实验细菌的简单染色和革兰氏染色详解演示文稿

1、实验细菌的简单染色和革兰氏染色详解演示文稿第一页，共二十一页。优选实验细菌的简单染色和革兰氏染色第二页，共二十一页。用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染用碘溶液进行媒染，其作用是提高染料和细 胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后 仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细 菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细 胞呈无色。用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对 涂片进行复染。例如沙黄，它使原来无色的 革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色，而革 兰氏阳性细菌继续保持深紫色第三页，共二十一页。第四页，共二十一页。实验三 细菌的简单染色和革兰氏染色第五页，共二十一页。细

2、菌的简单染色和革兰氏染色 一 目的要求 二 基本原理 三 实验材料 四 无菌操作过程 五 操作步骤 六 实验报告 七 思考题第六页，共二十一页。一 目的要求1 学习制染色片技术，学习简单染色革兰氏染色原理，理解着色机理。学习并掌握无菌操作的技术。3 掌握简单染色革兰氏染色的方法，并能正确染色4 巩固显微镜油镜的使用方法。第七页，共二十一页。（一）细菌的简单染色原理（二）革兰氏染色基本原理二 基本原理第八页，共二十一页。细菌细胞微小，且含水量较多，在普通光镜下表现为无色透明，不易观察，所以必须进行染色处理，使细胞着色，便于观察。简单染色是使用单一染料染色，可用于观察细菌形态、大小、及排列方式.染

3、色前一般要将细胞固定，其目的是杀死菌体并使之粘附于玻片上，还可以增强菌体的着色能力。固定有加热法和化学法两种，无论采用何种方法均应维持细胞原有形态。 （一）细菌的简单染色原理第九页，共二十一页。（二）革兰氏染色基本原理 革兰氏染色是用于细菌鉴别的一种重要染色方法。它是根据革兰氏阳性细菌、阴性细菌细胞壁结构、组成的不同而使用一系列的染色处理使之差别显色。其染色方法是先将细菌分别用结晶紫和碘液初染媒染后，乙醇脱色，再经复染剂复染。最终被染成红色的是革兰氏阴性细菌；被染成紫色的是革兰氏阳性细菌。第十页，共二十一页。占细胞壁的10%占细胞壁的90%第十一页，共二十一页。第十二页，共二十一页。1、细胞壁

4、 革兰氏阳性细菌的细胞壁第十三页，共二十一页。革兰氏染色与细胞壁：革兰氏阳性阴性细菌的细胞壁对比第十四页，共二十一页。革兰氏染色原理：第一步：结晶紫使菌体着上紫色第二步：碘和结晶紫形成大分子复合物，分子大，能被细胞壁阻留在细胞内。第三步：酒精脱色，细胞壁成分和构造不同，出现不同的反应。G+ 菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，故结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，仍呈紫色。G菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，因其含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，细胞无色，蕃红复染后呈红色。第十五页，共二十一页。1234？第十六页，共二十一页。三 实验材料大肠杆菌（24 h 培养）斜面菌种枯草杆菌（16 h 培养）斜面菌种第十七页，共二十一页。四 无菌操作过程无菌操作：不让除我们接种的微生物以外 其它微生物侵入的技术。第十八页，共二十一页。第十九页，共二十一页。（一） 简单染色操作步骤1涂片：载玻片、无菌水、斜面菌种、无菌操作、均匀的薄层2干燥：3固定：加热固定4染色：结晶紫染1min或蕃红染2-3min或石炭酸复