吸附色谱法课件

1、吸附色谱技术目录CONTENTS吸附色谱技术概述吸附色谱技术原理吸附色谱技术应用及展望吸附色谱技术概述色谱技术（法）定义及其分类1吸附色谱技术（法）2吸附色谱操作形式3色谱法定义及其分类目前最常用的现代高效分离方法，亦可用于化合物的定性定量分析。概念：利用混合物的不同组分在两相中的分配差异进行分离的方法。分类： 按原理： 吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶过滤色谱。 按操作形式： 纸平面色谱、薄层色谱、纸色谱和柱色谱 按流动相状态： 液相色谱、气相色谱和超临界流体色谱吸附色谱法吸附色谱（Adsorption chromatography）是色谱法的一种，又称液-固色谱法，以固体吸附剂为固定

2、相，利用被分离组分对固定相表面活性吸附中心吸附能力的差异而实行分离的色谱法。按操作方式又可分为吸附柱色谱和薄层色谱。吸附分离原理吸附色谱分离过程1吸附色谱分离机制2吸附色谱三要素3吸附色谱分离过程吸附-解吸-再吸附-反复多次洗脱-被测组分分配系数不同-差速迁移-分离分配系数越大，在流动相中的浓度越高，即吸附能力越弱，该组分先流出；同理，吸附能力强的组分后流出。 分配系数：指一定温度下，处于平衡 状态时，组分在流动相中的浓度和在 固定相中的浓度之比。吸附色谱三要素1、吸附剂 吸附机理：属于物理吸附，即吸附剂通过范德华力（固体表面的作用力、氢键络合、静电引力）吸附成分。吸附剂的基本要求： a、与被

3、分离成分不发生化学反应 b、颗粒均匀 c、在所用各溶剂中不溶解 d、较大的表面积和适宜的活性 吸附剂的种类： a、亲水性吸附剂：氧化铝、硅胶、聚酰胺、氧化镁、硅 酸镁、碳酸钙、硅藻土等 b、亲脂性吸附剂：活性炭 吸附能力：亲脂性吸附剂对极性小的化合物吸附能力强；亲水性吸附剂的吸附能力与含水量有关。吸附色谱三要素最常用的吸附剂：氧化铝：具有较强的吸附性，适于分离植物中的碱性成分。吸附活性与含水量关系大，含水量越多，吸附能力越强。 吸附色谱三要素最常用的吸附剂：硅胶（SiO2xH2O）： 1、结构：内部硅氧交联结构-多孔结构； 表面有硅醇基-氢键作用-吸附活性中心。 2、优点：适用于各种样品的分离

4、 3、吸附能力：取决于骨架表面的硅醇基。 3、特性：与极性物质或不饱和化合物形成氢键物质极性 越大，吸附能力越强。 吸附色谱三要素3、被分离物质对于极性吸附剂而言： 被分离成分极性大，吸附牢，难以洗脱； 被分离成分极性小，吸附力弱，易于洗脱。选择合适吸附剂和流动相的原则：选择色谱分离条件时，必须从吸附剂，被分离物质、流动相三方面综合考虑 吸附色谱技术应用应用于各种医药品种的鉴定 例如各种医药品种成分分析、中成药鉴别和质量标准研究、纯度检查、稳定性考察和药物代谢以及合成工艺监控分析、生化和抗生素研究等方面。用于生物分子的分离纯化 例如以羟基磷灰石填充色谱柱，可具有较高的分离效率，并能保持生物分子

5、较高的活性，已广泛用于生物分子的分离纯化。其他方面应用 流动吸附色谱法测定固体比表面积，在催化剂、吸附剂、贵金属浆料、色谱担体、耐火材料及天然岩石的研究中，是一种测定比表面积的较优方法。吸附色谱技术应用上样叶黄素溶液：原料中叶黄素的质量分数为0.48%， 制成样品溶液的质量浓度为79ug/mL。 （2g树脂20mL上样溶液）图1：10种树脂对叶黄素的静态吸附量506.4ug/g463.5ug/g308.7ug/g非极性树脂单位ug/g：每克湿树脂吸附的叶黄素微克量ug/g叶黄素的纯度：皂化液的0.48%提高到5.4%叶黄素收率：92.9%吸附色谱技术应用图2：种树脂对叶黄素的静态吸附率与解析率

6、46%50%选用树脂HZ816E吸附率D解吸率吸附条件：2g树脂和20mL上样溶液，30恒温震荡10h后HPLC分析溶液中叶黄素质量浓度，计算吸附量和吸附率E。解吸条件：将吸附饱和后的树脂过滤，加入大量无水乙醇于30下恒温震荡12h，取样分析质量浓度和解吸率D。q=（0（叶黄素）-e（叶黄素）*V/m，E=0（叶黄素）-e（叶黄素）*100 0（叶黄素）D= x（叶黄素）*Vx*100 0（叶黄素）-e（叶黄素）式中0（叶黄素）为上样溶液中叶黄素的初始质量浓度（u/），e（叶黄素）为吸附饱和后上样溶液中叶黄素的质量浓度（u/），x（叶黄素）为解吸后上样溶液中叶黄素的质量浓度 （u/），为上样溶

7、液体积（），Vx为解吸液体积（）， 为树脂质量（）。吸附色谱技术应用图3：树脂HZ816在不同温度下的吸附等温线该树脂对叶黄素的最佳吸附温度为30吸附色谱技术应用表2：Langmuir和Freundlich方程拟合HZ816树脂吸附等温线结果 叶黄素的吸附过程更符合freundlich方程，表明HZ816树脂对叶黄素的吸附过程是多分子层吸附。吸附色谱技术应用穿透曲线：用层析柱做层析时，在一定波长的紫外下检测，当溶质流出层析柱，紫外检测会有峰出现，所得的这条曲线被称为穿透曲线。吸附色谱技术应用5.4%叶黄素的纯度：皂化液从0.48%提高到5.4%叶黄素收率：92.9% 参考文献JUDITH KAMMERER， REINHOLD CARLE， AND DIETMAR R. KAMMERER.Adsorption and Ion Exchange：Basic Principles and Their Application in Food Processing J. Agric. Food Chem. Vol.59.No.1,2011徐向群，陈瑞锋，王华夫。吸附色谱法用于茶多酚的分离提取。(中国农业科学院茶叶研究所茶叶化学工程农业部重点开放实验室 31008)王斌，刘道杰。羟基磷灰石色谱在生物分子分离中