DB15-T 2687-2022 天然青干草中挥发性成分的测定 顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用法

ICS65.020.01CCSB0415内蒙古自治区地方标准DB15/T2687—2022天然青干草中挥发性成分的测定顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用法Determinationofvolatilecomponentsinnativehaygrass—headspacesolid-phasemicroextractiongaschromatographymassspectrometry2022-07-15发布2022-08-15实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/T2687—2022前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由内蒙古农业大学提出。本文件由内蒙古自治区畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC19）归口。本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古自治区农牧业科学院、中国农业科学院草原研究所、巴林左旗林业和草原局、呼伦贝尔学院。本文件主要起草人：贾玉山、李宇宇、格根图、王志军、孙林、特日格乐、袁宁、马千鹏、常春、降晓伟、都帅、王伟、丁霞、包健、司强、刘明健。IDB15/T2687—2022天然青干草中挥发性成分的测定顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用法1范围本文件规定了天然青干草中挥发性成的测定顶空固相微萃取—气相色谱质谱联用法的仪器设备、试样制备和保存、分析步骤、结果分析与计算和精密度。本文件适用于典型草原天然青干草中醛、酮、醇类等挥发性成分的测定。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T20195NY/T2129动物饲料试样的制备饲草产品抽样技术规程3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。天然青干草nativehaygrass天然草地生长的经适时刈割、自然晾晒或人工干燥的牧草。4仪器设备固相微萃取装置，配DVB/CAR/PDMS纤维萃取头。气相色谱—质谱联用仪。磁力搅拌器（60RPM～1150RPM、5℃～550℃）。温度计（0℃～150℃）。分析天平感量0.01g。5试样制备和保存抽样1DB15/T2687—2022按照NY/T2129执行。分析样品制备按照GB/T20195执行。试样保存置于-20°冰箱中，24h内完成分析。6分析步骤萃取纤维头的老化6.1.1DVB/CAR/PDMS纤维萃取头进行老化。6.1.2老化条件：温度250℃，时间20min，载气流速1mL/min。固相微萃取（SPME）参考分析条件6.2.1称取2g样品置于20mL专用顶空瓶中，立即密封，置加热磁力搅拌器上70℃预热5min，然后将老化后的纤维萃取头插入顶空瓶中进行萃取，不要让萃取头接触样品。6.2.2萃取条件：温度70℃，萃取时间60min，解吸时间3min。气相色谱（GC）参考分析条件6.3.1气相色谱柱：5%苯基甲基聚硅氧烷石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm），或等效色谱柱；6.3.2色谱柱升温程序：起始温度50℃，保留4min，以5℃/min上升到200℃，保留5min再以15℃/min，程序升温至250℃，保持4min。6.3.3色谱条件：进样口温度250℃，载气为高纯氦气纯度≧99.999%，载气流速1mL/min，进样方式为手动进样，不分流进样模式。质谱（MS）参考分析条件电离方式EI，电离电压70eV，离子源温度230℃，传输线温度280℃，采集方式为全扫描方式，质量扫描范围40m/z～550m/z。7结果分析与计算使用NIST数据库定性。质谱图的相似度不小于80%色谱峰，见附录A。用峰面积归一化法计算各挥发性成分的相对含量。按如下公式计算：……（1）2DB15/T2687—2022式中：Ci——试样中挥发性成分i的峰面积分数，以百分数表示（%）；Ai——试样中挥发性成分i的峰面积；——试样中各挥发性成分的峰面积之和。8精密度在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值10%，结果保留小数点后2位数字。3DB15/T2687—2022附录A（资料性）典型草原天然青干草挥发性成分总离子流图A.1典型草原天然青干草挥发性成分总离子流图（TIC）见图A.1，典型草原天然牧草干草主要挥发性成分质谱鉴定结果见表A.1。图A.1典型草原天然青干草挥发性成分总离子流图（TIC）表A.1典型草原天然青干草主要挥发性成分质谱鉴定结果序号1保留时间（min）15.42821.34化合物英文名称CAS号十九碳三烯丁香酚Nonadeca-3,6,9-trieneEugenol89353-62-897-53-02322.63123.01623.74甲基丁香酚β-石竹烯香叶基丙酮α-姜黄烯β-紫罗兰酮Methyleugenolβ-CaryophylleneGeranylacetoneα-curcumene93-15-2487-44-553796-70-1644-30-479-77-6624.54324.70225.18225.67926.09627.10228.89632.6437β-ionone82,5-乙烯[4.2.2]丙基-3,7,9-三烯2,5-Etheno[4.2.2]propella-3,7,9-triene92-52-49芳姜黄酮二氢猕猴桃内酯桉油烯醇ar-tumeroneDihydroactinidiolideSpathalenol38142