病原微生物实验活动危险度评估课件

1、 病原微生物实验活动 危险度评估 病原微生物实验活动病原微生物实验活动危险度评估课件病原微生物实验活动危险度评估课件病原微生物实验活动危险度评估课件病原微生物实验活动危险度评估课件内容：一、病原微生物试验活动危险度评估的定义二、目的、意义和用途三、病原微生物危害程度评估的原则四、病原微生物危害程度分类五、病原微生物危害程度评估依据 人间传染的病原微生物名录 六、病原微生物危害程度评估要考虑的因素七、病原微生物的危害程度评估方法八、我市的病原微生物危害评估情况内容：一、病原微生物试验活动危险度评估的定义一、病原微生物试验活动危险度评估的定义危险度评估:是在对某种病原微生物以及对其操作程序或实验活

2、动的潜在危害进行评估。它应该建立在对病原微生物的生物学特性、传播的宿主范围、致病性等已经了解的基础上；对于未知病原微生物，可以在对已知病原体特性的了解基础上根据有限的临床资料、流行病学资料及实验室数据等作出可能性的判断，根据可能性采取进一步的评价。危险评估可以借助多种方法进行，其中重要的是专业评估，应由生物安全管理机构、实验室或项目负责人、各类有关的专业人员共同进行。一、病原微生物试验活动危险度评估的定义危险度评估:是在对某种 生物危害评估工作由谁来做？生物安全专家委员会病原学专家免疫学专家检验医学专家流行病学专家预防兽医学专家环境保护学专家实验管理学专家 生物危害评估工作由谁来做？生物安全专

3、家委员会二、目的、意义和用途1、目的、意义主要目的是在实验活动中根据病原微生物可能对个人或个体或实验环境造成危害的高低，来制定相应的安全防范制度和操作程序，选择相应等级的生物安全实验室及设备配置，实验人员采取相应的防护措施和使用相符的安全防护装备，以及在发生意外泄漏或意外事故时能及时采取有效的防护措施，来达到确保实验室工作人员不被污染和实验环境不被污染的目的。二、目的、意义和用途1、目的、意义二、目的、意义和用途2、用途（1）通过评估确定生物安全防护水平，根据评估结论确定实验室安全防护等级、个人防护级别及相应的安全措施等。（2）根据评估结论制定病原微生物实验活动的操作、仪器设备使用及管理规程和

4、操作程序；制定实验室和实验室废弃物的消毒与处置及意外事故处理、人员培训、个人防护剂健康监测等工作程序。二、目的、意义和用途2、用途二、目的、意义和用途（3）病原微生物危害程度评估工作中收集的许多相关信息，对于实验室人员具有非常重要的参考价值，需要学习掌握。（4)通过评估我们能对某种病原微生物在实验室检测时在实验条件、人员、设备等各方面是否符合生物安全管理要求，该项操作的安全是否能得到保证等问题有比较全面的掌握和了解。（5）通过评估我们能清楚地了解病原微生物的基本生物特性以及它的改良性、传播途径、感染途径、治疗措施的现状。二、目的、意义和用途（3）病原微生物危害程度评估工作中收集的三、病原微生物

5、危害程度评估的原则1、坚持结合实际，科学评估。要根据各自实验室人员组成和设备条件的实际情况进行评估，避免生搬硬套，不加分析随意引用他人的评估资料，要求有针对性。2、坚持简明扼要，科学可行原则。要求突出重点，内容齐全，避免内用繁杂，操作性科学性不强，结论要明确。3、坚持专业人员协助完成的原则。危害程度评估是一项专业性很强且跨专业的综合性工作，需要其他相关专业的技术人员配合协同承担完成三、病原微生物危害程度评估的原则1、坚持结合实际，科学评估。四、病原微生物危害程度分类病原微生物危害程度分类依据：病原微生物实验室生物安全管理条例 (GH19489-2004)按危害程度将病原微生物分为四类： 第四类

6、危险程度最低 第一类危险程度最高 第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物 WHO实验室生物安全手册实验室生物安全通要要求危害程度由4级至1级递减。不同国家有不同的分类方法。 四、病原微生物危害程度分类病原微生物危害程度分类依据：病原微生物实验活动危险度评估课件五、病原微生物危害程度评估依据病原微生物危害程度分类是危害评估的主要依据。某种病原微生物危害程度高低主要产生的相对危害程度的大小，应取决于它对个体和群体感染后可能造成的危害程度，因此要根据各自不同实际情况作出科学的恰如其分的评估。五、病原微生物危害程度评估依据病原微生物危害程度分类是危害评 人间传染的病原微生物名录2006-1-

7、11 我国对病原微生物除进行危害程度分类外，还规定了其不同实验操作的防护水平以及运输的包装要求，具体内容见卫生部颁布的人间传染的病原微生物名录。该名录已于2006年1月11日下发执行。核心内容是对病原微生物的常见实验操作的生物安全实验室等级提出明确要求，指导各单位涉及人间传染的病原微生物的实验活动。 人间传染的病原微生物名录 我国对病 人间传染的病原微生物名录病毒-160 类细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体-155 类真菌-59 类朊病毒-6 种 人间传染的病原微生物名录病毒-160 类表1. 病毒分类名录序号病毒名称危害程度分类实验活动所需生物安全实验室级别运输包装分类f备注病

8、毒培养a动物感染实验b未经培养的感染材料的操作c灭活材料的操作d无感染性材料的操作eA/BUN编号英文名中文名分类学地位1Alastrim virus类天花病毒痘病毒科第一类BSL-4ABSL-4BSL-3BSL-2BSL-1AUN28142Crimean-Congo hemorrhagic fever virus（Xinjiang hemorrhagic fever virus）克里米亚刚果出血热病毒（新疆出血热病毒）布尼亚病毒科第一类BSL-3ABSL-3BSL-3BSL-2BSL-1AUN2814人间传染的病原微生物名录表1. 病毒分类名录序号病毒名称危害程度分类实验活动所需生物人间传染

9、的病原微生物名录表2. 细菌、放线菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体分类名录序号病原菌名称危害程度分类实验活动所需生物安全实验室级别运输包装分类e备 注学名中文名大量活菌操作a动物感染实验b样本检测c非感染性材料的实验dA/BUN 编号1Bacillus anthracis炭疽芽孢杆菌第二类BSL-3ABSL-3BSL-2BSL-1AUN 28142Brucella spp布鲁氏菌属第二类BSL-3ABSL-3BSL-2BSL-1AUN 2814其中弱毒株或疫苗株可在BSL-2实验室操作。人间传染的病原微生物名录表2. 细菌、放线菌、衣原体、支病例分享：血培养检出布鲁氏菌病例分享：血培养检出

10、布鲁氏菌血培养涂片对比：协和医院血培养布氏涂片血培养涂片对比：协和医院血培养布氏涂片纯培养物革兰染色及相关试验结果触酶阳性氧化酶阳性动力阴性血培养四天报阳尿素酶阳性柯氏染色阳性布氏杆菌？流行病学史？布氏抗体检测？纯培养物革兰染色及相关试验结果触酶阳性氧化酶阳性动力阴性血培呼吸科病人：周xx 女 65岁 梧州富民人 病历未提及职业情况主诉：咳嗽、胸痛一周余 入院查体：发烧达39以上、纳差、乏力消瘦、肌肉酸痛、颈肩关节痛、皮肤黄染、两肺呼吸音粗实验室检查：ALT258 AST366 GGT 201 TBIL79.1 临床诊断：肺部感染 肝损查因 颈椎病临床用药：左氧+呋辛 症状有所改善。血培养双瓶

11、双侧（四瓶）报阳，涂片镜下高度怀疑布氏杆菌！电话要求护士帮忙问职业情况特别留意是否养羊或与是否有羊接触史。护士回报：“一个月前在家吃过羊肉火锅、经常去菜市场、丈夫5 年前养羊！”病史摘要呼吸科病人：周xx 女 65岁 梧州富民人 病历布病概况 1 布氏杆菌病又称布病、波状热，是人畜共患的传染病。病原菌为革兰阴性短小杆菌，按生化和血清学反应分为马尔他布鲁菌（羊型）、流产布鲁菌（牛型），猪布鲁菌（猪型）！ 2 主要临床特点为长期发热（波状热）、多汗、乏力、关节痛、肌肉酸痛、睾丸炎、肝脾肿大等，少数患者可出现各种各样的充血性皮疹和黄疸；慢性期患者多表现为骨关节系统损害 3 流行病学史：发病前病人与家

12、畜或畜产品（以羊最多见）、布鲁氏菌培养物有密切接触史，或生活在疫区，或与疫苗生产、使用和研究有密切关系。布病概况 1 布氏杆菌病又称布病、波状热，是人畜共患的传病原菌分离：从病人血液、骨髓、其他体液及排泄物等任一种培养物中分离到布鲁氏菌。布鲁氏菌病的发生、发展和转归比较复杂，其临床表现多种多样，很难以一种症状来确定诊断。对人布鲁氏菌病的诊断，应是综合性的。即结合病人流行病学接触史，临床表现和实验室检查。传播途径：呼吸道、消化道、损伤皮肤、粘膜（眼结膜）鉴别诊断：主要应与风湿热、伤寒、副伤寒、肺结核、风湿性关节炎等做出鉴别诊断布病概况病原菌分离：从病人血液、骨髓、其他体液及排泄物等任一种培养物布

13、氏杆菌具有传染性，人群普遍易感，对人有极强的致病力，有可能通过人传人感染，但极少发生故临床上做好接触隔离即可因此对于二级实验室：在生物安全柜内做完关键的鉴别试验后报告布氏杆菌属，为临床治疗提供病原学依据，不必鉴定到种及相关药敏培养物及接触活菌物品应高压灭菌后再离开实验室上报CDC，完善相关鉴定及流调结果报告结果报告治疗原则：早期 联用 足量 多疗程治疗药物： WHO推荐多西环素200mg/d和利福平600900mg/d联用，疗程6周甚至更长！或者用利福平联合四环素或链霉素进行治疗！复方磺胺甲恶唑能渗透到细胞内，对急性患者退热较快。常用剂量翁每日46片(每片含TMP 80mg，SMZ 400mg

14、)，分2次口服。连服46周。布氏杆菌感染容易复发，临床治疗失败多为患者感觉症状消失后自行停药导致！治疗用药治疗原则：早期 联用 足量 多疗程治疗用药病原微生物实验活动危险度评估课件人间传染的病原微生物名录附录：Prion 序号疾病英文名疾病中文名危害分类不同实验活动所需实验室生物安全级别运输包装分类f备 注组织培养动物感染感染性材料的检测A/BUN编号1Bovine spongiform encephalopathy （BSE）疯牛病第二类BSL-3ABSL-3BSL-2BUN3373需要有134高压灭菌条件2Creutzfeldt-Jacob disease （CJD）人克雅氏病第二类BSL

15、-2ABSL-3BSL-2BUN3373需要有134高压灭菌条件3Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome （GSS）吉斯特曼-斯召斯列综合征第二类BSL-2ABSL-3BSL-2BUN3373需要有134高压灭菌条件4Kuru diseaseKuru病第二类BSL-3ABSL-3BSL-2BUN3373需要有134高压灭菌条件5Scrapie瘙痒病因子第三类BSL-2ABSL-3BSL-2BUN3373需要有134高压灭菌条件6New variance Creutzfeldt-Jacob disease （nvCJD）变异型克雅氏病第二类BSL-3ABS

16、L-3BSL-2BUN3373需要有134高压灭菌条件人间传染的病原微生物名录附录：Prion 序号疾病英文名A类：使人染病或使人和动物都染病者，联合国编号UN2814，其运输专用名称为危害人的感染性物质；仅使动物染病者联合国编号UN2900，其运输专用名称为仅危害动物的感染性物质。A类：使人染病或使人和动物都染病者，联合国编号UN2814，不符合A类标准的感染性物质，其联合国编号为UN3373，运输专用名称为诊断标本，临床标本或生命物质B类。不符合A类标准的感染性物质，其联合国编号为UN3373，运输六、病原微生物危害程度评估要考虑的因素1、病原微生物的致病性致病力越强，导致的疾病也越来越严

17、重，其危害程度就越高。2、病原微生物的传播方式（传播途径）一般情况下，通过呼吸道，以气溶胶形式传播或扩散的危害，通常要比消化道或接触传播的病原微生物的危害程度要高，造成的危害的范围要广。3、病原微生物宿主范围宿主的范围越广，其感染、扩散的可能性就越大，危害性也就较大。六、病原微生物危害程度评估要考虑的因素1、病原微生物的致病性气溶胶气溶胶 六、病原微生物危害程度评估要考虑的因素4、是否有有效的预防和治疗措施有有效的疫苗免疫措施而且有有效的治疗措施，哪怕这种病原微生物致病性比较强，其潜在危险或导致的后果相对来说也比较低。5、是否为已知的病原微生物对于未知的病原微生物，在对其有限的了解的基础上，要

18、采取更为严格的安全防护措施，认真对待。6、人群的免疫屏障如果对某一人群进行免疫，建立起了有效的免疫屏障人群，其防护要求比没有免疫屏障人群肯定要低。 六、病原微生物危害程度评估要考虑的因素4、是否有有效的七、病原微生物危害程度评估的要素1、微生物的一般生物学特性概述简述病原微生物的基本生物学特性，比如形态特征、生物学特性以及致病性、感染途径、流行现状、治疗与预防措施、自然宿主构成等2、微生物危害程度分类明确该病原微生物不同性质的材料作为评估危害等级、分类的依据，危害评估结果，作为采取检测过程中预防措施的基本要求等。3、微生物的致病性和感染剂量明确易感人群、致病性的强弱，感染后病死情况以及感染剂量

19、的多少。七、病原微生物危害程度评估的要素1、微生物的一般生物学特性概六、病原微生物危害程度评估的要素4、暴露后的潜在后果 分析实验人员暴露后，可能对实验人员产生的后果，以及可能对周围环境和人群带来的危害等，如果通过呼吸道、伤口或其他部位暴露时，有可能会产生更为严重的后果，潜在危害更大，对这些都需要评估。5、自然感染途径 明确自然感染途径的种类和方法。不同病原微生物的自然感染途径有其固有的特点，一旦改变感染途径，可能存在的风险和危害需要进行评估，所以在评估报告中要说明情况。六、病原微生物危害程度评估的要素4、暴露后的潜在后果 自然传播途径病原微生物可通过空气水食物接触血液母婴虫媒土壤传播途径 自

20、然传播途径空气传播途径六、病原微生物危害程度评估的要素6、实验室操作所致的除消化道、呼吸道以外的其他感染途径如皮肤接触，通过伤口、粘膜的等途径感染，因为有些病原微生物除了自然感染途径会引起疾病以外，在实验室检测过程中有可能因实验差错或意外导致其他途径感染，并有可能产生更为严重的后果。7、微生物在环境中的稳定性 一般来讲在自然感染条件下，生物学特性稳定，对外界自然条件抵抗力强的病原微生物，其危害性就要大些。六、病原微生物危害程度评估的要素6、实验室操作所致的除消化道六、病原微生物危害程度评估的要素8、所操作微生物的浓度和浓缩标本的容量原始生物样本和经过培养或浓缩的生物样本，其危害程度也相差很大的

21、，后者危害程度明显大于前者9、微生物自然和易感人群宿主评估时要讲述清楚该病原微生物的自然宿主的构成、易感人群的分布特征等问题，这样有利于对某些实验操作者采取更为科学到位的防护措施，防止发生实验室感染事件。六、病原微生物危害程度评估的要素8、所操作微生物的浓度和浓缩六、病原微生物危害程度评估的要素10、宿主来自临床、实验、动物研究的信息 根据这些资料和信息制定范围全面的预防控制措施，尤其对一些新发现的或输入性疾病的病原体要高度重视。11、计划进行的实验操作 要明确操作过程中可能会引起感染或外泄的关键环节，同时要针对这些薄弱环节制定具有针对性的预防控制措施及处置方法等12、可能会扩大的宿主范围和重

22、组的DNA的操作 在进行DNA实验操作时要严格控制进行两种微生物间的基因重组实验，防止发生可能产生的潜在危害。六、病原微生物危害程度评估的要素10、宿主来自临床、实验、动六、病原微生物危害程度评估的要素13、预防和治疗措施 对一些未知的或没有有效的预防和治疗措施的病原微生物的实验操作要采取更为严格的防护要求和防护措施，尤其是一些致死性、易扩散传播的病原微生物的实验要严格管理控制、确保安全。14、评估结论 简单总结病原微生物的基本特性、致病性、稳定性及危害性，提出实验活动中需要关注和控制的关键环节与预防措施等，以及发生意外时要有足够能力来应对这些不测事件，防止发生实验室感染和向周围环境扩散。六、

23、病原微生物危害程度评估的要素13、预防和治疗措施七、病原微生物的危害程度评估方法 首先收集整理拟开展实验活动的病原微生物的基本资料和信息，针对评估要素逐条加以介绍与表述； 然后对拟从事实验活动的危险性和可能产生的危害进行分析。包括实验操作的非自然感染途径、所操作的病原体的浓度、实验操作项目、方法的流程和步骤及可能产生暴露的环节等，并提出实验操作要求和预防控制措施，以及说明是否涉及动物实验等； 第三是对实验活动中人员素质提出要求最后得出一个该病原微生物总体的总结性结论，如病原微生物的稳定性、传播途径宿主范围、感染性强弱、致病特点、预防和治疗手段、安全控制方法及消毒灭菌的要求。七、病原微生物的危害

24、程度评估方法 首先收集整理拟如何进行生物安全风险评估人员病原微生物实验室及设备如何进行生物安全风险评估人员病原实验室实验室及设备病原微生物人员实验室病原人员1、病原微生物序号病原菌名称危害程度分类实验活动所需生物安全实验室级别致病性传播途径稳定性感染数量病原微生物的宿主暴露后的潜在后果是否可以预防和治疗有效的预防和治疗措施1大肠埃希菌第三类二致病菌呼吸、血液、泌尿对理化因素抵抗力不强大量人腹泻,肠外化脓性炎症,败血症,脑膜炎。可以预防和治疗预防:疫苗。治疗：喹诺酮类,头孢类等抗生素。2沙门菌属第三类二致病菌粪口环境中生存能力较强少量人伤寒可以预防和治疗预防:疫苗。治疗：喹诺酮类,氯霉素，磺胺类

25、，头孢类等抗生素。1、病原微生物序号病原菌名称危害程度分类实验活动所需生物安全67种重要病原微生物风险评估报告（网上可以下载）67种重要病原微生物风险评估报告（网上可以下载）67种重要病原微生物风险评估报告（网上可以下载）67种重要病原微生物风险评估报告（网上可以下载）2. 实验室设施及活动实验活动类型可能造成不良后果的因素预测风险等级预防或补救措施残余风险备注标本处理离心时气溶胶产生，容器破碎、播洒，锐器刺伤，玻璃碎片划伤中严格按照SOP操作；妥善处理伤员；报告科室负责人低染色玻璃碎片划伤中低接种气溶胶产生中严格按照SOP操作；佩戴口罩等防护用品；在生物安全柜内操作低培养细菌及真菌的纯菌落操

26、作中严格按照SOP操作；使用手套、口罩等防护用品低鉴定细菌及真菌的纯菌落操作中严格按照SOP操作；使用手套、口罩等防护用品低药敏细菌及真菌的纯菌落操作中严格按照SOP操作；使用手套、口罩等防护用品低生物安全柜使用仪器部件失灵，消毒不彻底中严格按照SOP操作；使用前检查仪器；做好维护及保养；定期消毒低医疗废物消毒高压灭菌装置部件失灵，未达到有效灭菌标准中严格按照SOP操作；使用前检查仪器；做好维护及保养；低2. 实验室实验活动类型可能造成不良后果的因素预测风险等级预姓名性别职称健康状况既往史免疫状况过敏史是否接受过生物安全培训及考核情况预防接种XXX女主任技师良好无见体检报告无是/合格有XXX女

27、副主任技师良好无见体检报告无是/合格有XXX男主管技师良好无见体检报告无是/合格有3、人员姓名性别职称健康状况既往史免疫状况过敏史是否接受过生物安全培病原微生物实验活动危险度评估课件实验室及设备病原微生物人员4.规章制度实验室病原人员4.规章制度规章制度实验室人员准入制度；菌毒种或样本等感染性材料管理制度；员工健康管理制度；生物安全工作自查制度；实验室资料档案管理制度；生物安全管理及实验人员的培训和考核制度；意外事件处理与报告制度；实验室安全保卫制度。规章制度实验室人员准入制度；菌毒种或样本等感染性材料管5.评估结论评估项目评估标准评估结果实验活动与相应的设施设备要求按BSL-2标准执行合格个

28、人防护装备要求按BSL-2标准执行合格人员生物安全和专业技术资质要求按BSL-2标准执行合格人员健康和素质要求按BSL-2标准执行合格预防和治疗措施要求按BSL-2标准执行合格菌（毒）种和实验活动等风险管理要求按BSL-2标准执行合格应急预案和措施要求按BSL-2标准执行合格5.评估结论评估项目评估标准评估结果实验活动与相应的设施设备评估结论根据上述风险评估要求及其落实情况，本实验室达到BSL-2标准，可以开展相应级别的涉及生物安全的实验活动 。评估报告交给医院生物安全管理委员会批准！评估结论根据上述风险评估要求及其落实情况，本实验室达到BSL病原微生物实验活动危害的再评估 鉴于病原微生物信息

29、不断更新和生物安全实验室活动的变更等因素，危险平估是一种动态发展的工作，下列情况应进行再评估：1生物安全实验室正式启用前 在生物安全实验室建造之前的危险评估主要用于帮助生物安全实验室设计者与使用者确定试验室的规模、设施与合理布局，其评估结果可能不够详细，与实际使用有差距。因此，在生物安全实验室正式启用前，应根据实际工作进行再评估。病原微生物实验活动危害的再评估 鉴2病原微生物的致病性、毒力、传染方式改变时 当收集到资料表明所从事病原微生物的致病性、毒力、传染方式发生变化时，应对其背景资料及时变更，并对其实验操作的安全性进行重新平估。3增加新的研究项目时 在实验活动中，如增加新的研究项目，应对该项目的活动进行评估。4分离到原来未评估过的高致病性病原微生物时 在实验活动中分离到原评估报告中未涉及的高致病性病原微生物时，应进行危害评估。2病原微生物的致病性、毒力、传染方式改变时5发现原来评估中未发现的隐患时 生物安全实验室操作人员在进行实验活动中，发现其实验过程中存在原评估报告中为发现的隐患，或者在检查与督察过程中发现存在生