小檗碱对利血平诱导的抑郁症小鼠行为学影响的实验研究

1、PAGE 11 -小檗碱对利血平诱导的抑郁症小鼠行为学影响的实验研究王晴刘竞元齐晓娟摘要目的探討小檗碱对利血平诱导的抑郁症模型小鼠行为学变化的影响。方法将40只实验动物随机分为正常对照组、模型组、小檗碱组及氟西汀组，每组各10只。模型组、小檗碱组及氟西汀组小鼠每日腹腔注射利血平200mg/kg（生理盐水配制），正常对照组每日腹腔注射等量的生理盐水，每组小鼠连续注射4周。造模4周后采用灌胃法给药，每天1次，共21d。小檗碱组190mg/kg灌胃;氟西汀组3mg/kg灌胃;正常对照组和模型组每天给予同体积蒸馏水灌胃。采用强迫游泳、悬尾及高架十字迷宫实验法观察小鼠的行为学变化。结果与正常对照组比较，

2、模型组的悬尾不动时间及强迫游泳不动时间均明显延长（P0.01）。与正常对照组比较，小檗碱组强迫游泳不动时间缩短（P0.05）。与模型组比较，小檗碱组的悬尾不动时间及强迫游泳不动时间均缩短（P0.05）;氟西汀组的悬尾不动时间及强迫游泳不动时间均明显缩短（P0.01）。与正常对照组比较，模型组开臂区进入次数明显减少（P0.05）;与模型组比较，氟西汀组开臂区进入次数明显增多（P0.01）。与正常对照组比较，模型组开臂区滞留时间明显缩短（P0.05）;与模型组比较，小檗碱组开臂区滞留时间明显延长（P0.01），氟西汀组开臂区滞留时间明显延长（P0.01）。结论小檗碱具有抗抑郁作用。关键词小檗碱;抑

3、郁症;小鼠;行为学中图分类号R285.5文献标识码A文章编号2095-0616（2022）05-0023-04Experimentalstudyoftheeffectofberberineonbehaviorsofmicewithreserpine-induceddepressionWANGQingLIUJingyuanQIXiaojuanStaffRoomofPhysiology，QiqiharMedicalUniversity，Heilongjiang，Qiqihar161006，ChinaAbstractObjectiveToinvestigatetheeffectofberberine

4、onthebehavioralchangesinamousemodelofreserpine-induceddepression.MethodsAtotalof40experimentalanimalswererandomlydividedintothenormalcontrolgroup，themodelgroup，theberberinegroupandthefluoxetinegroup，with10miceineachgroup.Themiceinthemodelgroup，theberberinegroupandthefluoxetinegroupwereintraperitonea

5、llyinjectedwith200mg/kgreserpine（preparedinnormalsaline）everyday，thenormalcontrolgroupwasintraperitoneallyinjectedwiththesameamountofnormalsalineeveryday，andtheinjectionineachgrouplastedfor4weeks.After4weeksofmodeling，thedrugwasadministeredbygavageonceadayfor21days.Theberberinegroupwasgiven190mg/kgb

6、ygavage;thefluoxetinegroupwasgiven3mg/kgbygavage;thenormalcontrolgroupandthemodelgroupweregiventhesamevolumeofdistilledwaterbygavageeveryday.Thebehavioralchangesofmicewereobservedbyforcedswimtest（FST），tailsuspensiontest（TST）andelevatedplus-mazetest.ResultsComparedwiththenormalcontrolgroup，theimmobil

7、itytimeinTSTandimmobilitytimeinFSTinthemodelgroupweresignificantlylonger（P0.01）.Comparedwiththenormalcontrolgroup，theimmobilitytimeofforcedswimmingintheberberinegroupwasshortened（P0.05）.Comparedwiththemodelgroup，theimmobilitytimeinTSTandimmobilitytimeinFSTintheberberinegroupwereshorter（P0.05）;theimm

8、obilitytimeinTSTandimmobilitytimeinFSTinthefluoxetinegroupweresignificantlyshorter（P0.01）.Comparedwiththenormalcontrolgroup，thenumberofentriesintotheopenarmsinthemodelgroupwassignificantlyreduced（P0.05）.Comparedwiththemodelgroup，thenumberofentriesintotheopenarmsinthefluoxetinegroupincreasedsignifica

9、ntly（P0.01）.Comparedwiththenormalcontrolgroup，thetimespentintheopenarmsinthemodelgroupwassignificantlyshorter（P0.05）.Comparedwiththemodelgroup，thetimespentintheopenarmsintheberberinegroupwassignificantlylonger（P0.01）;andthetimespentintheopenarmsinthefluoxetinegroupwassignificantlylonger（P0.01）.Concl

10、usionBerberinehasantidepressanteffects.KeywordsBerberine;Depression;Mouse;Behavior抑郁症是一种常见的精神障碍性疾病，以显著而持久的情绪低落为主要临床表现，严重者会出现悲观厌世的情绪和自杀行为，患者自杀率高达12%14%1。近年来由于人们生活和工作压力的增大，该病发病率逐年上升且发病人群越发广泛，严重影响人们的身心健康2。在临床上，抑郁症还会继发或伴发其他疾病，甚至会在一定程度上加重其病情3-4。因此，人们对抑郁症的治疗越来越重视。西药治疗抑郁症主要选用丙咪嗪、氟哌噻吨美利曲辛片及新型抗抑郁焦虑药物盐酸帕罗西汀等，

11、但存在禁忌证多、成瘾性大、副作用明显、停药后易复发、有效率较低、患者依从性较差等问题5-6。因此，研究者将研究重点逐渐聚焦在具有广阔前景的植物药领域，特别是我国传统的中药领域，当前研究并开发安全且有效的抗抑郁中草药已成为研究者的共识，是目前一个新的研究热点7。本实验研究了中药小檗碱对小鼠抑郁症模型行为学改变的影响，为临床抑郁症的治疗探讨新思路并提供相应的数据支撑。1材料与方法1.1实验动物40只清潔级ICR小鼠，购于哈尔滨医科大学实验动物部，动物许可证号为SCXK（黑）2022-001，雌雄各半，体重（20.452.23）g，所有实验动物均饲养在齐齐哈尔医学院实验动物中心，动物许可证号为SYX

12、K（黑）2022-001。所有小鼠均自由进食和饮水，分笼饲养，每日日光灯照明时间为12h，温湿度条件分别为（22.322.16）和40%60%，实验动物的使用严格遵循3R原则。1.2试剂与仪器利血平注射液购自天津金耀药业有限公司（国药准字H12022905），盐酸小檗碱购自武汉远成共创科技有限公司，盐酸氟西汀片购自礼来苏州制药有限公司（国药准字J20220226），高架十字迷宫为成都泰盟科技有限公司生产。1.3方法将实验动物随机分为正常对照组、模型组、小檗碱组及氟西汀组，每组10只，每组小鼠适应性喂养3d后造模，正常对照组小鼠每日腹腔注射等量的生理盐水，模型组、小檗碱组及氟西汀组小鼠每日腹腔注

13、射利血平200mg/kg（生理盐水配制），每组小鼠连续注射4周。造模4周后采用灌胃法给药，给药剂量按动物体重折算系数公式换算。氟西汀组3mg/kg灌胃;小檗碱组190mg/kg灌胃;每天给予模型组及正常对照组同体积的蒸馏水灌胃。每天1次，共21d。1.3.1悬尾实验将胶带粘住尾巴的小鼠倒挂于水平木棍上，保持小鼠头部与地面距离为56cm，分别记录每只小鼠在实验6min内的后4min累积不动的时间。1.3.2强迫游泳实验将小鼠置于高25cm、直径18cm柱形器皿内，内装有清水，温度保持在（25.001.00），分别记录每只小鼠在实验6min内的后4min累积不动的时间。1.3.3高架十字迷宫实验测

14、试前将待测小鼠置于一个鼠笼内，先任其自由探索5min，然后迅速置于高架十字迷宫的中央平台处，使其头部正对其中任一开放臂，释放后即开始测试，每只小鼠测试5min。取出小鼠后，用酒精棉球彻底擦拭箱底，待酒精完全挥发后，继续下一只小鼠的测试8。1.4统计学方法2结果2.1悬尾实验结果比较由于实验过程中部分小鼠死亡，最终各组小鼠数量见表1所列。与正常对照组比较，模型组、小檗碱组及氟西汀组的悬尾不动时间明显延长，差异有统计学意义（F=7.080，P=0.001）;与正常对照组比较，模型组悬尾不动时间明显延长，差异有统计学意义（P=0.000），与正常对照组比较，小檗碱组悬尾不动时间延长，差异无统计学意义

15、（P=0.275），与正常对照组比较，氟西汀组悬尾不动时间延长，差异无统计学意义（P=0.246）。与模型组比较，小檗碱组悬尾不动时间明显缩短，差异有统计学意义（P=0.005）;与模型组比较，氟西汀组悬尾不动时间明显缩短，差异有统计学意义（P=0.002）。见表1。2.2强迫游泳实验结果比较与正常对照组比较，模型组、小檗碱组及氟西汀组的强迫游泳不动时间有明显改变，差异有统计学意义（F=11.916，P=0.000）;与正常对照组比较，模型组强迫游泳不动时间明显延长，差异有统计学意义（P=0.002），与正常对照组比较，小檗碱组强迫游泳不动时间缩短，差异有统计学意义（P=0.014），与正常对

16、照组比较，氟西汀组强迫游泳不动时间缩短，差异无统计学意义（P=0.352）。与模型组比较，小檗碱组强迫游泳不动时间明显缩短，差异有统计学意义（P=0.000）;与模型组比较，氟西汀组强迫游泳不动时间明显缩短，差异有统计学意义（P=0.000）。见表2。2.3高架十字迷宫实验结果比较与正常对照组比较，模型组、小檗碱组及氟西汀组开臂区进入次数有改变，差异有统计学意义（F=3.300，P=0.034）;与正常对照组比较，模型组开臂区进入次数减少，差异有统计学意义（P=0.023），与正常对照组比较，小檗碱组开臂区进入次数减少，差异无统计学意义（P=0.179），与正常对照组比较，氟西汀组开臂区进入次

17、数增多，差异无统计学意义（P=0.726）。与模型组比较，小檗碱组开臂区进入次数增多，差异无统计学意义（P=0.366）;与模型组比较，氟西汀组开臂区进入次数增多，差异有统计学意义（P=0.009）。与正常对照组比较，模型组、小檗碱组及氟西汀组开臂区滞留时间明显改变，差异有统计学意义（F=4.528，P=0.010）;与正常对照组比较，模型组开臂区滞留时间减少，差异有统计学意义（P=0.010），与正常对照组比较，小檗碱组开臂区滞留时间延长，差异无统计学意义（P=0.648），与正常对照组比较，氟西汀组开臂区滞留时间延长，差异无统计学意义（P=0.648）。与模型组比较，小檗碱组开臂区滞留时间

18、延长，差异有统计学意义（P=0.005）;与模型组比较，氟西汀组开臂区滞留时间延长，差异有统计学意义（P=0.003）。见表3。3讨论抑郁症是一种常见的精神类疾病，主要症状一般表现为长期情绪低落、思维迟钝、意志力缺乏，严重时可表现为自杀行为9。流行病学调查显示，抑郁症已经成为继冠心病之后影响人类健康的第二大类疾病，对人类的健康产生极大的危害，严重影响人们的日常生活及工作，因而受到越来越多的关注10-11。行为学测试方法有很多种，目前常见且被多数学者公认的最标准的行为学测试方法是强迫游泳实验和悬尾实验，由Isingrini等12发明，这两种测试方法是通过记录动物在强迫游泳实验和悬尾实验中的相对客

19、观指标即不动时间来量化反映动物在实验过程中的绝望程度13，因其实验操作简单以及条件容易控制，且多种抗抑郁药急性给药后其反应较为敏感，故常用于抗抑郁药物的初筛11，14-15。此外，高架十字迷宫实验也是一种比较常见的评估动物行为学的测试方法。通常情况下，正常小鼠在实验中进入开放臂较进入闭合臂的次数更多、滞留时间也更长，表示其探索新环境的行为能力更强，而抑郁模型小鼠進入开放臂的次数及滞留时间较正常小鼠明显减少16-17。小檗碱是中草药如黄连、刺檗、白毛茛等的根茎和皮中的重要成分之一，研究显示其具有多种药理作用，如抑菌、抗炎、抗病毒等，且对多种疾病具有较好的治疗作用，如肿瘤、糖尿病、心血管疾病、消化

20、道疾病等18-19。目前多项研究表明小檗碱可显著缩短动物在强迫游泳实验中的不动时间，并具有抗焦虑作用，其作用机制可能与某些神经递质如单胺类神经递质及5-羟色胺受体等有关7，20-23。本研究显示，小檗碱能明显缩短动物的强迫游泳及悬尾不动时间，与文献研究结果一致20-22。高架十字迷宫实验结果显示，与模型组比较，小檗碱组开臂区滞留时间更长，表明该实验组小鼠在行为上具有较强的探索新环境的能力，与文献研究结果一致23。但模型组与小檗碱组开臂区进入次数比较，差异无统计学意义（P0.05），可能与本研究观察的动物数量有限有关，今后应扩大研究动物数量，进一步观察小檗碱的抗抑郁效果。综合所述，提示小檗碱在利

21、血平诱导的抑郁模型小鼠中有抗抑郁作用，其作用机制有待进一步研究。参考文献1SaveanuRV，NemeroffCB.Etiologyofdepression：GeneticandenvironmentalfactorsJ.ThePsychiatricClinicsofNorthAmerica，2022，35（1）：51-71.2郝银丽.抗抑郁中药组分研究进展J.西部中医药，2022，32（11）：139-144.3于珍，邹开力，张小琴.高血压伴抑郁症与SCF及c-kit表达水平的关系研究J.湖南师范大学学报（医学版），2022，16（5）：74-76.4杨宇彤，周洪丹，高阳，等.冠心病患者合并

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