致病性微生物的实验诊断学基础

1、致病性微生物的实验诊断学基础何 浙 生1一、常见细菌性传染病的病原学及 血清学诊断基础法定细菌性传染病种类：甲类传染病：鼠疫、霍乱；乙类传染病：细菌性痢疾、伤寒和副伤寒、淋病、梅毒、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹伤寒；丙类传染病：肺结核、麻风病、感染性腹泻。2采样注意事项：时间性针对性防护与消毒无菌操作标记昆虫、动物标本3临 床 与 尸 解 取 材 参 考 表 病 人 取 样 解 剖 取 样 待诊 血 尿 便 痰 唾 咽 脑 腺 局 肝 脾 肺 肠 淋 骨 脑病种 液 洗 脊 穿 部 巴 髓 液 液 液 穿 结 刺斑疹伤寒 + +鼠

2、疫 + + + + + + + + +霍 乱 + +炭 疽 + + + + + + + + + +布 病 + + + + + +伤寒、副伤寒 + + + +痢 疾 + 肉毒毒素中毒 +钩 体 病 + + 注:+代表一定要取样，+代表亦应取样4样品保存：冷藏保存保存液保存5标本运送：严格包装，外表消毒，编号，登记，贴标签，严防容器破碎、滴漏，避免活标本逃逸等；附送检单，填明名称、数量、地点、时间等 ；专人护送，不要委托携带，尽快到达目的地 ；妥善保存，运送途中避免高温、日光、过度震动等 。6非污染材料检验程序动 物非污染样品保存一部分(以备再查)血清学检查镜 检细菌培养查Ag查Ab染色及非染色免

3、疫荧光镜检 鉴定镜检 分菌血清学检验G染色及其他染色免疫荧光G染色及其他染色免疫荧光镜检鉴定查抗原查抗体7被污染材料检验程序样品处理污染样品保存一部分(以备再查)上清或滤过液 (病毒)沉淀物或滤阻物(经一定稀释)接种小鼠查肉毒毒素接种幼猫查葡萄球菌肠毒素乳鼠.鸡胚.组织培养病毒、立克次体等细菌培养查抗原CFT协同SAT反向HATHAIT等镜检动物细菌培养G染色及其它染色IFT查抗原查抗体分菌镜检鉴定8细菌病原学诊断检样处理一般样品处理：包括洗脱、提取、浓缩和抗杂菌等；节肢动物标本处理蚤类：制作标本时挤出前胃，涂片，分菌时可用单体也可用群体，研碎后接种培养。蜱：用消毒液浸洗后研磨，分菌。蝇：用选

4、择性增菌液洗，培养洗液。蚊：对细菌性传染病意义不大，主要时对病毒性传染病意义较大 9病 原 鉴 定菌属的确定细菌种型的确定细菌染色 细菌生化反应试验 糖代谢试验 有机酸、铵盐反应 蛋白、氨基酸、含氮化合物 呼吸酶类试验 毒性酶类试验 胆汁（胆盐）溶菌试验 10血清学诊断基础知识（1） 抗原、抗体和补体抗原:完全Ag、半Ag、构成Ag条件，医学上主要Ag类别、共同Ag与异嗜性Ag ；抗体:基本结构、特点、功能、类别等 ；补体:概念、组成、功能 11血清学诊断基础知识（2）抗原、抗体结合原理12血清学诊断基础知识（3） 抗原、抗体反应特点特异性 阶段性 比例性 可逆性 13血清学诊断基础知识（4）

5、 抗原、抗体反应影响因素AgAb电解质温度pH14血清学诊断基本方法：玻片凝集试验试管凝集试验抗球蛋白凝集试验补体结合试验ELISA试验琼脂扩散试验免疫荧光试验15二、常见病毒性传染病的实验诊断学 基础法定病毒性传染病种类：（甲类传染病）乙类传染病：病毒性肝炎、艾滋病、脊髓灰质炎、麻疹、 流行性出血质热、狂犬病、流行性乙型脑炎。丙类传染病：流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹骊、急性出血性 结膜炎。16临床诊断 血清学诊断实验室诊断 病毒学诊断 分子病毒学诊断病毒性疾病的确诊 临床诊断实验室诊断病 毒 病 的 诊 断17采 样 标 本血液 脑脊液粪便咽分泌物（咽拭子）尿疱疹液结膜拭子痰、鼻分泌物尸检

6、：脑、肝、肺、肾、心、胃、淋巴结等器官活检：病变器官 18 基本方法： 鸡胚 病毒培养与分离 动物 细胞 细胞阳性的判断 尿液中抗原阳性 鸡胚 绒毛尿囊膜的病变 死亡 动物 发病与死亡 培养液PH变化 细胞 干扰试验 CPE 鉴定病毒 加标准血清后的中和试验 含抗原材料的抗原性检测 电子显微镜病毒检测病 毒 学 检 诊191、查抗体IgG 早期及恢复期；IgM4周内；IgA 28周。基本方法： 血凝抑制试验 （例如流感、 麻疹等） 间接血凝抑制试验 对流电泳 琼脂扩散试验 补体结合试验 酶标抗体染色试验 ELISA试验 免疫萤光试验 中和试验等血 清 学 检 诊20 基本方法： 血凝试验 间接血凝试验 血球吸