高二生物（基因工程的基本操作程序）-精讲版课件

1、湖南新宁二中生物组生物选修31.2基因工程的基本操作程序专题1 基因工程湖南新宁二中生物组目的基因的检测与鉴定基因工程的基本操作程序的步骤：目的基因的获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞湖南新宁二中生物组阅读与思考1、什么是目的基因？2、获取目的基因的方法有哪些？其操作过程分别是怎样的？一、目的基因的获取1、目的基因概念：主要指的是编码蛋白质的结构基因。也可以是一些具有调控作用的因子。2、目的基因获取方法：从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因化学方法直接人工合成湖南新宁二中生物组从基因文库中获取目的基因基因文库： 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体

2、中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。湖南新宁二中生物组基因文库 基因组文库部分基因文库（如cDNA文库）基因文库的构建过程湖南新宁二中生物组基因组文库限制酶供体细胞的全部DNA大量DNA片段拼接到载体上导入受体细胞扩增基因文库的构建过程湖南新宁二中生物组mRNA单链DNA 双链DNA逆转录cDNA文库湖南新宁二中生物组如何从基因文库中找到所需要的基因？依据目的基因的有关信息。如：根据基因的核苷酸序列 基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译产物蛋白质等特性。从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因PCR的全称： 聚合酶链式反应PCR的原理： DNA复

3、制 PCR技术扩增目的基因的前提条件：要有一段已知的目的基因的核苷酸序列。湖南新宁二中生物组利用PCR技术扩增目的基因湖南新宁二中生物组模板原料引物酶控制温度目的基因DNA四种脱氧核苷酸如单链DNA分子片段耐热的DNA聚合酶PCR仪自动调控PCR的条件：湖南新宁二中生物组PCR的过程：利用PCR技术扩增目的基因变性(90-95)复性(55-60)延伸(70-75)湖南新宁二中生物组用化学方法直接人工合成条件：基因较小，核苷酸序列已知。湖南新宁二中生物组二、基因表达载体的构建核心用切目的基因相同的限制性内切酶切割质粒湖南新宁二中生物组二、基因表达载体的构建核心湖南新宁二中生物组二、基因表达载体的

4、构建核心目的基因湖南新宁二中生物组二、基因表达载体的构建核心1、基因表达载体的组成目的基因启动子:终止子:标记基因等一段有特殊结构的DNA片段。位于基因的首端。一段有特殊结构的DNA片段。位于基因的尾端。启动子的作用：湖南新宁二中生物组二、基因表达载体的构建核心终止子作用：使转录在所需要的地方停止。标记基因作用： 是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基 因，从而将有目的基因的细胞筛选出来，如青霉素基因。 是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质。湖南新宁二中生物组二、基因表达载体的构建核心2、基因表达载体的构建目的：a.使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。b.使目的基因能够表达和发挥作用。三、目的基因导入受体细胞 1、什么是转化？ 2、目的基因导入植物细胞常用的方法是什么？具体过程是怎样的？ 3、目的