2020版《中国药典》残留溶剂检验操作规程

1、一、目的：残留溶剂检验操作规程编写/修订人/日期年月曰部门/姓名审核人/日期年月曰部门/姓名批准人/日期年月曰部门/姓名执行日期2020年11月01日颁发部门品质部分发部门品质部制订详尽的工作程序，规范检验操作，保证检验数据的准确性。二、范围：本标准适用于样品残留溶剂的测定。三、职责：1、检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录；2、化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。四、内容：简述：药品中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。药品中常见的残留溶剂及限度见附表1，除另有规定外，第一、第二、第三类溶剂的残

2、留限度应符合表1中的规定；对其他溶剂，应根据生产工艺的特点，制定相应的限度，使其符合产品规范、药品生产质量管理规范（GMP）或其他基本的质量要求。本法照气相色谱法（见EKS0P-QC7039气相色谱检验操作规程）测定。1、色谱柱：1.1毛细管柱：除另有规定外，极性相近的同类色谱柱之间可以互换使用。1.1.1非极性色谱柱：固定液为100%的二甲基聚硅氧烷的毛细管柱。1.1.2极性色谱柱：固定液为聚乙二醇（PEG-20M）的毛细管柱。1.1.3中性色谱柱：固定液为（35%）二苯基-（65%）甲基聚硅氧烷、（50%）二苯基-（50%）二甲基聚硅氧烷、（35%）二苯基-（65%）二甲基聚硅氧烷、（14

3、%）氰丙基苯基-（86%）二甲基聚硅氧烷、（6%）氰丙基苯基-（94%）二甲基聚硅氧烷的毛细管柱等。1、1.4弱极性色谱：固定液为（5%）苯基-（95%）甲基聚硅氧烷、（5%）二苯基-（95%）二甲基硅氧烷的毛细管柱等。1.2填充柱：以直径为0.180.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或其他适宜的填料作为固定相。2、系统适用性试验：2.1用待测物的色谱峰计算，毛细管色谱柱的理论板数一般不低于5000；填充柱的理论板数一般不低于1000。2.2色谱图中，待测物色谱峰与其相邻色谱峰的分离度应大于1.5。2.3以内标法测定时，对照品溶液连续进样5次，所得待测物与内标物峰面积之比的相对标

4、准偏差（RSD）不大于5%；若以外标法测定,所得待测物峰面积的RSD应不大于10%。3、供试品溶液的制备：3.1顶空进样：除另有规定外，精密称取供试品0.1lg,通常以水为溶剂；对于非水溶性药物，可采用N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或其他适宜溶剂；根据供试品和待测溶剂的溶解度，选择适宜的溶剂且应不干扰待测溶液的测定。根据各品种项下残留溶剂的限度规定配制供试品溶液，其浓度应满足系统定量测定的需要。溶液直接进样：精密称取供试品适量，用水或合适的有机溶剂使溶解；根据各品种项下残留溶剂的限度规定配制供试品溶液，其浓度应满足系统定量测定的需要。4、对照品溶液的制备：精密称取各品种项下规定检查的有机溶剂

5、适量，采用与制备供试品溶液相同的方法和溶剂制备对照品溶液；如用水作溶剂，一般应先将待测有机溶剂溶解在50%二甲基亚砜或N,N-二甲基甲酰胺溶液中，再用水逐步稀释。若为限度检查，根据残留溶剂的限度规定确定对照品溶液的浓度；若为定量测定，为保证定量结果的正确性，应根据供试品中残留溶剂的实际残留量确定对照品溶液的浓度；通常对照品溶液的色谱峰面积不宜超过供试品溶液中对应的残留溶剂的色谱峰面积2倍同时应根据实际情况调整，并确保浓度在方法学验证的有效范围内。必要时，应重新调整供试品溶液或对照品溶液的浓度。5、测定法：5.1第一法（毛细管柱顶空进样等温法）5.1.1色谱条件：柱温一般为40100C；常以氮气

6、为载气，流速为每分钟1.02.0ml（般适用于一般内径为0.32mm或0.25mm类的色谱柱）；以水为溶剂时顶空瓶平衡温度为7085C，顶空瓶平衡时间为3060分钟；进样口温度为200C；如采用火焰离子化检测器（FID），温度为250C。5.1.2测定法：取对照品溶液和供试品溶液，分别连续进样不少于2次，测定待测峰的峰面积。5.1.3对色谱图中未知有机溶剂的鉴别，可参与附表2进行初筛。5.2第二法（毛细管柱顶空进样系统程序升温法）5.2.1色谱条件：柱温一般先在40C维持8分钟，再以每分钟8C的升温速率升至120C,维持10分钟；以氮气为载气，流速为每分钟2.0ml；以水为溶剂时顶空瓶平衡温度

7、为7085C，顶空瓶平衡时间为3060分钟；进样口温度为200C；如采用FID检测器，进样口温度为250C。具体到某个品种的残留溶剂检查时，可根据该品种项下残留溶剂的组成调整升温程序。5.2.3测定法：取对照品溶液和供试品溶液，分别连续进样不少于2次，测定待测峰的峰面积。5.2.4对色谱图中未知有机溶剂的鉴别，可参考附表3进行初筛。第三法（溶液直接进样法）可采用填充柱，亦可采用适宜极性的毛细管柱。5.3.2测定法：取对照品溶液和供试品溶液，分别连续进样23次，测定待测峰的峰面积。计算法限度检查：除另有规定外，按品种项下规定的供试品溶液浓度测定。以内标法测定时，供试品溶液所得被测溶剂峰面积与内标

8、峰面积之比不得大于对照品溶液的相应比值。以外标法测定时，供试品溶液所得被测溶剂峰面积不得大于对照品溶液的相应峰面积。5.3.3.2定量测定：按内标法或外标法计算各残留溶剂的量。6、【附注】当需要检查的有机溶剂的数量不多，且极性差异较小时，可采用等温法。当需要检查的有机溶剂数量较多，且极性差异较大时，可采用程序升温法。除另有规定外，顶空条件的选择。6.2.1应根据供试品中残留溶剂的沸点选择顶空平衡温度。对沸点较高的残留溶剂，通常选择较高的平衡温度；但此时应兼顾供试品的热分解特性，尽量避免供试品产生的挥发性热分解产物对测定的干扰。6.2.2顶空平衡时间一般为3045分钟，以保证供试品溶液的气-液两

9、相有足够的时间达到平衡。顶空平衡时间通常不宜过长，如超过60分钟，可能引起顶空瓶的气密性变差，导致定量准确性的降低。对照品溶液与供试品溶液必须使用相同的顶空条件。定量方法的验证：当采用顶空进样时，供试品与对照品处于不完全相同的基质中，故应考虑气液平衡过程中的基质效应（供试品溶液与对照品溶液组成差异对顶空气-液平衡的影响）。由于标准加入法可以消除供试品溶液基质与对照品溶液基质不同所致的基质效应的影响，故通常采用标准加入法验证定量方法的准确性；当标准加入法与其他定量方法的结果不一致时，应以标准加入法的结果为准。6.4干扰峰的排除：供试品中的未知杂质或其挥发性热降解物易对残留溶剂的测定产生干扰。干扰

10、作用包括在测定的色谱系统中未知杂质或其挥发性热降解产物与待测物的结构相同（如甲氧基热裂解产生甲醇）。当测定的残留溶剂超出限度，但未能确定供试品中是否有未知杂质或其挥发性热降解物对测定有干扰作用时，应通过试验排除干扰作用的存在。对第一类干扰作用，通常采用在另一种极性不同的色谱柱系统中对相同供试品再进行测定，比较不同色谱系统中对相同供试品再进行测定，比较不同色谱系统中测定结果的方法。如两者结果一致，则可以排除测定中有共出峰的干扰。对第二类干扰作用，通常要通过测定已知不含该溶剂的对照样品来加以判断。6.5含氮碱性化合物的测定：普通气相色谱仪中的不锈钢管路、进样器的衬管等对有机胺等含氮碱性化合物具有较

11、强的吸附作用，致使其检出灵敏度降低，应采用惰性的硅钢材料或镍钢材料管路；采用溶液直接进样法测定时，供试品溶液应不呈酸性，以免待测物与酸反应后不易汽化。通常采用弱极性的色谱柱或其填料预先经碱处理过的色谱柱分析含氮碱性化物，如果采用胺分析专用柱进行分析，效果更好。6.5.3对不宜采用气相色谱法测定含氮碱性化合物，如N-甲基吡咯烷酮等，可采用其他方法如离子色谱法等测定。6.6检测器的选择：对含卤素元素的残留溶剂如三氯甲烷等，采用电子捕获检测器（ECD）,易得到高的灵敏度。6.7由于不同的实验室在测定同一供试品时可能采用了不同的实验方法，当测定结果处于合格与不合格边缘时，以采用内标或标准加入法为准。6

12、.8顶空平衡温度一般应低于溶解供试品所用溶剂的沸点10C以下，能满足检测灵敏度即可；对于沸点过高的溶剂，如甲酰胺、2-甲氧基乙醇、2-乙氧基乙醇、乙二醇、N-甲基吡咯烷酮等，用顶空进样测定的灵敏度不如直接进样，一般不宜用顶空进样方法测定。6.9利用保留值定性是气相色谱中最常用的定性方法。色谱系统中载气的流速、载气的温度和柱温等的变化都会使保留值改变，从而影响定性结果。校正相对保留时间RART）只受柱温和固定相性质的影响，以此作为定性分析参数较可靠。应用中通常选用甲烷测定色谱系统的死体积（t0）RART=t-tR0式中：t为组分的保留时间；t为参比物的保留时间。RR6.10不同的溶剂在不同的色谱

13、系统中RART值不同，附表2和附表3分别给出了诸残留溶剂在三种极性不同的色谱系统（非极性色谱系统、中等极性色谱系统和极性色谱系统）中的RART值。附表1：药品中常见的残留溶剂及限度溶剂名称限度溶剂名称限度第一类溶剂（应该避免使用）苯0.0002第二类溶剂（应该限制使用）乙二醇0.062四氯化碳0.0004甲酰胺0.0221,2-二氯乙烷0.0005正己烷0.0291,1-二氯乙烯0.0008甲醇0.31，1，1-三氯乙烷0.152-甲氧基乙醇0.005第二类溶剂甲基丁基酮0.005（应该限制使用）甲基环己烷0.118乙腈0.041N-甲基吡啶咯烷酮0.053氯苯0.036硝基甲烷0.005三氯

14、甲烷0.006吡啶0.02环己烷0.388环丁砜0.0161,2-二氯乙烯0.187四氢化萘0.01二氯甲烷0.06四氢咲喃0.0721,2-甲氧基乙烷0.01甲苯0.089N,N-二甲基乙酰胺0.1091,1,2-三氯乙烯0.008N,N-二甲基甲酰胺0.088二甲苯0.217二氧六环0.038异丙基苯0.0072-乙氧基乙醇0.016甲基异丁基酮0.45溶剂名称限度溶剂名称限度第三类溶剂（药品GMP或其他质量要求限制使用）醋酸0.5第三类溶剂（药品GMP或其他质量要求限制使用）异丁醇0.5丙酮0.5正戊烷0.5甲氧基苯0.5正戊醇0.5正丁醇0.5正丙醇0.5仲丁醇0.5异丙醇0.5乙酸丁

15、酯0.5乙酸丙酯0.5叔丁基甲基醚0.5三乙胺0.5二甲基亚砜0.5第四类溶剂（尚无足够毒乙醇0.5理学资料）乙酸乙酯0.51,1-二乙氧基丙烷乙醚0.51,1-二甲氧基甲烷甲酸乙酯0.52,2-二甲氧基丙烷甲酸0.5异辛烷正庚烷0.5异丙醚乙酸异丁酯0.5甲基异丙基酮乙酸异丙酯0.5甲基四氢咲喃乙酸甲酯0.5石油醚3-甲基-1-丁醇0.5三氯醋酸丁酮0.5三氟醋酸通常含有60%间二甲苯、14%对二甲苯、9%邻二甲苯和17%乙苯。药品生产企业在使用时应提供该类溶剂在制剂中残留水平的合理性论证报告。附表2常见有机溶剂在等温法测定时相对于丁酮的保留值参考值非极性色谱柱中等极性色谱柱中等极性色谱柱溶

16、剂名称t/minRART溶剂名称t/minRART溶剂名称t/minRART柱温40C柱温40t柱温40C甲醇1.8280.126正戊烷1.6820.0321,1,1-三2.5720.145乙醇2.0900.268正己烷1.7870.075氯乙烷乙腈2.1790.315乙醚1.8420.097甲醇2.5740.145丙酮2.2760.368异辛烷1.9260.131正戊烷3.2850.260异丙醇2.3560.411异丙醚1.9430.138乙醇3.4660.289正戊烷2.4870.481叔丁基甲基2.0050.163乙醚3.5890.308乙醚2.4890.482醚1,1-二氯3.9410

17、.365甲酸乙酯2.5220.501正庚烷2.0210.169乙烯二甲氧基甲2.5840.534环己烷2.1590.225二甲基甲4.0490.382烷1,1-二氯乙2.2090.245烷1,1-二氯乙2.6090.547烯丙酮4.0510.383烯二甲氧基甲2.2430.259甲酸乙酯4.2900.421乙酸甲酯2.6350.561烷异丙醇4.2920.422二氯甲烷2.6550.572甲基环己烷2.4050.324乙腈4.5500.463硝基甲烷2.8070.654丙酮2.8760.515乙酸甲酯4.6060.472正丙醇2.9820.748甲酸乙酯2.9670.551二氯甲烷4.7880

18、.5011,2-二氯乙3.1090.817乙酸甲酯3.0000.564叔丁基甲5.2790.580烯1,2-二氯乙3.3470.705基醚叔丁基甲基3.2520.894烯正己烷5.8350.670醚四氢咲喃3.4030.727异丙醚6.3800.757丁酮3.4491.000甲基四氢咲3.4810.758正丙醇6.6220.796仲丁醇3.6661.117喃硝基甲烷7.7200.973正己烷3.8981.242四氯化碳3.6350.8211,2-二氯7.7710.981异丙醚3.9081.2471,1,1-三氯3.6530.828乙烯乙酸乙酯3.9131.250乙烷丁酮7.8891.000三氯

19、甲烷3.9541.272乙酸乙酯3.8100.891乙酸乙酯8.1071.035四氢咲喃4.2641.439乙酸异丙酯3.9800.960四氢咲喃8.6061.115异丁醇4.2641.440甲醇4.0620.993仲丁醇8.6281.1191,2-二氯乙4.5171.576丁酮4.0791.000三氯甲烷8.8441.154烷1,2-二甲氧4.6041.212环己烷9.4051.2441,1,1-三氯4.8081.733基乙烷四氯化碳9.8801.320乙烷甲基异丙基4.7161.257苯10.7901.467甲基异丙基4.9761.823酮1,2-二氯11.0151.503酮二氯甲烷4.7

20、581.274乙烷1,2-二甲氧4.9851.828异丙醇4.8221.3001,2-二甲11.0641.511基乙烷乙醇4.9751.362氧基乙烷苯5.2811.988苯4.9771.362异丁醇11.1021.517乙酸异丙酯5.3112.004乙酸丙酯6.0201.784异辛烷11.1331.522正丁醇5.3402.019三氯乙烯6.6432.035甲基四氢11.5191.584四氯化碳5.4702.089甲基异丁基7.2022.261咲喃环己烷5.5832.150酮乙酸异丙11.6091.598甲基四氢咲5.6762.201乙腈7.3682.328酯喃乙酸异丁酯7.4972.380

21、甲烷1.671三氯乙烯6.7602.785三氯甲烷7.9852.577柱温80C二氧六环6.8232.819仲丁醇8.3902.740丁酮3.2081.000异辛烷6.9572.891甲苯8.7462.884正庚烷4.0911.533正庚烷7.4343.148正丙醇9.2383.083甲基异丙4.1781.586乙酸丙酯4.4783.172二氧六环10.3353.526基酮甲基环己烷8.6283.7921,2-二氯乙10.8273.724正丁醇4.3531.691甲基异丁基8.7382.851烷1,1,2-三4.6161.850酮乙酸丁酯11.0123.799氯乙烯3-甲基-1-8.8703.

22、922甲基丁基酮11.4863.990甲基环己4.8692.003丁醇甲烷1.602烷吡啶9.2834.145柱温80C乙酸丙酯5.0132.090甲苯11.1805.168异丁醇3.5773.045二氧六环5.0642.121正戊醇11.3825.276正丁醇4.4604.334甲基异丁6.2782.854甲烷1.594硝基甲烷4.8854.948基酮柱温80C异丙基苯5.2885.5433-甲基-1-6.3322.886乙酸异丁酯3.6112.099吡啶5.6256.035丁醇甲基丁基酮3.8592.3453-甲基-1-丁5.9346.486吡啶6.4942.984乙酸丁酯4.2992.7

23、78醇甲苯6.6943.105氯苯5.2533.726氯苯6.4397.223乙酸异丁6.9363.251甲氧基苯7.4365.890正戊醇7.3328.527酯异丙基苯8.1486.589丁酮2.1761.000正戊醇7.5903.646丁酮2.5021.000甲烷1.491甲基丁基8.3824.124甲烷1.493柱温120C酮柱温120C甲氧基苯3.8379.890乙酸丁酯8.7734.361四氢化萘8.06729.609四氢化萘7.42724.484甲烷1.552丁酮1.6301.000丁酮1.6501.000柱温120C甲烷1.405甲烷1.404丁酮2.0811.000氯苯4.25

24、04.498异丙基苯5.4926.502甲氧基苯5.6426.744四氢化萘17.77826.318甲烷1.461附表3常见有机溶剂在程序升温法测定时相对于丁酮的保留值参考值非极性色谱柱极性色谱柱中等极性色谱柱溶剂名称t/minRART溶剂名称t/minRART溶剂名称t/minRART甲醇1.8460.127正戊烷1.6910.0331,1,1-三2.5720.145乙醇2.1210.272正己烷1.8070.076氯乙烷乙腈2.2010.314乙醚1.8560.094甲醇2.5740.145丙酮2.3030.367异辛烷1.9570.131正戊烷3.2850.260异丙醇2.4010.41

25、9异丙醚1.9660.135乙醇3.4660.289正戊烷2.5120.477叔丁基甲基2.0530.167乙醚3.5890.308乙醚2.5190.481醚1,1-二氯3.9410.365甲酸乙酯2.5440.494正庚烷2.0630.171乙烯二甲氧基甲2.6110.529环己烷2.2170.228二甲氧基4.0490.382烷1,1-二氯乙2.2670.246甲烷1,1-二氯乙2.6230.535烯丙酮4.0510.383烯二甲氧基甲2.3030.260甲酸乙酯4.2900.421乙酸甲酯2.6650.558烷异丙醇4.2920.422二氯甲烷2.6740.562甲基环己烷2.4880.

26、328乙腈4.5500.463硝基甲烷2.8390.649丙酮2.9880.513乙酸甲酯4.6060.472正丙醇3.0510.760甲酸乙酯3.0940.552二氯甲烷4.7880.5011,2-二氯乙3.1280.801乙酸甲酯3.1260.564叔丁基甲5.2790.580烯1，2-二氯乙3.5110.707基醚叔丁基甲基3.3020.892烯正己烷5.8350.670醚四氢咲喃3.5610.725异丙醚6.3800.757丁酮3.5071.000甲基四氢咲3.6530.759正丙醇6.6220.796仲丁醇3.7561.131喃硝基甲烷7.7200.973正己烷3.9661.241四

27、氯化碳3.8210.8221,2-二氯7.7710.981异丙醚3.9710.2441,1,1-三氯3.8330.826乙烯乙酸乙酯3.9811.249乙烷丁酮7.8891.000三氯甲烷4.0050.262乙酸乙酯4.0170.894乙酸乙酯8.1131.036四氢咲喃4.3870.462乙酸异丙酯4.2070.964四氢咲喃8.5661.109异丁醇4.3971.468甲醇4.2950.997仲丁醇8.5801.1111,2-二氯乙4.61241.581丁酮4.3031.000三氯甲烷8.7621.140烷1,2-二甲氧4.8751.212环己烷9.2021.2111,1,1-三氯4.84

28、31.702基乙烷四氯化碳9.5371.265乙烷甲基异丙基5.0051.260苯10.1041.356甲基异丙基5.0871.830酮异丁醇10.2181.375酮二氯甲烷5.0411.2731,2-二甲10.2201.3751,2-二甲氧5.0991.837异丙醇5.0691.284氧基乙烷基乙烷乙醇5.2751.3601,2-二氯10.2271.376苯5.3801.984苯5.2751.360乙烷乙酸异丙酯5.3981.994乙酸丙酯6.4371.790异辛烷10.2841.385正丁醇5.4021.996三氯乙烯7.1082.039甲基四氢10.4931.419四氯化碳5.5012.048甲基异丁基7.7352.271咲喃环己烷5.6492.126酮乙酸异丙10.4981.420甲基四氢咲5.7392.173乙腈7.8922.329酯喃乙酸异丁酯8.0682.394正庚烷10.8061.469三氯乙烯6.8152.738三氯甲烷8.5332.566甲基异丙10.9711.496异辛烷6.9282.798仲丁醇8.8482.683基酮二氧