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文档简介
1、微生物学查验重点知识总结(DOC)微生物学查验重点知识总结(DOC)15/15微生物学查验重点知识总结(DOC)微生物学查验绪论微生物的定义与特色;微生物的分类。一、微生物的见解与特色微生物(microorganism)是一群个体微小,结构简单,肉眼不可以够直接看见,必然借助于光学显微镜或电子显微镜放大数百倍至数万倍才能察看到的微小生物的总称。微生物的特色个体微小,结构简单比表面积大,汲取多,转变快生殖快,代谢强适应强,易变异种类多,散布广微生物种类依据微生物大小、结构和构成不同样分为三种类病原微生物的定义病原微生物:是指能惹起动物、植物或人类产生疾病的微生物。医学微生物学的发展简史。.微生物
2、的发现与研究1)列文虎克发显然微镜,最早察看到微生物;微生物学研究的创始人:巴斯德、科赫、李斯特第一章细菌的基本性状第一节细菌的形态与结构1.细菌细胞壁的结构和功能,肽聚糖结构及其化学构成;革兰阳性与革兰阴性细菌细胞壁的主要差别(一)细胞壁化学构成与结构,革兰染色共有组分:肽聚糖特别组分:G+菌、G-菌不同样革兰阳性菌细胞壁特别组分:磷壁酸革兰阴性菌细胞壁特别组分:外膜1微生物学查验革兰阴性菌细胞壁肽聚糖:聚糖骨架、四肽侧链2.细胞壁的功能:1)保持细菌固有形态和抵挡低渗作用。(2)物质互换作用。(3)屏障作用。(4)免疫作用。(5)致病作用。(6)与细菌药物敏感性相关。G+菌与G-菌细胞壁结
3、构比较?细菌细胞膜的结构与真核细胞基真同样,由磷脂和多种蛋白质构成,但不含胆固醇。?细菌细胞膜可形成一种独有的结构,称中介体。2.细菌荚膜、鞭毛和菌毛的功能。荚膜:功能:有抗吞噬和抵挡杀菌物质的杀菌作用,加强细菌的侵袭力,构成细菌致病力的重要要素之一。拥有免疫原性。鉴识细菌和血清学分型鞭毛:功能:细菌的运动器官菌毛一般菌毛:拥有黏附性,与细菌致病性相关。性菌毛:与细菌的遗传变异相关3.芽胞结构特色、意义、与消毒灭菌的关系;细菌L型的形态特色、查验重点。芽胞:某些细菌(主要为革兰阳性杆菌)在必然条件下,细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强,拥有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形的小体。L型细菌
4、:细胞壁缺点的细菌。常发生在作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中。依据细胞壁缺点程度分:原生质体(圆满失掉细胞壁,见于G+菌,仅在高渗环境中存活)原生质球(细胞壁部分缺损,见于G-菌,在高渗或非高渗环境中均能存活)4.G+菌和G-菌细胞壁结构的差别及其意义。第二节细菌的生理细菌的生长条件,生长周期及各期的特色;IMViC试验的构成及系统;细菌分解及合成代谢产物的种类及意义。细菌的生长生殖2微生物学查验(一)细菌生长生殖的条件充分的营养物质包含:水、碳源、氮源、生长因子等。2.适合的酸碱度多为pH7.27.6。3.适合的温度多半病原菌为3537。4.必需的气体环境主假如O2和CO2。按细菌对O2的需
5、要与否,将细菌分为:细菌生长生殖的规律细菌的生殖方式:无性二分裂。细菌的生殖速度:大部分细菌2030分钟即可分裂一次。2.细菌的营养种类和营养系统,自氧菌与异氧菌的见解。3.细菌的生长曲线及其特色。(一)能量代谢细菌获取能量的门路生物氧化。细菌能量代谢的主要种类:(二)分解代谢检测细菌糖分解产物的常用试验:糖发酵试验、甲基红试验、VP试验等。检测细菌蛋白质和氨基酸分解产物的常用试验:吲哚(靛基质)试验、硫化氢试验、苯丙氨酸脱氨酶试验等。其余检测细菌分解产物的常用试验:尿素分解试验、枸橼酸盐利用试验等。第三节细菌与环境正常菌群的见解和生理功能;条件致病菌的见解3微生物学查验2.正常菌群的生理功能
6、;条件致病菌的见解3.消毒、灭菌、无菌、无菌操作等见解;高温消毒灭菌法及其应用。二、细菌的控制(一)基本见解:消毒杀死物体或介质中病原微生物的方法。灭菌杀灭物体或介质中所有微生物的方法。无菌无活菌存在的状态。无菌操作防备微生物进入机体或物体的操作技术。防腐防备或控制细菌生长生殖的方法。4.常用物理和化学消毒灭菌方法及其应用;噬菌体与宿主的互相关系。第二章真菌的基本性状真菌的见解真菌的分类真菌孢子与细菌芽胞的差别4微生物学查验第三章病毒的基本性状病毒的大小病毒的结构病毒的增殖病毒的复制周期第四章微生物与感染细菌致病三大概素细菌内外毒素的差别毒血症、菌血症、败血症、脓毒血症的见解浑身感染的种类第二
7、篇微生物查验的基本技术第五章细菌的查验技术第一节细菌形态查验技术细菌染色的一般程序染色标本检查的一般程序革兰氏染色法、抗酸染色法的原理、方法。2.革兰染色法【方法】第二节细菌的接种与培育技术分配熔解调Ph过滤澄清分装灭菌检定保留细菌在各样培育基上的生长现象及察看重点。培育基的见解培育基的分类第三节细菌的生化判断技术糖(醇,苷)类发酵试验、O/F试验、MR试验、VP试验的原理、操作、结果判断重点及其应用;I试验、C试验、氧化酶、触酶、血浆凝结酶氢氧化钾拉丝试验及KIA和TSI的试验原理、操作要领、察看结果重点及其应用。一、碳水化合物的代谢试验1、糖(醇、苷)类发酵试验原理:多糖单糖丙酮酸酸性产物
8、(或产气)pH呈酸性变色(或出现气泡2、O/F试验原理:依据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中对氧分子需求的不同样,将细菌分为氧化、发酵和5微生物学查验产碱型三类3、甲基红试验原理:细菌发酵葡萄糖,产生丙酮酸,进一步分解生成大批混淆酸,使培育pH降落至4.4以下,加入甲基红后,表现红色反响。为甲基红试验阳性。4、V-P试验原理:细菌分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇,在碱性环境中,乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰,二乙酰与胍基化合物联合,生成红色化合物,是为V-P试验阳性。5、-半乳糖苷酶试验(ONPG)原理:有的细菌可产生-半乳糖苷酶,能分解邻硝基酚-D半乳糖苷(ONPG)而生成黄色的邻硝
9、基苯酚,该试验也称为ONPG试验。6、七叶苷水解试验原理:某些细菌能分解七叶苷产生葡萄糖与七叶素,七叶素与培育基中的Fe2+联合后,形成黑色的化合物,使培育基变黑。二、蛋白质和氨基酸的代谢2、硫化氢试验原理:细菌产生酶,分解含硫氨基酸生成硫化氢,硫化氢与培育基中的亚铁盐或铅盐联合生成黑色化合物。3、尿素酶试验原理:细菌产生脲酶,水解尿素生成氨和二氧化碳,培育基呈碱性反响4、苯丙氨酸脱氨酶试验原理:细菌产生苯丙氨酸脱氨酶,使苯丙氨酸脱氨形成苯丙酮酸,苯丙酮酸与三氯化铁作用,形成绿色化合物三、碳源利用试验枸橼酸盐利用试验原理:有的细菌能利用培育基中的枸橼酸盐作为独一的碳源,细菌在生长过程中分解枸橼
10、酸盐产生碳酸盐,使培育基呈碱性反响四、酶类试验1、氧化酶(细胞色素氧化酶)试验原理:某些细菌拥有氧化酶(细胞色素氧化酶),能将二甲基对苯二胺或四甲基对苯二胺氧化生成红色的醌类化合物2、触酶试验原理:细菌产生的触酶(过氧化氢酶)能催化过氧化氢放出初生态氧,既而形成氧分子出现气泡。3、凝结酶试验(试管法)原理:金黄色葡萄球菌能产生凝结酶,使血浆中的纤维蛋白原转变成不溶性的纤维蛋白。4、凝结酶试验(玻片法)原理:金黄色葡萄球菌能产生凝结酶,使血浆中的纤维蛋白原转变成不溶性的纤维蛋白5、硝酸盐复原试验原理:某些细菌能复原培育基中的硝酸盐为亚硝酸盐,亚硝酸盐与醋酸作用,生成亚硝酸,亚硝酸与试剂中的对氨基
11、苯磺酸作用生成重氮磺酸,再与-萘胺联合,生成N-萘胺偶氮苯磺酸(红色化合物第六章真菌查验技术真菌感染性疾病的微生物学检查原则6微生物学查验第七章病毒查验技术病毒标本的收集和运送注意事项;第八章细菌抗衡菌药物敏感试验药物敏感试验的基本见解、常用方法抗菌药物敏感试验方法纸片扩散法稀释法E-test法需氧菌及兼性厌氧菌的药物敏感试验(K-B法和稀释法的原理、方法、结果判断及正确发报告)。第三篇常有微生物判断技术第十章需氧和兼性厌氧球菌葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、淋病奈瑟菌的主要形态特色、培育特色、分类依据及分类;病原性球菌标本收集种类、查验判断程序、判断重点、查验判断依据及报告重点。第十一章革兰阴
12、性需氧和兼性厌氧杆菌第一节肠杆菌科概括肠杆菌科细菌:1.G-杆菌,多半有鞭毛、菌毛2.发酵葡萄糖,兼性厌氧3.氧化酶阴性4.复原硝酸盐为亚硝酸盐5.触酶()肠道选择性培育基:麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂、SS琼脂等肠杆菌科抗原:O抗原(菌体抗原),K抗原(荚膜抗原),H抗原(鞭毛抗原)等肠杆菌科判断依据:1.革兰染色触媒、氧化酶、硝酸盐复原3.KIA、MIU、IMViC,其余生化反响4.血清玻片凝集(判断到种、型或血清型)IMViC试验:吲哚(I)、甲基红(M)、VP(V)、枸橼酸盐利用(C)四种试验,常用于判断肠道杆菌。二、埃希菌属形态染色:1.短杆菌革兰染色阴性有鞭毛有菌毛培育特色:符合肠杆菌
13、特色EMB紫黑色有金属光彩乳糖发酵菌落S-S桃红色乳糖发酵菌落生化反响:IMViC(+-)7微生物学查验大肠杆菌KIA:AA血清型表示法:O:K:HETEC肠毒素:耐热肠毒素(ST)o不耐热肠毒素(LT),65C30min被损坏肠致病性大肠埃希菌EPEC肠侵袭性大肠埃希菌EIEC肠出血性大肠埃希菌EHEC肠凝集性大肠埃希菌EAECEIEC毒力测定试验:豚鼠眼结膜试验卫生学标准:每ml饮水中细菌总数100个,每1000ml水中大肠杆菌菌群数3个,每100ml瓶装汽水、果汁中,大肠杆菌菌群数5个。三、沙门菌属对人类有致病性:肠热症;食品中毒;败血症-形态染色:G杆菌;周身鞭毛培育和生化反响:不分解
14、乳糖分解葡萄糖;分解蛋白质,产生H2S伤寒沙门菌菌落特色(EMB、MAC):无色透明菌落伤寒沙门菌菌落特色(SS):无色透明或半透明,中心黑色菌落伤寒沙门菌KIA:KA标本采纳:第1-2W,血、骨髓;第2-3W,粪便、尿;全程取骨髓肥达反响:用已知伤寒沙门菌O、H和甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌H抗原与病人血清做定量凝集试验,用以协助诊疗肠热症。TO1:80,TH1:160;PA、PB均1:80才存心义。动向察看:双份血清抗体四倍高升有诊疗意义四、志贺菌属形态染色:符合肠杆菌特色,有菌毛,无鞭毛,无动力是本菌与其余肠道致病菌主要差别点培育特色:肠道鉴识培育基上的无色透明、乳糖不发酵菌落抗原
15、分类:依据O抗原分4群,40余型,我国常有B群A群痢疾志贺菌B群福氏志贺菌C群鲍氏志贺菌D群宋氏志贺菌8微生物学查验培育和生化反响:不分解乳糖分解葡萄糖菌落特色(EMB、MAC):无色透明菌落KIA:KAMIU:外毒素:A群(、型)产生志贺毒素(ST)有3种生物活性肠毒素:近似ETEC毒素、霍乱肠毒素作用水样泻细胞毒性:对人肝细胞、肠黏膜细胞有毒性,惹起变性坏死神经毒性:伤害动物神经系统(麻木、死亡)快速诊疗:荧光菌球试验;共同凝集试验六、变形杆菌属形态染色:有周鞭毛培育特色:扩散生长,有迁移生长现象。在培育基中(含5琼脂)加入0.1石炭酸则形成单个菌落;肠道选择性培育基上形成无色透明菌落变形
16、杆菌KIA:KA+MIU:+/-+八、耶尔森菌属历史:三次世界性大流行,是我国重点监控的自然疫源性传患病。形态染色:G球杆菌,两极浓染培育特色:一般培育基,生长迟缓,24-48h,R型“破凉帽”状菌落菌落特色(EMB、MAC):无色透明菌落甲类烈性传患病:鼠疫(黑死病)常有临床种类:腺鼠疫、败血型鼠疫、肺鼠疫标本收集:临床标本(淋奉承穿刺液、血液或痰标本);非临床标本(尸检取病变组织,鼠标本应严格消毒体表,再进行收集)第二节弧菌科一群菌体短小、曲折成弧形或直杆状的革兰阴性细菌;拥有一端单调鞭毛、运动快速;弧菌科细菌宽泛散布于自然界,以水中最为常有弧菌属(一)霍乱弧菌9微生物学查验霍乱弧菌的疫源
17、地:印度恒河三角洲(O1群,古典生物型);印尼苏拉威西岛(O1群,埃托生物型);孟加拉湾(O139群)已发生七次世界性的霍乱大流行:均由霍乱弧菌的O1群惹起,前六次为霍乱弧菌的古典生物型,第七次为埃尔托生物型形态:新从患者标本中分别出的细菌革兰染色阴性,弧形或逗点状;在患者“米泔水”样便中,可呈头尾相接的“鱼群”样摆列;菌体一端有鞭毛,悬滴察看时呈“穿越”样运动培育特色:营养要求不高,故用碱性培育基;分别(选择)能在无盐培育基中生长(差别其余弧菌);在pH8.5的碱性胨水中经3546h增菌后可在液体表面大批生殖形成菌膜抵挡力:较弱;水源性流传,水性迸发;怕酸,正常胃酸4min霍乱肠毒素(CT)
18、:最激烈的致泻毒素吐泻期:激烈吐泻、米泔样免疫力:病人愈后可获取坚固免疫O1群霍乱弧菌的O抗原:由A、B、C三种抗原由子构成;经过不同样组合可形成三个型别:由AB构成小川型、AC构成稻叶型、ABC构成彦岛型常用的选择性培育基:硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)琼脂平板:霍乱弧菌发酵蔗糖产酸,菌落呈黄色2.4号琼脂、庆大霉素琼脂:生长并将培育基中的碲离子复原成元素碲,形成灰褐色菌落中心3.能在无盐培育基上生长古典生物型和埃尔托生物型的差别试验:羊红细胞溶血;鸡红细胞凝集;V-P试验;多粘菌素B敏感试验;组噬菌体裂解;组噬菌体裂解标本收集和运送:在发病早期,尽量在使用抗菌药物以前收集标本
19、;取患者“米泔水”样便,亦可采纳呕吐物或尸体肠内容物,或采纳肛门拭子;标本应防备接触消毒液;采纳的标本最好就地接种碱性胨水增菌;不可以够实时接种者可用棉签挑取标本或将肛门拭子直接插入卡布运送培育基中动力和制动试验:直接取“米泔水”样便,制成悬滴(或压滴)标本后,在暗视线或相差显微镜下直接察看呈穿越样运动的细菌;同法从头制备另一标本涂片,在悬液中加入1滴不含防腐剂的霍乱多价诊疗血清(效价1:64),可见最先呈穿越状运动的细菌停止运动并发生凝集,则为制动试验阳性10微生物学查验快速诊疗:将标本接种于含有霍乱弧菌荧光抗体的碱性蛋白胨水中,经3746h,若有霍乱弧菌,在荧光显微镜下可见发荧光的菌球。本
20、法合用于做大批标本的初筛SPA共同凝集试验:以霍乱弧菌IgG型抗体与SPA阳性葡萄球菌联合作为试剂,与米泔水样便或增菌液作玻片凝集,立刻出现显然凝集者()为阳性粘丝试验:将0.5去氧胆酸钠水溶液于霍乱弧菌混匀制成浓重菌液,1min内悬液由混变清,并变得黏稠,以接种环挑取时能够拉出丝来(二)副溶血性弧菌拥有嗜盐性形态:革兰阴性杆菌,有鞭毛(极单毛)培育特色:在无盐培育基上不可以够生长,最适合生长的氯化钠浓度为3.5%,超出8%不可以够生长TCBS琼脂平板:蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落第三节非发酵革兰阴性杆菌非发酵革兰阴性杆菌:一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴
21、性杆菌一、假单胞菌属铜绿假单胞菌所致疾病:条件致病菌;医院感染的重要病原菌;大面积烧伤创面感染的重要病原菌生物学特色:革兰阴性,长短不一,单鞭毛,氧化酶阳性生长温度:2542分别培育与判断:1.血平板上毛玻璃样,金属光彩,生姜味可产生多种色素:荧光素与绿脓素血琼脂平板:透明溶血环O/F试验:氧化型第四节其余革兰阴性苛氧菌一、嗜血杆菌属流感嗜血杆菌所致疾病:原发化脓性感染及继发性感染,包含脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎、鼻窦炎及中耳炎等生物学特色:革兰阴性短小球杆菌分别培育:需要X、V因子;营养要求高,血琼脂平板培育基,巧克力琼脂培育基11微生物学查验菌落特色:巧克力琼脂培育基,小、无色透明菌落
22、卫星现象:当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一同培育时,凑近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较大,远离葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌菌落较小四、布鲁菌属传染源:病兽,以羊、牛、猪常有流传门路:病兽的组织、尿、乳液等经过人体的皮肤、呼吸道、消化道进入人体易动人群:发病以青壮年为主,从事兽医、皮毛加工、屠宰的工人发病率较高临床表现:长久发热、多汗;关节悲伤及浑身乏力、悲伤微生物特色:革兰阴性短小球杆菌培育特色:需氧菌,营养要求较高;生长迟缓(57天)第十二章革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌革兰阳性无芽胞杆菌白喉棒状杆菌形态与染色:G+修长微弯的杆菌;一端或两头膨大呈棒状;常摆列呈V、L、X等文字形;异染颗粒形态上
23、的鉴识特色培育特色:营养要求高,吕氏血清斜面或鸡蛋斜面亚碲酸钾BAP:选择鉴识培育基,黑色菌落鉴识依据毒力试验:1.体外法:琼脂平板毒力试验(Elek平板毒力测定);SPA共同凝集试验;对流电泳体内法:用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验第二节革兰阳性需氧芽胞杆菌属炭疽芽胞杆菌临床意义:炭疽是人兽共患的急性传患病,皮肤炭疽、肠炭疽、肺炭疽等炭疽毒素:保护性抗原、致死因子、水肿因子传染源:患病食草动物及其制品或被污染物流传门路:1.接触皮肤炭疽食用肠炭疽吸入肺炭疽形态染色:致病菌中最大的G+杆菌;两头平切、竹节状;有毒株可有显然荚膜芽胞:1.椭圆形,小于菌体,位于菌体中央多在有氧条件下形成,2530,在
24、培育基中、土壤内、动物尸体解剖后裸露在空气中,都易形成芽胞12微生物学查验在活体或圆满未解剖尸体内不形成芽胞,尸体禁止解剖培育特色:1.一般培育基上卷发状菌落2.BAP:1215h不溶血,1824h稍微溶血肉汤:絮状积淀生长明胶:371824h表面液化成漏斗状,因为细菌沿穿刺线向周围扩散形成倒松树状。5.NaHCO3BAP:有毒株-粘液型菌落,挑取时呈粘丝状(鉴识重点)无毒株粗拙型菌落抗原结构:1.菌体多糖抗原:与毒力没关,耐热、耐腐败,长时间煮沸还能够与特异性抗体发生环状积淀反响(Ascoli热积淀反响),特异性不高,可作追忆性诊疗荚膜多肽抗原:荚膜肿胀试验,对本菌判断存心义标本的收集与办理
25、:死于败血症的动物,禁止宰杀和解剖,可消毒皮肤后割取耳朵、舌尖收集少许血液串珠试验:炭疽芽胞杆菌在每毫升含有0.05-0.5U青霉素的培育基中,可发生形态变异,形成大而平均的圆球状并相连如串珠状第十三章分枝杆菌属分枝杆菌是一类修长略带曲折的杆菌,含有分枝菌酸,有分枝生长的趋向而得名。拥有抗酸性,故又称抗酸杆菌。结核分枝杆菌所致疾病:经过呼吸道、消化道和伤害的皮肤等多门路感染机体,惹起多种脏器的结核病,此中以肺结核为常有致病物质:荚膜、脂质和蛋白质等菌体成分免疫性:有菌免疫或称传染性免疫,细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用微生物特色:1.分枝状,略带曲折的抗酸杆菌,抗酸性染色法染色后结核分枝杆菌呈
26、红色,背景呈蓝色2.专性需氧,营养要求较高,最适生长温度为35,生长迟缓,25w才出现肉眼可见的如菜花式粗拙型菌落。结核菌素试验:纯蛋白衍生物(PPD),注入皮内后如受试者已感染结核,则结核菌素与致敏淋巴细胞特异性联合,形成迟发型超敏反响性炎症机体抗结核免疫特色:传染、免疫、超敏反响共存13微生物学查验第十四章厌氧性细菌破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌的形态特色、培育特色;厌氧性细菌的查验判断重点和报告方式。第十五章螺旋体、支原体、衣原体、立克次体第一节螺旋体螺旋体:是一种修长、娇贵、螺旋状、运动开朗的原核细胞型微生物钩端螺旋体所致疾病:钩端螺旋体病传染源与积蓄宿主:自然疫源性疾病,鼠类和猪
27、为主要积蓄宿主流传门路:间接接触流传(接触被含菌尿液污染的水源)、血液流传、垂直流传生物学特色:1.螺旋一端或两头呈钩状有两根周浆鞭毛,运动开朗G-,但不易着色,镀银染色成棕褐色梅毒螺旋体所致疾病:梅毒先本性:母体经过胎盘传给胎儿获取性:性流传获取性梅毒临床分期:分为三期期(早期)梅毒:感染后3周左右局部出现无痛性硬下疳,感染性极强。期梅毒:发生于硬下疳出现后28周,浑身皮肤、粘膜常有梅毒疹,浑身淋奉承肿大期(后期)梅毒:发生感染2年后,病变可涉及浑身组织和器官;基本伤害为慢性肉芽肿;病损内螺旋体少但损坏性大生物学特色:G-,但不易着色,镀银染色呈棕褐色;对青霉素、四环素、红霉素等抗生素敏感微生物学检查:标本:、期梅毒取下疳溢出液、梅毒疹渗液或淋奉承穿刺液;先本性梅毒取脐血第二节支原体支原体:是一类没有细胞壁,形态上呈多样性,可经过细菌滤器,能在无生命培育基中生长的最小的原核细胞型微生物;因其生长后能形成分枝长丝,故命名为支原体;G-,但不易着色,Giemsa染色呈淡紫色;油煎蛋样的菌落所致疾病:支原体肺炎冷凝集实验:肺炎支原体感染后,患者血清中出现冷凝集素,能在0-4条件
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