均匀设计法优选枸杞提取工艺

1、均匀设计法优选枸杞提取工艺【摘要】目的优选枸杞提取工艺。方法以枸杞水提液中多糖含量为指标，采用均匀设计法挑选最正确提取工艺。结果枸杞提取工艺最好参数条件为加水量12倍，浸泡时间20in，煎煮时间20in，水提液枸杞多糖含量为333.4g。结论实验结果可为枸杞提取工艺确实定提供根据。【关键词】枸杞；提取工艺；均匀设计Abstrat：bjetiveTptiizetheextratintehnlgyfLyiubarbaruL.ethdsSeletthententsfLyiubarbaruL.plysefrtheextratslutinasthetarget,usetheunifrdesignethd

2、tptiizetheextratintehnlgy.ResultsTheptiuextratintehnlgyerequantityfater12ties,saktieas20in,detintieas20in.ThententsfLyiubarbaruL.plyseas333.4g.nlusinTheresultfthisexperientanprvidereferenettheextratintehnlgyfLyiubarbaruL.Keyrds：LyiubarbaruL.；Extratintehnlgy；Unifrdesign枸杞为茄科植物宁夏枸杞LyiubarbaruL.的枯燥成熟果实

3、，味甘、性平，具有滋补肝肾、益精明目的成效1，在国内保健食品中使用率居首位2，现代药理研究证明枸杞具有免疫调节、降血糖、降血脂、抗衰老、抗肿瘤等作用，其药理作用与所含枸杞多糖LBP有关3。制剂中枸杞多糖含量与枸杞的提取工艺亲密相关，因此选择适当的提取工艺对于进步制剂质量至为重要。文献报道的枸杞提取工艺挑选方法一般是3因素3程度的正交实验，本试验采用3因素9程度的均匀设计，以水提液的枸杞多糖含量为指标，以加水量、浸泡时间、煎煮时间为指标挑选枸杞最正确提取工艺。1仪器与材料1.2试药枸杞药材购自石河子天方恒德医药公司，经石河子大学药学院中药系李鹏教授鉴定为茄科植物宁夏枸杞的果实。苯酚重蒸、浓硫酸均

4、为分析纯。2方法与结果2.1供试液的制备精细称取枸杞药材6g，称9份，按实验设计方案进展煎煮，煎两次，合并两次煎液，滤过，定容至100l，精细量取1.00l，置10l离心管内，加无水乙醇5l，混匀，4000r/in离心10in,弃上清，沉淀加无水乙醇3l，混匀，4000r/in离心10in,弃上清重复一次，将离心管内的多糖用水溶解，转移至25l容量瓶定容，即得供试液。2.2标准液的制备精细称取105枯燥至恒重的无水葡萄糖标准品25g用蒸馏水溶解后定容至250l量瓶中，摇匀即得每1l中含无水葡萄糖0.1g。2.3最大吸收波长确实定准确汲取供试液和标准液各0.2l，分别加水至2.00l,各精细参加

5、5%苯酚溶液1.00l摇匀，迅速精细参加浓硫酸5.00l，放置5in，置沸水浴加热15in取出，再置冰水中冷却15in。精细量取蒸馏水2.00l，自“各精细参加5%苯酚起同法操作，作为空白对照，在紫外分光光度计上于400800n范围扫描，结果供试液与标准液在490n均有最大吸收，所以选择490n作为最大吸收波长。2.4标准曲线的制备准确汲取标准溶液0.10，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00，1.20l分别置具塞试管中，分别加水至2.00L，各精细参加5%苯酚溶液1.00l摇匀，迅速精细参加浓硫酸5.00l，放置5in，置沸水浴加热15in取出，再置冰水中冷却15in；精细量取蒸

6、馏水2.00l，同法做空白对照，在490n处测定吸光度，得吸光度和质量浓度得回归方程A=58.419+0.0234，R2=0.9995。结果说明葡萄糖浓度在0.00150.0125gl-1范围内与吸光度呈良好线性关系。2.5精细度实验精细量取样品液0.2l按“2.3项下方法操作，平行测定5次，RSD为0.5%,结果说明该方法精细度良好。2.6重复性实验取样品液5份，每份0.2l按“2.3项下方法操作，测定，RSD为3.6%,结果说明该方法重现性良好。2.7回收率实验精细汲取同一供试溶液0.2l，取9份，每3份分别精细参加葡萄糖标准液0.2l、0.4l、0.6l，按“2.3项下方法测定，计算回收

7、率，平均回收率为97.6%，RSD为2.46%，说明该法回收率良好。2.8均匀实验设计2.8.1指标、因素、程度确实定选择水提液中枸杞多糖含量作为指标，以加水倍数、浸泡时间、煎煮时间作为考察因素，每个因素取9个程度，因素程度表见表1。2.8.2实验安排及结果选用U995表安排试验，并按“2.1项下方法制备供试液，分别精细汲取19号各0.2l，按“2.3项下方法操作，测定供试液多糖含量。均匀实验安排及结果见表2。表1枸杞子均匀设计实验因素程度表2枸杞子浸提工艺均匀设计实验安排及结果y为实测多糖含量g，y为计算多糖含量g，相对百分误差y-y/y1002.9均匀设计实验结果处理与工艺挑选2.9.1均

8、匀设计实验结果处理采用UnifrDesignVersin2.20对实验结果进展逐步回归分析，得回归方程Y=278.3352+12.6093A-1.4912B-2.1961，剩余标准差S=6.7601，复相关系数R=0.9969，检验值F=158.0582，自由度f1=3，f2=3，F检验的临界值F(3，3)=5.39。FF，回归方程显著。2.9.2工艺参数优化及验证实验从回归方程可以看出因素A项的回归系数为正，说明加水量取程度的上限值为好，因素B、的回归系数为负，说明浸泡与煎煮时间取程度的下限为好。根据回归方程进展优化预测：A=12倍，B=20in，=20in，预测的转化率355.9g。按上述

9、优化条件精细称取枸杞药材6g，加水12倍，浸泡20in，煎煮20in，煎两次，结果：煎煮液的枸杞多糖含量为333.4%，相对百分误差为6.7。3讨论均匀设计实验结果处理采用逐步回归的方法，有时由于实验误差点的存在会导致得到的回归方程不显著，这就需要判断误差点并将其删除再进展回归计算，误差点一般通过计算指标的实验值与回归计算值之差的相对百分误差来判断4。本实验结果初步回归计算得到的回归方程不显著，通过分析得到的相对百分误差项，发现7号与8号相对百分误差较大，将其作为误差点进展试删除，得到了线性关系很好的回归方程。其余7个实验点的相对百分误差均小于10%见表2相对百分误差项，说明回归模型较好，7、8号实验点确系误差点。验证实验结果得到的枸杞多糖含量高于所有均匀设计实验点，参数优化成功。最好参数条件为A=12倍，B=20in，=20in，枸杞多糖含量为333.4g。【参考文献】1国家药典委员会.中国药典