂前的间期随DNA复制而加倍，而染色体组数只在减数第二次分裂后期随着丝点分裂而加倍。核基因数目与染色体组数都是随减数第一次分裂、减数第二次分裂完成而减半的，因此，二者的加倍不同步，B错误；C、有丝分裂过程中，可能发生基因突变，因此不同子细胞中核基因组成可能不同，C错误；D、有丝分裂间期，可能发生基因突变，导致姐妹染色单体上存在等位基因。减数第一次分裂的前期，交叉互换也会导致姐妹染色单体上存在等位基因，因此等位基因的分离可发生在有丝分裂后期、减数第二次分裂后期，D正确。故选D。3、C【答案解析】

DNA复制、转录、翻译的比较

复制转录翻译时间

细胞分裂间期（有丝分裂和减数第一次分裂）

个体生长发育的整个过程场所主要在细胞核主要在细胞核细胞质的核糖体模板DNA的两条链DNA的一条链mRNA原料4种游离的脱氧核苷酸4种游离的核糖核苷酸20种游离的氨基酸条件酶（解旋酶，DNA聚合酶等）、ATP酶（RNA聚合酶等）、ATP酶、ATP、tRNA产物2个双链DNA一个单链RNA多肽链特点半保留，边解旋边复制边解旋边转录一个mRNA上结合多个核糖体，顺次合成多条肽链碱基配对A-T

T-A

C-G

G-CA-U

T-A

C-G

G-CA-U

U-A

C-G

G-C遗传信息传递DNA----DNADNA------mRNAmRNA-------蛋白质意义

使遗传信息从亲代传递给子代表达遗传信息，使生物表现出各种性状【题目详解】A、线粒体中能进行DNA的复制，说明有解旋酶，能进行遗传信息的转录说明有RNA聚合酶，能进行翻译说明有核糖体，A正确；B、线粒体内基因的表达产物和核基因的表达产物共同使线粒体完成全部的代谢，B正确；C、图中遗传信息的流动过程中碱基互补配对方式不完全相同，DNA复制过程中有A与T的配对，而遗传信息的转录过程中A只能与U配对，C错误；D、核DNA的转录发生在细胞核，翻译发生在核糖体，线粒体DNA的表达都在线粒体中进行，D正确。故选C。4、B【答案解析】

分析柱状图：生态系统Ⅰ有三个营养级，生态系统Ⅱ有四个营养级，在生产者含有的总能量相同的前提下，生态系统Ⅰ营养级少、食物链较短，能量流动过程中散失的能量少；而生态系统Ⅱ营养级多、食物链较长，能量流动过程中散失的多。【题目详解】A、生态系统的物种丰富度越大，营养结构越复杂，则其抵抗力稳定性越强，而生态系统I和Ⅱ的物种丰富度和营养结构未知，无法比较抵抗力稳定性，A错误；B、储存在生物体有机物中的能量，是各个营养级用于生长、发育和繁殖等生命活动能量，而不是流经两个生态系统的总能量。两个生态系统中分解者的数量相同，生态系统I的生物量小于Ⅱ，因此储存在生物体有机物中的能量，生态系统I小于II，B正确；C、生态系统I中每个营养级可能包括多个种群，因此，生态系统中应该包括多条食物链，C错误；D、生态系统的能量流动有逐级递减的特点，因此单位时间内各营养级所得到的能量可形成金字塔图形，D错误。故选B。【答案点睛】本题结合柱形图，考查生态系统的功能，重点考查生态系统的能量流动，要求考生识记生态系统中能量流动的过程及特点，掌握能量传递效率的相关计算，能结合图中信息准确判断各选项。5、D【答案解析】

有丝分裂中期和后期的特点中期：这时染色体继续凝聚变短更为清晰地排列在纺锤体的中央，各染色体的着丝粒都排列在细胞中央的一个平面上，这个平面垂直于纺锤体的中轴，与地球赤道的位置相似，中期的染色体缩短到最小的程度，最便于观察和研究，可以通过数着丝粒的数目来确认染色体的数目；后期：染色体的着丝粒已经分为两个，所以中期以后各染色体的两个单体实际上已经转变为两个独立的染色体了，染色体的数目增加了一倍，后期这些分离的染色体以相同的速率分别被纺锤丝拉向两极，两极之间的距离也加大了，这时袁原来的一套染色体已经变成了完全相同的两套。【题目详解】A、由于基因突变的存在，a、b上的基因并非总是完全相同，A错误；B、②时表示染色体位于赤道板上，此时染色体形态固定，数目清晰，最便于观察和研究染色体，B错误；C、②→③，染色单体分离，染色体数目加倍，该过程不是纺锤丝牵拉的结果，是着丝点一分为二的结果，C错误；D、②时的染色体高度螺旋化，缩短变粗，故②时的染色体大小与①时不相同，D正确。故选D。6、C【答案解析】

由曲线可知：曲线OP段纵坐标随着横坐标的增加而增加，P点后限制纵坐标的因素不再是横坐标。【题目详解】A、若横坐标代表时间，纵坐标代表原生质层与细胞壁之间的距离，则OP段植物细胞正在发生质壁分离，其吸水能力不断增强，A正确；B、若横坐标代表物质浓度，纵坐标代表物质运输速率，则P点后的限制因素为载体蛋白的数量，故该曲线可以表示协助扩散，葡萄糖进入红细胞的方式为协助扩散，B正确；C、若横坐标代表酶促反应的时间，纵坐标代表生成物的量，P点时反应体系中的反应物已经全部转变为生成物，生成物的量达到最大值，此时增加酶量并不会增加生成物的量，C错误；D、若横坐标代表光照强度，纵坐标代表光合速率，降低环境中的CO2浓度，可使光合速率下降，P点向左下方移动，D正确。故选C。二、综合题：本大题共4小题7、吞噬细胞促进B细胞增殖、分化产生浆细胞和记忆细胞甲组小鼠初次免疫后机体产生了记忆细胞，二次免疫会导致记忆细胞快速增殖分化产生大量浆细胞，以合成大量抗体已免疫的甲组小鼠血浆中含有抗HPV的抗体监控和清除【答案解析】

据图分析，给甲组健康小鼠注射ta-HPV，甲组小鼠的体内可产生一定量的抗HPV的抗体和少量的记忆细胞，当HPV再次进入甲组小鼠体内，这些抗体和少量的记忆细胞最终会产生更强的特异性免疫反应，及时将HPV清除，甲组小鼠能正常生活；乙组小鼠注射HPV，体内没有足够的抗体，小鼠全部死亡。【题目详解】（1）进入机体的ta-HPV首先被巨噬细胞摄取处理并传给T细胞；T细胞产生的淋巴因子具有促进B细胞增殖、分化产生浆细胞和记忆细胞的作用；（2）甲组小鼠提前注射了ta-HPV，经过初次免疫后已经产生了记忆细胞，15天后再次注射HPV，甲组小鼠体内进行二次免疫，使记忆细胞快速增殖分化产生大量浆细胞以产生抗体，故甲组小鼠体内抗体峰值浓度大于乙组小鼠，峰值出现时间也早于乙组小鼠；（3）已免疫的甲组小鼠血浆中含有抗HPV的抗体，故丙组小鼠注射甲组小鼠血浆后再注射HPV不会患宫颈癌；（4）恶性肿瘤在生物体内无限增殖，是由于机体免疫系统的监控和清除功能下降甚至丧失导致的。【答案点睛】本题考查学生机体二次免疫的相关知识。要求学生理解和区别一次免疫与二次免疫的流程和异同点。本题中需要注意的是，甲组小鼠与丙组小鼠属于不同的免疫方式，甲组小鼠是接种ta-HPV疫苗，属于主动免疫，丙组小鼠注射免疫后的甲组小鼠血浆，属于注射抗体，为被动免疫。8、生物群落演替物质和能量结构与功能植物的枯枝落叶，动物的遗体与粪便提高生物多样性的价值和生态系统的生态、社会、经济效益（稳定性）【答案解析】

1.生态恢复工程指通过研究生态系统退化的原因，利用生态学、系统学、工程学的方法实现退化生态系统恢复与重建，以使一个生态系统恢复到较接近其受干扰前的状态的工程。2.生物群落不是一成不变的，他是一个随着时间的推移而发展变化的动态系统．在群落的发展变化过程中，一些物种的种群消失了，另一些物种的种群随之而兴起，最后，这个群落会达到一个稳定阶段．像这样随着时间的推移，一个群落被另一个群落代替的过程，就叫做演替。3.演替是生物和环境反复相互作用，发生在时间和空间上的不可逆变化，但人类活动可使其不按自然演替的方向和速度进行。【题目详解】（1）恢复生态学主要利用的是生物群落演替理论，特别强调生态系统的自我调节能力与生物的适应性，充分依靠生态系统自身的能力，并辅以有效的人为手段，增加物质、能量的投入，从而尽快使生态系统结构和功能恢复到正常的健康状态。（2）土壤中有机物的来源主要有植物的枯枝落叶，动物的遗体与粪便。（3）通过恢复生态学技术改造盐碱化草原，能显著提高生物多样性的价值和生态系统的生态、社会、经济效益（稳定性）。【答案点睛】本题通过实例，考查群落的演替和生态恢复工程，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。9、叶绿体、线粒体A植物呼吸作用产生二氧化碳的量与光合作用消耗二氧化碳的量相等（或呼吸速率与光合速率相等，净光合速率为0）不合理光照强度未知，当光照强度大于甲图c点时，曲线②代表大豆A品种，曲线①代表大豆B品种；当光照强度小于甲图中c点，大于b点时，曲线②代表大豆B品种，曲线①代表大豆A品种9【答案解析】

据图分析：图甲中，该实验的自变量是光照强度和大豆的品种，因变量是光合速率，曲线表明，大豆A的呼吸速率、光补偿点和光饱和点大于大豆B的。图乙表示在光照、温度等相同且适宜的条件下培养，玻璃罩内的CO2含量的变化，开始时，由于光合速率大于呼吸速率，所以密闭容器中的二氧化碳含量不断减少；当光合速率等于呼吸速率时，密闭容器中的二氧化碳含量保持相对稳定。据此分析作答。【题目详解】（1）据图分析可知，图甲a点为B大豆的光补偿点，此时光合作用与呼吸作用都可以产生ATP，所以此时ATP的细胞器有叶绿体、线粒体。由于大豆A的呼吸速率、光补偿点和光饱和点大于大豆B的，所以在较长时间连续阴雨的环境中，生长受影响更显著的大豆是A品种。（2）图乙中30~45min期间，植物呼吸作用产生二氧化碳的量与光合作用消耗二氧化碳的量相等，因此两个玻璃罩内CO2含量相对稳定。（3）由于光照强度未知，当光照强度大于甲图c点时，曲线②代表大豆A品种，曲线①代表大豆B品种；当光照强度小于甲图中c点，大于b点时，曲线②代表大豆B品种，曲线①代表大豆A品种。所以该同学判断不合理。（4）根据题意可知，将A品种大豆的某一叶片在25℃温度条件下暗处理1小时，该叶片质量（以葡萄糖衡量）减少了2mg，该叶片的呼吸速率为2mg/小时，之后光照1小时，经称重，光照后比暗处理前质量增加了5mg，该增加量表示1小时的光合作用-2小时的呼吸作用积累的葡萄糖，即光合速率-2×呼吸速率=5，光合速率=5+2×2=9mg/小时，故该叶片光照1小时合成葡萄糖的质量为9mg。【答案点睛】本题结合曲线图，考查影响光合作用的外界因素及探究实验，首先要考生掌握影响光合作用速率的环境因素，分析曲线图，再结合题干条件“在光照、温度等相同且适宜的条件下培养”答题。10、cDNAPCRXhoIEoRI启动子、终止子、复制原点卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗体作为对照【答案解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因采用DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA采用分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质采用抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【题目详解】（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库（cDNA）。其中基因组文库包含某种生物所有的基因，而部分基因文库只包含某种生物的部分基因，可以mRNA为模板反转录形成cDNA；由于PCR技术利用的是DNA分子复制的原理，所以用该cDNA进行PCR技术扩增短时间内可以获得大量的目的基因。（2）分析图1中碱基序列，α链上有“—CTCGAC—”识别序列，β链上有“—GAATTC—”碱基识别序列，与图2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的识别序列相同。故选用XhoI限制酶和EoRI限制酶将“pIRES2-EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建基因表达载体。基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等。（3）根据第（2）题可知，基因表达载体上的标记基因是卡那霉素抗性基因，因此一定温度下，与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有卡那霉素的培养基，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌。（4）基因表达的产物是蛋白质，一段时间后，为确定PD-1基因是否表达，可以检测细胞膜表面是否具有PD-1基因表达的PD-1蛋白。为判断其是否具有生物学活性和功能，可采用抗原—抗体杂交技术，即从裂解293T细胞中，提取PD-1蛋白看能否与PDL-1发生结合，从而阻断“PD-1与PDL-1信号通路”。为了增加实验的可信度，还需要设置对照实验，