半成品生产工艺

1、半成品生产工艺第1页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二种 蛋我们生产半成品所用的种蛋是SPF蛋和非免蛋，生产冻干苗用的是SPF蛋，生产油苗用的是非免蛋。SPF是Specific Pathogen Free (无特定病原体）的缩写。SPF种蛋不含有鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病等近20种疫病抗体，种蛋纯净，可避免外源病毒干扰，适于培养病毒，从而制成优质的SPF疫苗，产生良好的免疫效果，达到免疫防病的目的。非免疫种蛋也要求品系纯正，鸡群健康，无各种疫病。SPF疫苗和普通疫苗相比，其生产工艺过程完全一致，主要区别在于疫苗的内在质量。第2页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星

2、期二种蛋的构造 种蛋由蛋壳、蛋壳膜、气室、蛋白、蛋黄、系带、胚胎七个部分组成(如图1)。 1.蛋壳 2.气室 3.外壳膜 4、5.系带 6.浓蛋白 7.稀蛋白 8.卵黄膜 9.胚胎 10.内壳膜第3页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二 胚胎发育图解未受精蛋 种蛋中通常被称为“卵 黄”的部分，实际上只是一个细胞，即雌性生殖细胞或卵子。卵黄绝大部分是营养物质，细胞核和大部分细胞质集中为一个不规则的小白点，浮于卵黄上面和卵黄膜的下面，如图中箭头所示。这种蛋虽经孵化但不能发育，称未受精蛋。 第4页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二受精蛋鸡的卵子在输卵管的漏斗部与精子

3、相遇而受精，受精卵在母体内滞留期间不断分裂，到种蛋产出体外时已分裂成一团细胞，此时为胚胎发育的囊胚期。从正面看囊胚像覆盖在卵黄表面的圆盘，中央为明区，边缘为暗区，通常称为胚盘。 受精蛋第5页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第一天 第一胚龄 照蛋 第一胚龄解剖 一日起了珠，鱼眼黄中浮 第6页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第二天 二日樱桃起，心脏开始动。 第二胚龄解剖 第7页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第三天 第三胚龄照蛋 第三胚龄解剖 三日血管成，蚊子在黄中。 第8页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第四天 第四

4、胚龄照蛋 第四胚龄解剖 四日定了位，样似小蜘蛛 第9页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第五天 第五胚龄照蛋 第五胚龄解剖 五日长软骨，黑眼显单珠 第10页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第六天 第六胚龄照蛋 第六胚龄解剖 六日胎盘动，头躯成双珠 第11页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第七天 第七胚龄照蛋 第七胚龄解剖 七日离了壳，沉人卵黄中 第12页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第八天 第八胚龄照蛋 第八胚龄解剖 八日边口硬，胎在蛋内浮 第13页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第九天 第九胚

5、龄照蛋 第九胚龄解剖 九日嘴爪分，头尾来回动 第14页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第十天 第十胚龄照蛋 第十胚龄解剖 十日显毛管，血管始加粗 第15页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第十一天 第十一胚龄照蛋 第十一胚龄解剖 十一腹毛生，尿囊全合拢 第16页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第十二天 第十二胚龄照蛋 第十二胚龄解剖 十二毛长齐，上下颚分明 第17页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第十三天 第十三胚龄照蛋 第十三胚龄解剖 十三躯体长，气室分外明 第18页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星

6、期二第十四天 第十四胚龄照蛋 第十四胚龄解剖 十四蛋白少，白朝嘴里进 第19页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第十五天 第十五胚龄照蛋 第十五胚龄解剖 十五体长大，头朝大端伸 第20页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第十六天 第十六胚龄照蛋 第十六胚龄解剖 十六绒毛爽，骨长鳞爪呈 第21页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第十七天 第十七胚龄照蛋 第十七胚龄解剖 十七肺发育，小端已封门 第22页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第十八天 第十八胚龄照蛋 第十八胚龄解剖 十八已斜口，鸡雏待转身 第23页，共53页，202

7、2年，5月20日，2点3分，星期二第十九天 第十九胚龄照蛋 第十九胚龄解剖 十九见起影，已行肺呼吸 第24页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第二十天 第二十胚龄照蛋 第二十胚龄解剖 二十闻鸣叫，陆续破壳膜 第25页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二第二十一天 二十一小鸡出，发育始结束 第26页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二种蛋的标准新鲜度：夏秋季在3日内，冬春季自7日内对种蛋新鲜度检查，可抽取种蛋打开，放入干净的玻璃平皿中，新鲜的种蛋蛋黄隆起，蛋白浓稠；不新鲜的种蛋蛋黄相对扁平，蛋白相对稀薄。种蛋内部物理性状的检查采用照蛋的方法，主要

8、查看种蛋气室的大小、是否流动以及蛋黄蛋白的状况。新鲜的种蛋气室较小，蛋黄呈暗红色或暗黄色。蛋黄发黑、气室流动的种蛋会影响孵化率，要弃去。第27页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二种蛋标准蛋重605克/枚，气室部位正常。受精率92%以上，中止率在5%以下，利用率90%以上。表面圆滑呈卵圆形，无畸形无沙壳，长轴602mm，短轴452mm。蛋壳厚度要均一，一般在0.330.35mm之间，过薄的蛋壳接种时易破碎，过厚、坚硬的“钢壳蛋”进行接种时难以做孔，不宜选用。第28页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二种蛋标准种蛋必须要求保持蛋壳清洁，有光泽且无裂痕，污壳蛋不仅容

9、易被微生物侵入蛋内，引起败坏，而且污物会堵塞气孔，影响气体交换，孵化时导致胚胎死亡，降低孵化率。种蛋保存要点：鸡蛋蛋白的凝结点为零下0.5，而当温度高于23.9时，蛋内胚胎就开始萌动，因此保存种蛋最适宜的温度为10至15，最适宜的相对湿度为70%至80%。第29页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二接 种图4 五日检各种种蛋的情况A.无精蛋 B.死胚蛋 C.弱精蛋 D.正常蛋1.气室 2.卵黄 3.血圈 4.血管 5.胚胎 6.眼睛第30页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二鸡胚的结构 第31页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二尿囊腔的接种接种

10、方法 孵育1011日龄的鸡胚，经照视后，划出气室及胚胎位置，在胚胎的一侧，避开大血管，在距离气室边缘2mm处画接种点。用酒精棉球消毒接种点，以钢锥在接种点内打一小孔，针头沿孔垂直插入气室，进入尿囊，向尿囊腔内注入0.10.2mL病毒悬液，拔出针头,直立孵化。孵化期间，每日照蛋，观察胚胎存活情况。弃去接种后24 h内死亡的鸡胚。 第32页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二尿囊腔接种 第33页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二卵黄囊接种法 接种方法 选用68日龄鸡胚，划出气室和胚胎位置，垂直放置在固定的卵架上，用酒精棉消毒气室端，在气室的中央打一小孔，针头沿小孔

11、垂直刺入约3 cm，向卵黄囊内注入0.10.5 mL病毒液。拔出针头,直立孵化37 d。孵化期间，每日照蛋，观察胚胎存活情况。弃去接种后24 h内死亡的鸡胚。第34页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二卵黄囊接种 第35页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二绒毛尿囊膜接种法 接种方法 选1012日龄鸡胚，经照视后划出气室位置并消毒。在胚胎附近略近气室处，选择血管较少的部位打一孔，另外，在气室的顶端钻一小孔，用橡皮乳头紧贴气室小孔，向外吸气，使卵窗部位的绒毛尿囊膜下陷形成一小凹，造一个人工气室。用胶布封住气室顶端的小孔，用酒精棉消毒卵窗部的卵壳，用注射器注射病毒液

12、于绒毛尿囊膜上。接种部位朝上横卧孵化，不许翻动。每日孵育检查，经4896 h，病变发育明显，鸡胚可能受感染死亡。第36页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二绒毛尿囊膜接种 第37页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二羊膜腔接种法 接种方法 选1214日龄鸡胚，经照视后划出气室位置并消毒，按绒毛尿囊膜接种法造成人工气室，撕去卵壳膜，用无菌镊子夹起绒毛尿囊膜，在无大血管处切一0.5 cm小口。用灭菌镊子夹起羊膜，针头刺破羊膜进入羊膜腔，注入毒液0.10.2 mL。横卧孵化，每日检查发育情况，24 h内死亡者弃去。通常培养35 d。第38页，共53页，2022年，5月

13、20日，2点3分，星期二羊膜腔接种 第39页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二接种法 我们通常用的是尿囊腔接种法。由尿囊腔接种病毒时，应根据不同的病毒培养所需要的时间选择最恰当的接种胚龄，以获得最高量病毒液。同时，接种操作应严格按照规定，不应伤及胚体和血管，以免影响其发育，使病毒繁殖数度降低或停止。第40页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二孵育和观察 鸡新城疫低毒力La Sota活疫苗 鸡胚接种后，每日照蛋1次，将在60小时前死亡的鸡胚弃去。60小时后，每4-8小时照蛋1次，死亡的鸡胚随时取出，直至96或120小时，不论死亡与否，全部取出，气室向上直立，至于

14、28冷却。 第41页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二孵育和观察 鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗鸡胚接种后，72小时前每日照蛋1次，弃去死胚，72小时后每4-8小时照蛋一次，将死亡的鸡胚随时取出，至96-120小时，无论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置28冷却。第42页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二孵育和观察 鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗鸡胚接种后，72小时前每日照蛋1次，弃去死胚，72小时后每4-8小时照蛋一次，将死亡的鸡胚随时取出，至96-120小时，无论死亡与否，全部取出，气室向上直立，置28度冷却。第43页，共53页，2022年，5

15、月20日，2点3分，星期二孵育和观察 鸡传染性支气管炎活疫苗鸡胚接种后，30小时前照蛋一次，弃去死胚，收取30-36小时的活胚，气室向上直立，至于28中冷却424小时。第44页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二孵育和观察 鸡新城疫中等毒力I系活疫苗 接种24小时后，每4小时照蛋一次，直48小时，死亡的鸡胚随时取出，气室部向上，在2-8中冷却，接种后24小时前及48小时死亡者弃去不用。第45页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二孵育和观察 鸡新城疫等毒力I系活疫苗 接种24小时后，每4小时照蛋一次，直48小时，死亡的鸡胚随时取出，气室部向上，在2-8度中冷却，接

16、种后24小时前及48小时死亡者弃去不用。第46页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二孵育和观察 鸡传染性法氏囊病中等毒力活疫苗 接种后，将36小时前死亡的鸡胚弃去，36小时后，每隔4-8小时照蛋一次，随时取出48-168小时内死亡鸡胚，置28冷却。第47页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二孵育和观察 鸡传染性喉气管炎活疫苗 接种后4-5日剔出死亡鸡胚，将活胚冷却致死。如采用尿囊腔接种，从72小时起，应注意观察鸡胚绒毛尿囊膜病变发展情况，可观察到绒毛尿囊膜有分散的病斑，当绒毛尿囊膜逐渐增厚，透光度减弱时，可先后取出鸡胚冷却。第48页，共53页，2022年，5月2

17、0日，2点3分，星期二收 获 根据不同病毒，收获不同时间内死亡或存活的鸡胚尿囊液和羊水。收获时，通常在收获前将鸡胚于4度放置6小时或过夜或-20度放置0.5-1小时，使血液凝固，以免收获时流出的细胞与尿囊液或羊水中的病毒发生凝聚，造成病毒低度下降。然后消毒气室部蛋壳，以无菌手术剥出气室部卵壳，揭去卵壳膜，剪破绒毛尿囊膜及羊膜（勿使卵黄破裂），再用灭菌吸管插入尿囊腔，吸取尿囊液和羊水，每若干个鸡胚的胚液混合为一组。收获后的胚液置于灭菌瓶中，加入适宜的抗生素，无检，留样后，结冻保存。在收获胚液的同时，应逐个检查鸡胚，如胎儿腐败、胚液混浊及有任何污染可疑者弃去不用。第49页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二病变及质量标准鸡新城疫低毒力La Sota活疫苗 胎儿病痕：在接种后72小时前后死亡的鸡胚，多为全身充血；72-120小时死亡的鸡胚，除有全身充血外，在头、胸、背、翅及趾端有出血点；在120小时以后死亡的鸡胚除有上述病痕外，或呈发育不全、卷曲成团、失水干硬等病变。每0.1ml病毒含量108.0EID50者可用于配制疫苗。 第50页，共53页，2022年，5月20日，2点3分，星期二病变及质量标准鸡传染性支气管炎活疫苗胎儿病痕：胎儿具有失水、蜷缩、发育小等特异性病痕每0.1ml病毒含量106.0