川芎嗪对结扎犬LAD损伤冠脉内皮及心肌的保护作用

1、川芎嗪对结扎犬LAD损伤冠脉内皮及心肌的庇护作用何维来，陈如坤，周汝元【关键词】心肌庇护PrtetiveeffetftetraethlpyrazinenrnaryarteryendtheliuandardiausleafterLADligatin【Abstrat】AI:Texplretheprtetiveeffetftetraethlpyrazinentheendtheliuandardiausleafterauteinfartininduedindgsbyligatingtheleftanterirdesendingrnaryartery(LAD).ETHDS:Frtyfiveagedhea

2、lthyrssbreddgs(157)kgeredividedint3grups:tetraethlpyrazine(TP)grup,verapail(Ver)grupandntrlgrup.TheperatinasperfredtligatethenearpartftheLADthrughleftinialthraiinisintblk75%fthebldflrespetively.TheexpressinhangesfendtheliuderivedfatrsN,ET1,sPseletinandTnTbefreligatinandatdifferenttiepintsafterligati

3、neredetetedandPseletingenefardiausleasdeterinedbyesternbltting.RESULTS:Thediffereneassignifiantangthe3grupsatdifferenttiepintsafterligatingLAD(P0.01).TheexpressinfPseletinfardiausleashighlyupregulatedafterligatininVergrupandntrlgrup.NLUSIN:Tetraethlpyrazineaneffetivelyrestraintheinjuryfisheiaandrepe

4、rfusinnendtheliufrnaryarteryandyardialellsafterligatingLADanditigatethestensisfrnaryarteryandyardialinfartin,thuspreventingtherestensisfrnaryarteryafterrnaryarterybypassgraft.【Keyrds】endthlialells;yardialprtetin;ligustrazine;rnarystensis【摘要】目的：探究川芎嗪对结扎冠状动脉前落支LAD损伤冠状动脉内皮及心肌的庇护作用.要领：将45只犬分为川芎嗪TP，维拉帕米V

5、er和比拟组ntrl3组，结扎LAD阻断血流75%，别离测定3组结扎前及结扎后差异时段的排泄型P选择素sPseletin、内皮素1ET1、一氧化氮N及心肌肌钙卵白TTnT的含量变革，esternbltting法检测心肌构造Pselentin基因表达环境.效果：3组结扎后N，ET1，sPseletin及TnT的在差异时段含量变革组间差异有统计学意义P0.01，Pseletin基因表达TP组较低，Ver组和ntrl组有明显表达.结论：川芎嗪可有用按捺结扎LAD后缺血再灌注对冠脉内皮细胞及心肌的损伤，减轻冠状动脉局促和心肌梗死的程度.【关键词】内皮细胞；心肌庇护；川芎嗪；冠状动脉局促0弁言内皮细胞损

6、伤是引起冠状动脉搭桥术后rnaryarterybypassgraft,ABG血管桥再局促的关键缘故原由，ABG术内皮细胞和心肌庇护不停没有明显打破1.我们接纳结扎犬冠状动脉前落支(leftanterirdeendingrnaryartery,LAD)要领，造成典范的局部冠状动脉局促和心梗模子，应用川芎嗪ligustrazinertetraethlpyrazine，TP，与维拉帕米Verapail,Ver及空缺比拟组举行比拟，阐发TP对在体庞大生理状态下内皮和心肌损伤的按捺作用，探究其对冠状动脉局促的大概防治作用.1质料和要领1.1质料TP纯度：99%，无锡第七制药；Ver，上海禾丰制药.放免法

7、测定内皮活性因子ET1试剂盒及硝酸复原酶法间接测定N试剂盒由北京北免东雅生物技能研究所提供，排泄型P选择素(sPseletin)检测试剂盒及esternbltting试剂购自于Sigaheial.，快速一步法检测肌钙卵白T(ardiatrpninT,TnT)试剂盒购自美国BehringerannhEi公司；Viridia3多成效监护仪德国产,YA32麻醉呼吸机，放免检测仪，AUSN128XP/10彩色多普勒电脑显像仪美国产，探头频率2.54.0Hz.1.2要领康健杂种犬45只，体质量14.86.7kg,牝牡不限,由安徽医科大学实行动物中央提供，随机分成3组，TP组、Ver组和ntrl组空缺比拟

8、组，每组各15只.初次用3g/L戊巴比妥钠30g/kgiv开端麻醉动物后，气管插管接YA32麻醉呼吸机予机器通气，赐与室内气氛混淆氧及氟烷；Viridia3多成效监护仪一连监测心电图、直接动脉压、中央静脉压，左侧第4肋间小暗语进胸，打快乐包，寻到LAD，于LAD近端发出处约0.5，用换瓣线带针穿过前落支深面，备结扎阻断；将AUSN128XP/10彩色多普勒超声的消毒探头(2.54.0Hz)直接置于备结扎处远断冠状动脉外心表，丈量动脉的每分血流量2.按照血流量测定阻断75%并打结结实.别离于阻断前及阻断后5,15,30,45和60in经右心耳处抽血6L，备测N,ET1程度，于阻断前及阻断后3和6

9、h别离自静脉置管抽血2L备测TnT含量，及于阻断前及阻断后30in，2，6，12和24h备测Pseletin含量.于结扎后2和12h切取结扎后局部供血区心肌检测心肌构造Pseletin基因表达，并于结扎前切取正常心肌作为比拟.TP组于结扎前20in用10g/kgTP注射液iv，手术后3d一连注射TP注射液10g/(kgd)；Ver组于结扎前5in用0.5g/kgVer参加生理盐水溶液中iv，手术后3d同样一连注射Ver0.5g/(kgd)；ntrl组接纳0.9g/L生理盐水20Liv.严酷按各试剂盒说明书处置惩罚保存的被测样品，按要求接纳放免法测定ET1含量，硝酸复原酶法测定N-2/N-3程度

10、，并盘算出N的含量，快速一步法检测TnT含量，双抗体夹心法酶联免疫吸附实行ELISA法测定sPseletin含量.低温下提取心肌构造匀浆，缓冲剂(50l/LTris,pH7.5,150l/LNal,2l/LEDTA,1g/L三硝基甲苯X100,10g/L苯基烷硫酰氟化物,1g/L亮肽素,1g/L抑肽酶)处置惩罚，孵育10in，构造匀浆离心(3000r/in,5in,4)，上清液于280贮存，样品(每格100g卵白，bihiniaidassay)，参加十二烷基钠硫酸聚丙烯纤胺凝胶中电泳(50g/L堆胶,75g/L分散胶)，将印迹从明胶电转移至硝酸纤维薄膜上，关闭后,印迹加兔多克隆抗体孵育2h，(

11、15000)抗缩氨酸对应于25羧基端，Pseletin氨基酸(31)，羊抗兔抗体与辣根过氧化酶共扼，加二抗，末了冲洗印迹，用EL化学荧光底物感化，Xray胶片放射自显影不雅察.统计学处置惩罚：计量资料均以xs表现，应用SAS软件，接纳重复丈量的方差阐发，以阐发组间和组内差异明显性.2效果2.1内皮活性因子含量的变革TP组在结扎冠状动脉前落支后血浆N和ET1检测含量变革与Ver及ntrl组比拟差异有统计学意义，总模子有统计学意义(P0.01),丈量时段间及丈量时段与组别间交互作用有统计学意义(P0.01，Fig1,2).2.3TnT检测含量变革TP组在结扎LAD后各时段检测含量变革与Ver及nt

12、rl组比拟差异有统计学意义，总模子具有统计学意义(P0.01),丈量时段间及丈量时段与组别间交互作用均有统计学意义(P0.01，Fig5).3讨论本实行效果表现，TP可明显增长冠状动脉内N含量，按捺ET1天生，与Ver组及ntrl组间差异有明显性，反响其对ET1表达具有有用的调控作用.TP上调N/ET1引起其他多种内皮因子的表达变革和一系列连锁改变，N/ET1上调对减轻血管内膜增生和心肌损伤有紧张作用.N增长激活G使GP增长，或直接作用于K+通道，如大电导的钙激的钾通道BKa而发挥强盛的血管扩张作用3.ET1表达增长并与特异受体结合按捺冠状动脉紧缩及减轻末了分支血管阻力，并通过按捺ET1对血管

13、平滑肌细胞中的y等原癌基因激活作用及对抑癌基因p53表达的按捺作用，而按捺平滑肌细胞增生和迁徙，及成纤维细胞合成胶原，减轻内膜增厚4.我们创造TP可以明显按捺血浆中sPseletin增长，明显按捺心肌构造Pseletin基因表达，表白其对缺血再灌注损伤历程炎症的猛烈按捺作用.Pseletin表达和细胞间开释对白细胞进入损伤构造起着关键作用，其表达水昭雪应炎症激活程度5.别的，TP按捺血小板产生血小板源性Pseletin，可以减轻缺血再灌注损伤的炎症反响和血栓形成，进而按捺炎症和细胞毒损伤对亚细胞致死性损伤连锁反响的放大作用，淘汰炎症引起的心脏成效衰竭的产生6.结扎冠状动脉前落支后TP组TnT含

14、量升高受到明显按捺，表白TP可以减轻心肌梗死程度.心肌中存在Tn，是高特异性和敏感性Ab检测指标，夸大Tn作用及作为心肌缺血坏死指标如今已被普及推许7.Tn包罗T,I,，Tn联结原肌球卵白，配合组成横纹肌的重要紧缩单元，结扎LAD后造成局部心肌缺血，TP通过其内皮细胞庇护作用使冠状动脉扩张、微循环速率和血管开放数量增长，别的通过改变微血管内的血液流变学状态，而增长单元面积内开放的毛细血管数，以及按捺炎症作用和按捺自由基介导的构造损害作用，而缩警觉肌梗死范畴、减轻病变程度，具有明显的心肌庇护作用.我们以为TP可以按捺结扎LAD导致的对局部动脉内皮及供血区心肌损伤，增长来自盘旋支、对角支动脉以及右

15、冠动脉远段分支部门侧枝循环扩张对缺血部位的再灌注，并减轻再灌注损伤，对冠状动脉内皮及心肌有明显的庇护作用.通过其对内皮表达成效的调控作用，TP可有用防治冠状动脉局促及减轻心肌梗死程度，大概具有防治ABG术后血管桥再局促的作用.【参考文献】1HerlitzJ.Sendarypreventinafterrnaryarterybypassgraftinghatdekn?J.SandardivasJ,2022；38(2):69-74.2Krzanski,Bdzr,BrzstekT,etal.Valueftransthraiehardigraphyfrthedetetinfhighgradernarya

16、rterystensis:Prspetiveevaluatinin50nseutivepatientssheduledfrrnaryangigraphyJ.JASEhardigr,2000；13(12):1091-1099.3hinAS,GldanLE,EisenbergJ.Funtinaltestingafterrnaryarterybypassgraftsurgery:AetaanalysisJ.anJardil,2022；19(7):802-808.4BusetteN,GiaidA.Endthelin1inatherslersisandthervasulpathiesJ.anJPhysilPharal,2022；81(6):578-587.5KlvegrenH,ajeed,BengtssnT.hlaydiapneuniaebindstplateletsandtriggersPseletinexpressinandaggregatinAausalrleinardivasulardisease?J.ArterislerThrbVasBil,2022；23(9):1677-1683.6hell,astrrbertP,PattiG