菌种衰退了咋办?该怎么预防呢_第1页
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文档简介

1、Word文档 菌种衰退了咋办?该怎么预防呢 微生物长期受到外界的影响,遗传性状必定发生某些变异。正是由于变异的存在才使得生物向前进化。然而由于突变的存在,菌种在培育或保藏过程中,可能会消失某些优良生产性状的劣化、遗传标记丢失、典型特征转变等现象,称为菌种衰退。比如苏云金芽孢杆菌由于菌种衰退,导致其新生的菌体芽孢和伴孢晶体都比较小;保藏的沙门氏菌鞭毛抗原丢失,导致H多价血清不凝固等。 1. 菌种衰退缘由菌种衰退的根本缘由是有关基因的负突变。假如掌握产量的基因发生负突变,则表现为产量下降;假如掌握孢子生成的基因发生负突变,则产生孢子的力量下降。菌种在移种传代过程中会发生自发突变。虽然自发突变的几率

2、很低(一般为10-610-9),尤其是对于某一特定基因来说,突变频率更低。但是由于微生物具有极高的代谢繁殖力量,随着传代次数增加,衰退细胞的数目就会不断增加,在数量上渐渐占优势,最终成为一株衰退了的菌株。此外,菌种衰退还有以下几种缘由:1)表型延迟造成菌种衰退表型延迟现象也会造成菌种衰退。如,在诱变育种过程中,常常会发觉某菌株初筛时产量较高,进行复筛时产量却下降了。2)质粒脱落导致菌种衰退质粒脱落导致菌种衰退的状况在抗生素生产中较多,不少抗生素的合成是受质粒掌握的。当菌株细胞由于自发突变或外界条件影响(如高温),致使掌握产量的质粒脱落或者核内DNA和质粒复制不全都,即DNA复制速度超过质粒,经

3、多次传代后,某些细胞中就不具有对产量起打算作用的质粒,这类细胞数量不断提高达到优势,则菌种表现为衰退。3)连续传代连续传代是加速菌种衰退的一个重要缘由。一方面,传代次数越多,发生自发突变(尤其是负突变)的几率越高;另一方面,传代次数越多,群体中个别的衰退型细胞数量增加并占据优势越快,致使群体表型消失衰退。4)不相宜的培育和保藏条件不相宜的培育和保藏条件是加速菌种衰退的另一个重要缘由。不良的培育条件如养分成分、温度、湿度、pH值、通气量等和保藏条件如养分、含水量、温度、氧气等,不仅会诱发衰退型细胞的消失,还会促进衰退细胞快速繁殖,在数量上大大超过正常细胞,造成菌种衰退。2. 防止菌种衰退措施采纳

4、已衰退菌种进行生产会影响生产效率,而把已衰退菌种作为阳性菌株进行检验,则会影响检验正确率。既然变异是不行避开的,那么我们应当假如避开菌种衰退呢?1)掌握传代次数尽量避开不必要的移种和传代,把必要的传代削减到最di的水平以削减突变几率。传代次数越多,产生突变的几率就越大,菌种发生衰退的机会就越高。在试验室检验或者是生产实际中,应严格掌握传代次数。中国药典当中规定,培育基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代,以防止菌株因传代次数过多引起衰退影响检验。2)利用不同类型细胞进行接种传代放线菌,霉菌用菌丝进行移种比分生孢子简单衰退,因菌丝是对核且有异核存在,所以移种霉菌相宜采纳孢子。3)良好的培育条

5、件不良的培育条件会衰退细胞的消失,因此采纳相宜的培育基进行菌种培育,以削减衰退几率4)采纳有效的菌种保藏方法依据保存时间的长短,选择相宜的保存方法。传代培育法:复苏后的第一代放于4冰箱或室温保存,定期传代培育。保藏时间依微生物种类而定。如,芽孢、霉菌、酵母菌保存6个月转一次,一般细菌1个月转一次,假单胞菌2周转一次甘油冻存法:将复活后经过性能确认的菌株新奇培育物(一般是其次代菌株),用0.85%的灭菌生理盐水(约1-2ml)洗斜面菌苔成菌悬液;将上述菌悬液吸取适量于灭菌管(冻存管)中(如,灭菌管容量为5ml,则取1.5ml菌液),加入等体积的40%灭菌甘油,混匀,密封。保藏温度为20,一般可保存1-2年。瓷珠保存管保存:菌株保藏管内含特制的小

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