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文档简介

1、烟草的组织培育技术一、目的与要求验证“植物细胞全能性”理论 。学习用生长调整剂对植物器官发生的诱导方法。二、 试验原理植物组织培育是指在无菌条件下，分别、并在培育基中培育离体植物组织器官或细胞植物细胞的全能性，即植物体的每个活细胞都有一样的遗传组成，在适当条件下具有生殖出完整植株的力量。植物组织当中原本已经分化的细胞，组织、器官一旦脱离原有的机体环境，分化的细胞通过脱分化再分化重生长发育成完整的植株。了无序构造的细胞团。再分化：经过脱分化的细胞或组织再次获得分化成不同功能的细胞、组织、器官或完整植物体。三、 材料和用具材料：无菌烟草叶盘已经诱导成芽，拟南芥。剖刀、大、小镊子、30ml 烧杯、5

2、00ml 烧杯、药勺、玻璃棒、培育瓶、平皿、试纸，报纸等。试剂：MS培育基、0.5mol/LNaOH、1mol/LHCl。四、 操作步骤一诱导培育基配制1MS 储液储液配置见附表3/441 4 瓶培育基1 组的配置方案。表1诱导培育基配制表成分 蒸馏水MS 母液蔗糖用蒸馏水粗略定容至pH值琼脂实际称取量120 ml15 mL4.5 g 100ml5.8g加蔗糖3v。蔗糖是碳源，同时起到维持渗透压的作用。pH 过低，高温处里时间过长，都可能会使培育基不凝。加琼脂0.7-0.8v琼脂粉是固化剂、支持物。二灭菌12015min。30min。无菌间棚顶紫外灯，翻开超净台风机，关掉超净工作台上的紫外灯。

3、三70%酒精棉球擦拭双手、培育瓶和超净台面。待手上的酒精干了，点燃酒精灯。将培育瓶的盖子旋松，但不要翻开，放到无菌风道侧面备用。1-2 块，插入培育基。用酒精灯火焰上灼烧瓶口，瓶盖数秒阻断微生物进入必太紧。精灯火焰，以免火焰伤手。进出无菌间关好缓冲间的推拉门。4 周，25，16 8 70%-80%。其次周生长状况1：1 号拟南芥种子开头膨胀，略微膨大，但是并未发芽，无明显变化。 长。1：生长状态较好，发育较快，已经占据了整个培育瓶的空间，茎秆粗大，叶片绿色略带黄色，根系较兴旺，伸张至整个培育瓶的培育基。 基的外表，暴露在空气中。第三周生长状况拟南芥 1：同其次周时的状态，无明显变化。以渗透到萌发的芽中。1：生长状况与其次周时一样。有限的培育瓶生长空间与培育基中有限的营养物质，限制了烟草苗的进一步生长。但染料的颜色略微变浅。基的颜色，最初的深红色此时已成了浅红，颜色变化较大。第四周生长状况拟南芥 1：照旧无萌芽，只是种子更加膨大。芽的萌发于连续生长。物质的表现，需要移种到外部环境中。颜色加深。思考题什么是细胞全能性？或特性。具有以下两大特点：养分的物质，激素和其他适宜的外界条件下，才能表现其全能性。如成纤维细胞在离包括特定转录因子或小分子化合物的诱导下，可被重编程为诱导多能干细胞C，并发育成的个体。依据动物细胞全能性大小，可分为全能性细胞如动物早期胚胎细胞能性如原肠胚细胞，专能

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