齿瓣石斛不同营养器官多糖的含量测定

1、齿瓣石斛不同营养器官多糖的含量测定【摘要】目的讨论齿瓣石斛不同营养器官的多糖含量。方法采用硫酸苯酚法对齿瓣石斛根、嫩条、叶、老条多糖含量进展测定。结果嫩条中的多糖含量明显高于其它部位，其含量的顺序分别为嫩条叶根老条。结论齿瓣石斛采收嫩条部位比拟合理，老条可用于分株繁殖和压条繁殖。【关键词】齿瓣石斛；多糖；分析；硫酸苯酚法Abstrat：bjetiveTstudytheplysaharideindifferentpartsfDendrbiudevnianuPaxt.ethdsThententfplysaharideinrt,tenderstes,leaves,ldstesfDendrbiudev

2、nianuPaxt.eredeterinedithsulfuriaid-phenlethd.ResultsPlysaharidententintenderstesassignifiantlyhigherthanintherparts.Thententinrderastenderstesleavesrtsldstes.nlusinItisreasnabletharvesttenderitenisfrDendrbiudevnianuPaxt.stes,andtheldstesanbeusedfrreprdutinraetsandlayeringprpagatin.Keyrds：Dendrbiude

3、vnianuPaxt.;Plysaharide;Analysis;Sulfuriaid-phenlethd兰科多年生草本植物齿瓣石斛DendrbiudevnianuPaxt.是强阴益精的重要中药，其产量高，用量大，农户种植热情高，开展速度快，且传统评价方法认为其品质较好，可与铁皮石斛媲美，值得进展深化研究和开发1。但是，由于齿瓣石斛开发较晚，有关其品质研究的文献报道较少，仅见郑志新等2，3对石斛类药材的研究中涉及齿瓣石斛多糖的含量测定。本文采用硫酸苯酚法对齿瓣石斛不同营养器官中的多糖进展测定，旨在为人工采收和充分利用齿瓣石斛不同营养器官提供根据。1材料、仪器及试剂1.1材料齿瓣石斛材料来源于云

4、南保山市龙陵县，经笔者鉴定为DendrbiudevnianuPaxt.。将材料分级，茎剪成小段，置于60条件下烘干至恒重。粉碎过筛后置于枯燥条件下保存备用嫩条为产区的通俗说法，即当年春天发芽，冬季落叶，且未开花的茎。老条为两年生以上的茎。1.2仪器及试剂RE-201D型旋转蒸发仪上海予华；GL-26L型离心机湖南星科科学仪器；UV9100型紫光可见分光光度计上海精细科学仪器；苯酚、石油醚、无水乙醇、浓硫酸、丙酮、葡萄糖等均为分析纯。2方法与结果2.1齿瓣石斛粗多糖的提取与制备准确称取枯燥齿瓣石斛石斛粗品5.0g，参加石油醚50l6090回流脱脂2次，1h/次；再用50l80乙醇回流提取1h，以

5、5000r/in离心5in，弃去上清液，挥去溶剂，然后将沉淀物加75l蒸馏水于90水浴中浸提3次，1h/次，过滤，合并滤液，浓缩至20l，参加0.1活性炭脱色,离心，向滤液中参加无水乙醇使溶液含醇80，静置过夜，过滤，依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，于60烘干得齿瓣石斛粗多糖。2.2标准品溶液与供试品溶液的制备2.2.1标准品溶液的制备精细称取105枯燥至恒重的葡萄糖100g，加水溶解并定容至100l，再取10l，定容于100l容量瓶中，得浓度为0.01g/l的对照品贮备液。2.2.2供试品溶液的制备精细称取枯燥粉末样品各0.25g,置于圆底烧瓶，用石油醚回流脱脂2次，1h/次；加100l，8

6、0乙醇回流提取1h，以5000r/in的速度离心5in，药渣用8l，80乙醇洗涤3次，加蒸馏水85l，回流提取1h，再用5l蒸馏水洗涤烧瓶和药渣屡次，一并置于250l容量瓶中，稀释至刻度，得供试液，冰箱中放置备用。转贴于论文联盟.ll.2.3标准曲线的制备精细量取标准液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7l,分别置于试管中，加蒸馏水至2.0l，加5苯酚试剂1l，摇匀，迅速滴加浓硫酸5l，摇匀，室温显色40in。另取2l蒸馏水，加同量苯酚和浓硫酸，同法操作，作为空白对照。置于UV9100型紫外可见分光光度计中，于490n处测定吸收度，以吸收度Y对葡萄糖含量X进展回归，得回归方程

7、：Y=8.4521X+0.132，R2=0.9995。结果说明葡萄糖在0.0050.035g/l范围内呈现良好的线性关系。2.4换算因素的测定精细称取枯燥至恒重的齿瓣石斛多糖样品2.9g置于装有温水的烧杯中，用玻璃棒搅拌使其溶解，然后将其溶液转入250l容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀作储藏液。精细汲取此液0.3l，按标准曲线项下的方法测出吸收度，从回归方程中算出多糖供试液中葡萄糖的浓度。按下式计算换算因素：F=/(D)。F为换算因素；为粗多糖重量g；为多糖稀释液中葡萄糖的浓度g/l；D为稀释因子。2.5精细度实验取供试液，按上述方法操作，连续测定6次，RSD0.37。结果说明精细度良好。2

8、.6稳定性实验取供试液，按上述方法操作，每隔30in测定1次吸收度，连续4h考察其稳定性。结果说明供试液在4h显色稳定，RSD0.37。2.7加样回收率实验精细称取鱼腥草样品0.25g，参加适量葡萄糖对照品，置同一烧杯中，按供试液制备与含量测定法操作。测定结果葡萄糖的平均回收率为99.7，RSD0.37(n=6)。2.8样品含量测定取各供试品溶液，按“2.3项下方法操作，测定吸收度，从回归方程中求出供试液中葡萄糖的含量，按下式计算样品中多糖含量：多糖含量DF100/。结果见表1。表1不同营养器官多糖含量测定略3讨论野生和人工栽培的齿瓣石斛嫩条多糖含量均较高，采收时以嫩条作为主要药用部位比拟合理，老条可用于分株繁殖和压条繁殖。叶片富含多糖，应充分利用。人工栽培齿瓣石斛富含黏液，多糖含量高于野生，说明现有的栽培形式是可行的。齿瓣石斛多糖含量较高，与传统评价方法中认为其富含黏液，品质较好相一致。但是，仅通过测定多糖含量缺乏以评价其品质，应借助如今广泛开展的指纹图谱研究技术，建立其与中药质量疗效的内在联络，尝试从不同角度关注齿瓣石斛的品质，确保其有效性和平安性。【参考文献】1包雪声，顺庆生，陈立钻.中国药用石斛彩色图谱.上海：上海医科大学