高分子避孕复合材料在哺乳动物体内外遗传毒性检测

1、高分子避孕复合材料在哺乳动物体内外遗传毒性检测目的检测高分子避孕复合材料和金属铜在体外对哺乳动物细胞致遗传毒性的作用，评价该材料的安全性。方法采用小鼠淋巴瘤实验(MouseLymphomaAssay,MLA)和彗星实验即单细胞凝胶电泳实验(SCG)E检测各材料组对tk基因致突变能力和导致单个细胞DNA伤程度。各材料RMPI-1640浸提液经火焰原子吸收分光光度法测定铜离子浓度，预实验后选择金属铜组50%、25%、12.5%浸提液浓度，含铜复合材料组100%、50%、25%浸提液浓度，无铜复合材料组100%、50%、25%浸提液浓度分别测定致突变能力和DNA!员伤程度，溶剂对照作为阴性对照，小鼠

2、淋巴瘤实验中在有无S9mix时分别选择环磷酰胺和甲磺酸甲酯作为阳性对照。小鼠淋巴瘤实验通过计数处理当天平板、表达后平板和TFT拮抗平板的集落数测定PEQPE2和MF彗星实验以TailDNA%IOlive尾距评价细胞DNA伤程度。结果在含有铜离子的浸提液中，细胞均出现了不同程度的突变，突变频率较阴性对照组有明显升高，其中金属铜50%、25%和含铜复合材料组100%组可以致遗传毒性，含铜复合材料50%组为可疑致遗传毒性。彗星实验结果表明，各含铜复合材料组和金属铜组均可导致细胞DNA伤,TailDNA%和OTMW阴性对照组相比有显著性差异，损伤程度与浸提液中铜离子浓度有一定关系。无铜复合材料在各浓度

3、下突变频率、TailDNA%和OTM匀无明显增高结论含铜复合材料、金属铜组由于铜离子的存在体外可以致DNA伤和细胞突变，具有一定的体外遗传毒性。损伤程度与铜离子浓度存在剂量反应关系。目的研究高分子避孕复合材料和金属铜哺乳动物体内致遗传毒性的能力。方法KM小鼠（体重：25-30g）作为实验动物，各材料组生理盐水浸提，火焰原子吸收分光光度法测定铜离子浓度，选择金属铜组50%、25%、12.5%浸提液浓度,含铜复合材料组100%、50%、25%浸提液浓度，无铜复合材料组100%、50%、25%浸提液浓度，阳性对照选择环磷酰胺，浓度为40mg/kg体重，阴性对照为生理盐水。各组浸提液按照1.5ml/1

4、00g体重腹腔注射染毒动物，24小时后颈椎脱臼处死动物，胸骨骨髓涂片Giemsa染色计数含微核的嗜多染红细胞数量评定各材料体内遗传毒性。结果染毒24小时胸骨骨髓微核计数结果显示，无铜材料组各染毒浓度下微核数量无明显增加。含铜复合材料组100%、50%和25%组微核数目（每1000PCE）分别为16.0、14.6和13.4，金属铜组50%、25%和12.5%分别为11.1、14.1和12.1。与阴性对照组相比均有显著性差异（P0.05），但各组微核数量与染毒浓度并未表现出明显的剂量反应关系。结论含铜复合材料和金属铜组微核数目与阴性对照组相比均有显著性差异，但并未表现出明显的剂量反应关系，按照OE

5、CD47脂导标准，尚不能确定此两组材料具有体内遗传毒性。无铜材料组无体内遗传毒性。目的检测体外含铜复合材料浸提液处理细胞后去除处理物细胞DN战伤修复情况。方法用含铜复合材料50%和25%浸提液浓度处理小鼠淋巴瘤细胞3小时，溶剂作为阴性对照。处理后取部分细胞采用彗星实验检测细胞DNA伤程度，其余细胞在去除处理物后继续培养3小时，同样采用彗星实验测定细胞DN徽伤程度。彗星实验结果经CAS啾件分析后，TailDNA%OTM为DN战伤观测指标。含铜复合材料25%ft提液处理后以及继续培养3小时后检测细胞内RO洪光强度,ImageProPlus分析其平均荧光强度。结果细胞经两个不同含铜复合材料浸提液浓度

6、处理3小时后，细胞DNAS损，继续培养3小时后，彗星实验结果表明，细胞受损程度较处理后有所增加，TailDNA%IOTMW处理后相比有显著性差异（P<；0.05），但继续培养3小时后细胞问DNA伤程度差异增大，表明受损少的细胞得到一定的修复。细胞内RO空量在处理后和继续培养3小时平均荧光强度与阴性对照组相比有明显升高，分别为79.84、86.29和49.74。结论细胞经处理后胞内RO的量较处理前明显增高并持续存在，继续培养后由于细胞内ROS勺升高可以使细胞DNA昧续受损。损伤修复不明显。目的机体对高浓度铜离子染毒造成DNA伤修复能力检测，以及与血浆SOD含量的关系。方法用金属铜100%浸提

7、液连续7天按1.5ml/100g体重腹腔注射染毒小鼠，分别在染毒前以及每次染毒后24小时断尾取血，全血细胞进行彗星实验检测血细胞DNA伤程度，血浆用WSTt测定超氧化物歧化酶活力。彗星实验结果经CAS啾件分析后，TailDNA%OTM为DN战伤观测指标。结果金属铜100%浸提液浓度染毒连续染毒小鼠7天彗星实验结果显示，雌性小鼠于染毒后第2、3、4天DNA伤程度最严重（TailDNA%；分别为55.41%、51.05%和51.99%）,雄性小鼠于染毒后第4天DNA伤最严重（57.20%）。雌性第小鼠第5天DNA伤有明显降低（18.91%）,雄性小鼠第6天明显降低（30.89%）。第7天雌雄小鼠血细胞TailDNA%分别为11.25%?口10.81%。WSTI测定血浆内SO*量表明，雄性小鼠体内SOD量于第4天和第7天