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文档简介
1、红细胞膜蛋白结构测定(红细胞抗体)方法流式细胞仪(BeckmanCoulter,贝克曼库尔特)原理:直接免疫荧光法。FITC标记的各型多克隆抗体,加到全血中,与红细胞膜上 的相应的IgG-Fc片段结合,经过洗涤(和固定)等步骤后,在流式细胞仪上进 行分析。标本采集与处理受检者的准备 检查对象生活饮食处于日常状态,空腹采血。采集部位静脉采血抗凝剂EDTA或肝素抗凝血要求1.样本量至少1ml。样本应在采集后6小时内处理,冷冻的标本不能用。溶血样本不能用。试剂品牌 联科剂型规格贮存成分1:单克隆抗体液体1ML28C2:全血溶血试剂液体A:甲酸液体70ML室温B:碳酸钠等液体32ML室温C:多聚甲醛液
2、体14ML室温3:鞘液液体20L室温4:清洗液液体5L室温5:荧光微球液体10ML2-8C质控品BEKAMANCOULTER产品,未开瓶的试剂于2-8C保存,可在有效期内保 持稳定,稀释的试剂于2-8C可稳定2周;每天校准一次:遇特殊情 况随时进行校准。仪器BeckmanCoulter EPICS XL/FC500/Altra操作:1)按照要求,分别向已编好号的试管中加入10 ul单克隆抗体和同型对照 (IgG-FITC)2)分别向试管中加入混匀的100u1抗凝血(1: 200稀释后)。3)混匀,避光,室温孵育20-30分钟4)上机测样报告结果报告百分数操作性能精密度批内五次重复CV2 %灵敏度 5001000个荧光素分子参考值IgG2.98%IgD2.88%IgG2.98%IgD2.88%Ig
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