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文档简介
新冠病毒专题材料一
新型冠状病毒是由RNA和蛋白质“N”构成的内核与外侧的囊膜共同组成,囊膜的主要成分是磷脂和镶嵌其上的3种蛋白质“M”“E”和“S”。S蛋白也是冠状病毒主要的抗原位点,宿主的免疫反应一般都是针对S蛋白,因此S蛋白是疫苗开发的关键靶标。材料二
新型冠状病毒的增殖过程不是简单地将其遗传物质注入宿主细胞内,而是通过细胞的胞吞作用。病毒包膜表面的S——刺突糖蛋白会和宿主细胞表面的受体进行识别,然后病毒包膜与宿主细胞膜融合,最后病毒核衣壳蛋白和核酸一起进入宿主细胞,完成感染过程。新合成的病毒从细胞出来的方式与分泌蛋白相同,子代病毒也是通过囊泡排出细胞的。新冠病毒的检测方法:(1)新冠病毒核酸检测:
该过程利用了
杂交技术。
核酸检测阴性结果也不能排除新型冠状病毒感染,可能原因:
1.取样太早,样本中病毒量少,达不到实时荧光PCR检测阈值;
2.样本被污染;
3.RNA酶将病毒RNA降解;
4.病毒发生变异
等因素导致产生假阴性。核酸分子新冠病毒的检测方法:(2)血清抗体检测:检查血液中的某一种抗体可确定一个人是否曾经受到某种特定的病原体的侵袭,所以检测患者血清中是否存在特异性抗体(需抗体达到一定浓度)可作为COVID-19感染的诊断指标,可用
杂交技术检测。与核酸检测方法相比,抗体检测法更加简单,样本来源和处理单一,更易控制,但该方法不适合对可能处于潜伏期的疑似患者做早期排查,原因是:因为机体没来得及产生相应的抗体或产生的抗体数量太少。抗原-抗体新冠病毒的检测方法:(3)新冠病毒抗原检测:
可用
杂交技术检测。目前才刚刚研发上市了高效的新型冠状病毒的抗原检测试剂。因筛选
往往需要长时间的研发过程.抗原-抗体高特异性的抗体单克隆抗体的制备
1.单克隆抗体的优点是。化学性质单一、特异性强、灵敏度高、可大量制备3.杂交瘤技术制备单克隆抗体的最大的优点是
。2.单抗比一般抗血清优越的多的原因是
。一般抗血清中的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物,而单克隆抗体专一性识别抗原分子的特殊部位,比一般抗血清优越。可从特异抗原成分比例极少的抗原混合物中获得单抗4.杂交瘤细胞的优点是
。既能产生特异抗体,又能无限增殖B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞抗体检验单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体的制备选出杂交瘤细胞第1次筛选:
选择多孔培养板培养抗原-抗体杂交技术原理:细胞膜的流动性和细胞增殖在
培养基上,________的细胞和___________的细胞都会死亡。未融合同种核融合第2次筛选:
将筛选出的杂交瘤细胞经过
后,多孔培养板中每个孔中细胞数量不多于____个,再进行_______培养和
检测筛选,以便于得到既能产生特异性抗体,又能无限增殖的
。稀释1克隆抗体杂交瘤细胞株筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞抗体检验单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体的制备杂交瘤细胞1筛选出
2筛选出
的杂交瘤细胞能产生特定抗体选择培养基第1次抗体检测:多孔培养板培养抗原-抗体杂交技术原理:细胞膜的流动性和细胞增殖第2次抗体检测:筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选能高效产生特定抗体的杂交瘤细胞B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞抗体检验单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体的制备为什么要给小鼠注射特定的抗原蛋白?原理:细胞膜的流动性和细胞增殖筛选出的产生特定抗体的杂交瘤细胞将放在哪里克隆培养?使小鼠发生免疫应答,产生更多针对该抗原蛋白的效应B细胞。1、灭活的仙台病毒2、聚乙二醇3、电融合技术(低压交流电)可用什么方法促进细胞融合?1、注射到小鼠的腹腔中克隆培养2、接种到培养基中克隆培养科学工作者正在研究的用于治疗癌症的“生物导弹”就是____________________,请指出一种用“生物导弹”治疗癌症的方法较普通化疗的优点______________。单克隆抗体上连接抗癌药物可专一地杀死肿瘤细胞,避免抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损伤。材料三
我国科研攻关组布局了病毒的灭活疫苗、核酸疫苗、重组蛋白疫苗、腺病毒载体疫苗、减毒流感病毒载体疫苗这样5条技术路线。①灭活疫苗;②腺病毒载体疫苗;③核酸疫苗;④重组蛋白疫苗;⑤减毒流感病毒载体疫苗。核酸疫苗的优势是:.可在体内不断翻译表达,较长时间维持较高的蛋白水平,免疫具有连续性,一次接种可获得长期或终身免疫力腺病毒载体疫苗的优点是:.持续表达抗原,免疫应答更持久(1)腺病毒载体重组疫苗是将刺突蛋白基因重组到改造后无害的腺病毒内,导入人体,在体内产生刺突蛋白,刺激入体产生抗体。改造后的腺病毒载体应具备的条件是__________________
_______。(至少答出两点)。选用改造过的复制缺陷型腺病毒为载体,而不使用普通腺病毒为载体的目的是:防止__
______________使宿主细胞被裂解死亡。(2)欲选择性扩增出S基因的DNA,前提是要有一段______________以便根据这一序列设计出特异性的________。过程②构建的重组腺病毒,其S基因应插入腺病毒载体的____
_____之间。(3)腺病毒载体疫苗注入人或动物体内能够产生S蛋白,其原理是_______
______。具有一个至多个酶切位点;能自我复制;具有标记基因腺病毒在宿主细胞中复制增殖已知目的基因的核苷酸序列
启动子和终止子
引物重组腺病毒能够转化到受体细胞中,并在受体细胞中通过转录、翻译过程表达S蛋白基因④重组蛋白疫苗,也称基因工程重组亚单位疫苗,它是通过基因工程方法,大量生产新冠病毒最有可能作为抗原的S蛋白,把它注射到人体,刺激人体产生抗体。(3)抗体制备过程中,将相应mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增被称为RT-PCR技术,RT-PCR过程需要的酶有__________
______。将目的基因与普通质粒经某种限制酶切割连接并成功导入大肠杆菌细胞后,发现仍有部分细胞不能表达出抗体,最可能的理由是_______________________________。逆转录酶和耐高温DNA聚合酶目的基因与质粒载体反向拼接(2022年1月选考29题节选)我国在新冠疫情防控方面取得了显著的成绩,但全球疫情形势仍然非常严峻、尤其是病毒出现了新变异株——德尔塔、奥密克戎,更是威胁着全人类的生命健康。(1)接种疫苗是遏制新冠疫情蔓延的重要手段。腺病毒疫苗的制备技术要点是:将腺病毒的复制基因敲除;以新冠病毒的__________基因为模板合成的DNA插入腺病毒基因组,构建重组腺病毒。重组腺病毒在人体细胞内表达产生新冠病毒抗原,从而引发特异性免疫反应。在此过程中,腺病毒的作用是作为基因工程中目的基因的_______。将腺病毒复制基因敲除的目的是_______________________。(2)新冠病毒核酸定性检测原理是:以新冠病毒的单链RNA为模板,利用__________酶合成DNA,经PCR扩增,然后在扩增产物中加入特异的__________,如果检测到特异的杂交分子则核酸检测为阳性。3真题链接抗原/S蛋白载体使腺病毒失去复制能力逆转录核酸探针/DNA探针新冠病毒、HIV和噬菌体在复制式增殖的过程中遵循的中心法则是什么?新冠病毒:HIV:噬菌体:3.(2021·浙江6月选考,15)已有研究表明,新冠病毒表面具有多种蛋白,其中S蛋白能与人体细胞表面受体结合,使其吸附并侵入细胞。人体对
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